Genetická predispozícia na celiakiu (HLA-DQ2DQ8) - Synevo

Celiakia (nazývaná aj celiakia, intolerancia lepku, gluténová enteropatia, celiakálne alebo netropické sprue) je chronická zápalová porucha trávenia spôsobená požitím lepku, ktorá bráni vstrebávaniu živín, vitamínov a minerálov črevom. Vyznačuje sa citlivosťou udržiavanou po celý život na frakcie gluténu rozpustné v alkohole: pšeničný gliadín a prolamíny z jačmeňa, raže a ovsa, citlivosť zistená u ľudí geneticky náchylných. Z lepkových frakcií je najtoxickejšou zložkou gliadín. Nejde o alergiu, ale o autoimunitné ochorenie sprostredkované T lymfocytmi, pri ktorom sa tkanivová transglutamináza z tenkého čreva vytvára spolu s potravou gliadínom samotným autoantigénom. Pretože iba určité antigény HLA viažu gliadín a prezentujú ho imunitnému systému, choroba sa vyskytuje u nosičov týchto antigénov. To vysvetľuje familiárny charakter tohto ochorenia, pričom sa zaznamenáva prevalencia 10% u príbuzných prvého stupňa postihnutých osôb a zhoda choroby až 70% u monozygotných dvojčiat.

Celiakia je v populácii pomerne častá, v Európe s prevalenciou 1: 200 - 1: 500. Ženy sú postihnuté 2-3 krát viac ako muži 1 .

Rovnako ako v prípade iných autoimunitných zápalových ochorení v patogenéze celiakie sú to inkriminované genetické faktory (prítomnosť určitých antigénov HLA), zaťaženie tela lepkom, ako aj ďalšie nedostatočne charakterizované faktory, ktoré uprednostňujú výskyt prejavov u niektorých ľudí s genetickou predispozíciou 2 .

Náchylnosť na celiakiu spôsobujú určité alely HLA triedy 2 v oblasti HLA-DQ. Väčšina pacientov (90-95%) má teda heterodimér HLA-DQ2 kódované alelami DQA1 * 05 a DQB1 * 02 (tiež nazývaný HLA DQ2.5), zatiaľ čo

5% má heterodimér HLA-DQ8 kódované alelami DQA1 * 03 a DQB1 * 0302. Väčšina pacientov má haplotyp DR3-DQ2 (DRB1 * 0301-DQA1 * 0501-DQB1 * 0201) alebo sú heterozygotné pre DR5-DQ7/DR7-DQ2 (DRB1 * 11/12-DQA1 * 0505-DQB1 * 0301/DRB1 * 07-DQA1 * 0201 - DQB1 * 0202). To znamená, že dimérna molekula DQ2 pozostávajúca z a reťazca a β reťazca môže byť kódovaná alelami DQA1 * 0501 a DQB1 * 0201 umiestnené na rovnakom chromozóme (cis konfigurácia - obr. 1A) alebo alelách DQA1 * 0505 a DQB1 * 0202 umiestnené na rôznych chromozómoch (trans konfigurácia - obr. 1A). Pacienti negatívni na DQA1 * 05 a DQB1 * 02 sú často pozitívni na haplotyp DRB1 * 04-DQA1 * 03- DQB1 * 0302 (haplotyp DR4-DQ8). Molekula DQ8 tiež pozostáva z a reťazca a p reťazec je kódovaný alelami umiestnenými na rovnakom chromozóme (cis konfigurácia - obr. 1C). Veľmi zriedka majú pacienti na sebe iba α reťazec (* 0501 alebo * 0505) alebo iba β reťazec (* 0201 alebo * 0202) heterodiméru DQ2 (polovica heterodiméru DQ2) 2; 3; 4; 5 .

predispozícia
hla-dq2dq8

Obr. 1 Tvorba molekúl DQ2 a DQ8 (adaptácia po celiakii, prehľad génov)

Náchylnosť na ochorenie genotypu HLA-DQ2 sa prenáša autozomálne dominantne alebo autozomálne recesívne v závislosti od predisponujúcich HLA genotypov rodičov (pozri obr. 2A). Náchylnosť na ochorenie genotypu HLA-DQ8 sa prenáša autozomálne dominantne (pozri obr. 2B).

genetická
genetická

Obr. 2 Spôsob prenosu citlivosti súvisiaci s DQ2 (A) a DQ8 (B) v rodinách, v ktorých jeden z rodičov predstavuje príslušný predisponujúci HLA haplotyp a druhý tento haplotyp nepredstavuje. Variant HLA-DQB1 * 0302 sa vždy dedí spolu so sekvenciou HLA-DQA1 * 03 kvôli väzbovej nerovnováhe (Adaptation after Celiac Disease, Gene Reviews)

Pretože 30% bežnej populácie má jednu z HLA alel spojených s celiakiou (kódujúcich heterodiméry DQ2 a/alebo DQ8) a iba u 3% tých s jedným alebo s dvoma heterodimérmi sa ochorenie rozvinie, identifikácia týchto alel nestanovuje diagnózu, ale naznačuje iba zvýšené riziko. Na druhej strane absencia akejkoľvek alely HLA spojenej s celiakiou túto diagnózu prakticky vylučuje 1 .

Diagnóza celiakie sa potvrdzuje vykonaním biopsie črevnej sliznice, ktorá vykazuje charakteristické zmeny (lézie s rôznou závažnosťou, od atrofie po zmiznutie črevných klkov).

Určité choroby, najmä autoimunitné, sa vyskytujú u pacientov s celiakiou 10-krát častejšie ako v bežnej populácii. Pri ich súčasnom nástupe je celiakia často asymptomatická: Duhringova herpetiformná dermatitída, selektívny nedostatok Ig A, primárna biliárna cirhóza, Sjögrenov syndróm, cukrovka typu I, Downov alebo Turnerov syndróm, Crohnova choroba, ulcerózna kolitída, osteoporóza, autoimunitná tyroiditída 3 .

Vystavenie gluténu je pri celiakii povinné u ľudí s genetickou citlivosťou. Svedčí o tom absencia lézií a symptómov u ľudí s celiakiou, ktorí držali bezlepkovú diétu.

Proteíny v štruktúre lepku sa vyznačujú zvýšeným obsahom prolínu a glutamínu, čo im dáva relatívnu odolnosť voči enzymatickej degradácii a umožňuje im tak udržiavať veľkosť potrebnú na naviazanie na molekuly DQ2 alebo DQ8 na povrchu makrofágov a na stimuluje CD4 + T bunky. V skutočnosti boli T bunky, ktoré reagujú s gluténovými peptidmi v prítomnosti molekúl DQ2 alebo DQ8, izolované zo sliznice pacientov s celiakiou. Na druhej strane T bunky izolované z normálnej sliznice nereagujú na lepok ani u ľudí s DQ2.+.

genetická
hla-dq2dq8

Obr. 2 Patogenéza celiakie

Tkanivová transglutamináza (tTG) bola identifikovaná ako hlavný autoantigén pri celiakii. Za patologických podmienok môže extracelulárne uvoľnená transglutamináza (tTG) vytvárať komplexy s proteínmi (alebo peptidmi, ktoré vznikajú pri ich hydrolýze) s vysokým obsahom glutamínu, napríklad v pšenici. Tieto komplexy predstavujú neonatigény, ktoré môžu tiež stimulovať produkciu špecifických protilátok; Z diagnostického hľadiska majú protilátky proti tTG pre celiakiu senzitivitu a špecificitu viac ako 95% 3 .

Odporúčania pre stanovenie alel predispozície HLA

• symptomatickí pacienti s nejednoznačnými hladinami anti-tTG protilátok alebo s nepresvedčivým výsledkom biopsie črevnej sliznice;

• predtým symptomatickí pacienti, ktorí sa stali bezpríznakovými po bezlepkovej diéte a ktorí si neželajú podstúpiť provokačný test na lepok;

• symptomatických pacientov, ktorí nereagujú na bezlepkovú diétu;

• diferenciálna diagnostika u pacienta, ktorý má príznaky podobné celiakii;

• príbuzní prvého a druhého stupňa u pacientov s celiakiou;

• hodnotenie pacientov z rizikových skupín uvedených vyššie.

Záverom je možné uviesť, že test je užitočný na vylúčenie celiakie a na identifikáciu pacientov s rizikom 1; 2; 4 .

V roku 2012 Európska spoločnosť pre detskú gastroenterológiu, hepatológiu a výživu (ESPGHAN) vypracovala nové usmernenie k diagnostike celiakie u detí. Genetický test sa teda považuje za vyšetrenie prvej línie u ľudí s vysokým rizikom. U detí s vysokým klinickým podozrením a čistou pozitívnou sérológiou sa môže test HLA použiť ako diagnostický nástroj, ktorý nahradí biopsiu dvanástnikovej sliznice. 6 .

Odobratý exemplár - úžasný venos 1 .

Zberová nádoba - vacutainer obsahujúci EDTA ako antikoagulant 1 .

Zozbierané množstvo - koľko umožňuje vákuum 1 .

Dôvody zamietnutia skúsiť - použitie heparínu ako antikoagulancia; zrážané alebo hemolyzované vzorky.

Vyskúšajte stabilitu - 7 dní pri 2 - 8 ° C 1 .

Metóda - technológia microarray DNA; určujú sa genotypy HLA-DQA1 a HLA-DQB1 na detekciu špecifických párov alelických variantov spojených s celiakiou:

1. HLA-DQA1* 0501, HLA-DQB1* 0201 (HLA DQ2.5 v konfigurácii cis)

2. HLA-DQA1* 0505, HLA-DQB1* 0202 (HLA DQ2.5 v konfigurácii trans)

3. HLA-DQA1 * 0301, HLA-DQB1* 0302 (HLA DQ8) 1 .

Interpretácia výsledkov

Negatívny výsledok pre alely HLA s predispozíciou DQ2 a DQ8 prakticky vylučuje diagnózu celiakie a naznačuje extrémne nízke riziko (1; 4 .

Identifikácia dvojice alel HLA predisponujúcich k osobe predstavuje kumulatívne 3% riziko vzniku celiakie.

Príbuzný prvého stupňa u osoby s celiakiou, ktorá nesie rovnakú predisponujúcu alelu, má riziko vzniku ochorenia až 40%.

Ľudia s iba genotypom HLA DQ8 majú oveľa nižšie riziko ako ľudia s iba genotypom HLA DQ2.

Medzi pacientmi s iba genotypom HLA DQ8 a tými, ktorí majú iba genotyp HLA DQ2, nie je rozdiel v závažnosti ochorenia.

Ľudia s genotypmi HLA-DQ2 a HLA-DQ8 nemajú vyššie riziko ochorenia v porovnaní s ľuďmi s iba genotypom HLA DQ2; na druhej strane je pravdepodobnejšie, že u týchto ľudí sa ochorenie rozvinie ako u ľudí, ktorí majú iba genotyp HLA DQ8.

Homozygotnosť proti alele DQB1 * 02 u osoby s DQ2 + predstavuje päťkrát vyššie riziko celiakie v porovnaní s inými ľuďmi s DQ2 +. Homozygotnosť proti alele DQB1 * 02 je tiež hlásená častejšie u ľudí s klasickou celiakiou ako u osôb s atypickými prejavmi, ako aj v prípadoch refraktérneho sprue alebo T-bunkového lymfómu spojeného s enteropatiou. bunkový lymfóm = EATL).

U ľudí, ktorí majú iba polovicu heterodiméru DQ2 - iba jeden variant HLA-DQA1 (* 0501 alebo * 0505) ALEBO HLA-DQB1 (* 0201 alebo * 0202), ale nie oboje, sa môže vyvinúť celiakia, ale riziko je v porovnaní s ukazujúci kompletný heterodimér.

Podľa novších štúdií sa predpokladá, že podtyp HLA DQ2.2 (kódovaný alelami DQA1 * 02: 01 a DQB1 * 02: 02), aj keď nie je zahrnutý v diagnostických kritériách (podľa ESPGHAN 2012), môže byť spojený s ľahšou formou celiakie. Z tohto dôvodu bude laboratórium oznamovať prítomnosť HLA podtypu DQ2.2 a bude spomínať, že hoci sa klasické HLA konštelácie nezistili, nemožno vylúčiť riziko budúcej celiakie. .

Ľudia s pozitívnym genetickým testom budú sérologicky sledovaní v intervale 3 - 5 rokov 2 .

Limity a interferencie

Identifikácia predisponujúcej konštelácie HLA nedokazuje existenciu celiakie 4 .

1. Laboratórium Synevo. Konkrétne odkazy na použitú technológiu spracovania 2010. Typ odkazu: Katalóg.

2. Snyder L. C, O Young D, Green HR Peter, Taylor A. K. Celiac Disease. Gene Reviews, 2008. www.ncbi.nlh.gov. Typ referencie: Internetová komunikácia.

3. Elson C.O., Smith E.D. Imunologická choroba gastrointestinálneho traktu. In Clinical Immunology. Principles and Practice, Mosby, Elsevier, tretie vydanie, 2008, 1106 - 1109.

4. Klinika Mayo, Mayo Medical Laboratories. Referenčné laboratórne služby pre organizácie zdravotnej starostlivosti. Celiakia spojená s HLA-DQ Alpha 1 a DQ Beta 1 s vysokým rozlíšením, typizácia DNA, krv www.mayomedicallaboratories.com. 2010. Typ odkazu: Internetová komunikácia.

5. Megiorni F, Pizzuti A. HLA-DQA1 a HLA-DQB1 pri predispozícii na celiakiu: praktické dôsledky molekulárneho písania HLA. In Journal of Biomedical Science., 2012, 19:88.

6. S. Husby, S. Koletzko, R. Korponay-Szabo, M.L. Mearin, A. Phillips, R. Shamir, R. Troncone, K. Giersiepen, D. Branski, C. Catassi, M. Lelgeman, M. Maki, C. Ribes-Koninckx, A. Ventura a K.P. Zimmer, za pracovnú skupinu ESPGHAN pre diagnostiku celiakie, v mene gastroenterologického výboru ESPGHAN. Európska spoločnosť pre detskú gastroenterológiu, hepatológiu a výživové pokyny pre diagnostiku celiakie. V JPGN zv. 54, č. 1, január 2012.

7. Mubarak A, Spierings E, Wolters V, van Hoogstraten I, Kneepkens CM, Houven R. Ľudský leukocytový antigén DQ2.2 a celiakia. In J Pediatr Gastroenterol Nutr 2013 apr; 56 (4): 428-30.