Profil vírusu Herpes simplex (HSV1, HSV2) -IgG; Vojenská pohotovostná fakultná nemocnica
Protilátkový profil vírusu Herpes simplex (HSV1, HSV2) -IgG
Všeobecné informácie
Vírus Herpes simplex (HSV) je starodávny a všadeprítomný vírus, ktorý sa u ľudí podieľa na tvorbe akútnych a opakujúcich sa infekcií.
Prenos sa uskutočňuje prostredníctvom úzkeho kontaktu s infikovanými ľuďmi. Vírus vstupuje do slizníc (očných, orálnych a genitálnych) a replikuje sa lokálne. Klinický priebeh infekcie je rôzny a príznaky môžu byť niekedy minimálne a môžu zostať nepovšimnuté. Hlavnými znakmi a príznakmi sú ústa a vyrážka, lézie genitálneho traktu a neonatálny herpes. U malého percenta postihnutých jedincov môže vírus preniknúť do ganglií citlivého nervového koreňa a spôsobiť opakované infekcie.
Herpes vírus je tiež častou príčinou infekcií u pacientov s oslabenou imunitou (neoplastických, HIV pozitívnych).
V roku 1960 sa zistilo, že existujú dva odlišné typy vírusu herpes: HSV1 a HSV2. HSV1 je spájaný hlavne s infekciami očí a úst, zatiaľ čo HSV2 spôsobuje genitálne lézie. Prevalencia infekcií HSV1 v bežnej populácii sa odhaduje na 70-80%, zatiaľ čo v prípade HSV2 je to asi 17-25%.
Aj keď sa HSV1 a HSV2 prenášajú rôznymi spôsobmi a ovplyvňujú rôzne oblasti tela, často sa epidemiológia a klinické prejavy infekcií spôsobených týmito dvoma vírusmi prekrývajú.
Primárne infekcie HSV1 sa získavajú prevažne v detstve; po orofaryngeálnej infekcii vírus kolonizuje ganglium trojklaného nervu, kde zostáva v latentnom stave. Najdôležitejším klinickým prejavom u detí je gingivostomatitída, zatiaľ čo vo vyššom veku sú charakteristické infekcie horných dýchacích ciest a syndróm podobný infekčnej mononukleóze.
U väčšiny ľudí s klinicky manifestnými infekciami HSV1 sa vyvinie najmenej jedna opakujúca sa epizóda do 1 roka od primárnej infekcie. Reaktivácia infekcie je spojená s léziami sliznice a v ústach.
Genitálny herpes môže byť vyvolaný ako HSV1 (15% prípadov), tak HSV2 (85% prípadov). Primárne infekcie HSV2 sa získavajú primárne sexuálne, čo súvisí so sexuálnou promiskuitou, ktorá zahŕňa nástup sexuálneho života vo veľmi mladom veku, pozitívnu anamnézu iných sexuálne prenosných chorôb a veľké množstvo sexuálnych partnerov. Spočiatku sa replikácia HSV2 vyskytuje v genitálnej oblasti, po ktorej nasleduje kolonizácia sakrálnych ganglií. Medzi príznaky primárnej infekcie patrí svrbenie, lokálna bolesť a lymfadenopatia. U žien sa infekcia prejavuje výskytom pľuzgierov na slizniciach pier a vagíny, zatiaľ čo u mužov sú lézie lokalizované na žaluďi, predkožke. Primárne lézie sú často sprevádzané systémovými príznakmi, ako sú: horúčka, bolesti hlavy, svetloplachosť, myalgia, celková nevoľnosť. Atypické formy genitálneho herpesu - veľké vredy hyperkeratózy sú opísané u osôb so zníženou imunitou.
Infekcia HSV2 je rizikovým faktorom prenosu HIV; u pacientov s AIDS môže HSV spôsobiť pretrvávajúcu kožnú infekciu slizníc.
Novorodenecký opar, ktorý môže byť spôsobený ktorýmkoľvek typom HSV, má najvážnejšie dôsledky a je získaný prevažne intrapartom, keď plod prechádza cervikálnym kanálom. Infekcia je často subklinická (nedostatok hlásení o genitálnych léziách), najmä u tehotných žien, ktoré predtým prišli do styku s HSV1.
Frekvencia vrodených infekcií HSV2 sa považuje za 1 na 2 000 - 5 000 pôrodov. Prenos infekcie v prvých týždňoch tehotenstva môže byť spojený s potratom. Infekcie vyvinuté neskôr môžu spôsobiť mikrocefáliu alebo hydrancefáliu a poškodenie očí (mikroftalmia, keratokonjunktivitída a retinitída). Poruchy boli opísané pri primárnych aj reaktivovaných infekciách.
Diagnóza infekcií HSV sa zvyčajne stanovuje na základe klinických prejavov a laboratórnych vyšetrení, ako je detekcia vírusovej DNA, vírusové kultúry a sérologické testy. Diferenciácia medzi infekciami HSV1 a HSV2 je obzvlášť užitočná u pacientov so subklinickými alebo nepozorovanými infekciami. Hlavné situácie, v ktorých je zvlášť dôležité rozlišovať medzi HSV1 a HSV2, sú tieto:
- Stanovenie rizika vrodených infekcií a poradenstvo tehotným ženám (identifikácia tehotných žien so subklinickými infekciami HSV-2, ako aj séregatívnych HSV, u ktorých je riziko získania infekcie od HIV pozitívneho a HSV-2 partnera)
- Stanovenie pravdepodobnosti reaktivácie infekcie (vyššia v prípade HSV2)
- Zavedenie antivírusovej liečby (môže sa líšiť v závislosti od typu HSV).
Stanovenie protilátok proti vírusu herpes je tiež široko používané v transplantačných centrách, darcoch a príjemcoch kostnej drene.
Detekcia protilátok IgM je užitočná na potvrdenie aktívnej infekcie; má klinický význam najmä v diagnostike novorodeneckej infekcie a herpetickej encefalitídy.
Výcvik pacientov - testy nevyžadujú predchádzajúcu prípravu.
Odobratý exemplár - Venózna krv.
Zberová nádoba - vacutainer bez antikoagulancia s/bez separačného gélu.
Po zbere potrebné spracovanie - sérum sa oddelí odstredením.
Objem vzorky - minimálne 1 ml séra (na stanovenie oboch typov protilátok).
Príčiny odmietnutia dôkazov - hemolyzovaný exemplár.
Stabilita vzorky - separované sérum je stabilné niekoľko hodín pri izbovej teplote; 4 dni pri 2 - 8 ° C; dlhšie obdobie pri -20 ° C.
Rozmrazené vzorky centrifugujte a použite supernatant. Zabráňte opakovanému zmrazovaniu/rozmrazovaniu.
Metóda a interpretácia výsledkov
V laboratóriu Synevo sa protilátky IgG a IgM na HSV1 a HSV2 detegujú osobitne pomocou nasledujúcich pracovných metód:
1. pre protilátky IgG: imunochémia s detekciou elektrochemiluminiscencie (ECLIA)
2. pre protilátky IgM: ELISA.
Referenčné hodnoty:
Výsledky sú vyjadrené ako index pre IgG protilátky a v U jednotkách pre IgM protilátky:
HSV1 IgG
> = 0,6 si
> = 1: Pozitívne
HSV2 IgG
> = 0,51 si
> = 1: Pozitívne
HSV1 IgM
9: Negatívne
9-11: Omyl
> 11: Pozitívne
HSV2 IgM
9-11: Omyl
> 11: Pozitívne
Interpretácia výsledkov
HSV1 a HSV2 IgG
Ľudia infikovaní HSV1 alebo HSV2 nemusia mať v počiatočných štádiách infekcie detekovateľné hladiny IgG protilátok.
IgG protilátky sa začnú zvyšovať 1 - 2 týždne po primárnej infekcii, maximum dosiahnu za 6 - 8 týždňov, potom sa postupne znižujú. Úrovne protilátok môžu byť v obdobiach medzi reaktiváciami veľmi nízke alebo nedetegovateľné.
Získanie nejednoznačného výsledku si vyžaduje opakovanie zberu po 2 - 3 týždňoch.
Preukázanie aktívnej infekcie sérokonverziou protilátok IgG (negatívne → pozitívne) alebo zdvojnásobenie hladiny protilátok IgG v párových sérach získaných medzi 14 až 21 dňami.
HSV1 a HSV2 IgM
Získanie pozitívneho výsledku naznačuje aktívnu infekciu.
Dosiahnutie nejednoznačného výsledku si vyžaduje opakovanie zberu za 1-2 týždne.
Reaktivácia vírusu môže, ale nemusí, spôsobiť detekovateľné hladiny IgM protilátok.
Limity a rušenie
HSV1 a HSV2 IgG
Získané výsledky musia vždy korelovať s klinickou diagnózou a inými laboratórnymi testami.
Prítomnosť protilátok IgG v jednej vzorke nie je dostatočná na rozlíšenie medzi aktívnou infekciou a anamnézou infekcie. Potvrdenie aktívnej infekcie sa vykonáva uskutočnením IgM protilátok, čo preukazuje významné zvýšenie dynamiky IgG protilátok alebo priamou kultiváciou vírusu v léziách.
U pacientov so zníženou imunitou by sa mala interpretácia výsledkov robiť opatrne.
Môže spôsobiť rušenie niektorých komponentov súpravy a viesť k nasledujúcim nepresvedčivým výsledkom:
- liečba biotínom vo vysokých dávkach (> 5 mg/deň); preto sa odporúča odobrať krv najmenej 8 hodín po poslednom podaní;
- veľmi vysoké titre anti-streptavidínových a anti-ruténiových protilátok.
HSV1 a HSV2 IgM
Aj keď prítomnosť protilátok IgM naznačuje aktívnu infekciu, neumožňuje odlíšenie primárnej infekcie od reaktivácie.