Klinika výživovej medicíny na Technickej univerzite v Mníchove (riaditeľ Univ

1 Klinika pre výživovú medicínu Technickej univerzity v Mníchove (riaditeľ: Univ. Prof. Dr. JJ Hauner) Vplyv makronutrientov na sekréciu ghrelinu a správanie pri sýtosti u ľudí Marie de Greck Kompletná kópia lekárskej fakulty Technickej univerzity v Mníchove na získanie akademického titulu Doktor medicíny schválil dizertačnú prácu. Predseda: Univ.-Prof. DR. D. Neumeier Recenzent dizertačnej práce: 1. prihláška prof. Dr. V. H. Schusdziarra 2. Univ.-Prof. DR. D. Haller Dizertačná práca bola predložená na Technickú univerzitu v Mníchove dňa a prijatá lekárskou fakultou dňa.

medicíny

3 Obsah I ÚVOD 5 II MATERIÁL A METÓDY II.1 Skúšobná skupina II.2 Zostavenie skúšky II.2.1 Skúšobný postup II.2.2 Zloženie a príprava testovacích jedál II.2.3 Posúdenie pocitu sýtosti a hladu II.3 Laboratórne analýzy II.3.1 Stanovenie inzulínu II. 3.2 Stanovenie grelínu II.3.3 Stanovenie glukózy II.4 Štatistika III VÝSLEDKY 20 III.1 Výsledky testovacích jedál ad libitum III.1.1 Rezeň čistý III.1.2 Rezeň s pečeňovou paštétou v pomere 70/30 III.1.3 Rezeň s pečeňovou paštétou v pomere 50/50 III.1.4 Porovnanie jedál ad libitum III.2 Výsledky štandardizovaných jedál III g rezeň so 100 g pečeňovej paštéty (experiment 2) III g rezeň s 50 g pečeňovej paštéty (experiment 1) III g rezeň, 50 g pečeňovej paštéty a chleba (experiment 3) III g rezeň, 100 g paštéty a 100 g chleba (experiment 4) III.2.5 Porovnanie štandardizovaných jedál

4 IV DISKUSIA 59 IV.1 Regulácia príjmu potravy IV.1.2 Neuronálne mechanizmy IV.1.2 Hormonálne mechanizmy IV.1.3 Vplyv rôznych makronutrientov na príjem potravy, hlad a pocity sýtosti IV.2 Ghrelin IV.2.1 Všeobecne IV.2.2 Sekrécia grelínu ako funkcia makronutrientov V ZHRNUTIE 77 VI ZOZNAM LITERATÚRY 78 VII POĎAKOVANIE 91 4

8 Sekrécia grelínu by sa mala pozorovať ako funkcia zmien v obsahu kalórií a rôzneho zloženia bielkovín a tukov, a to nezávisle od sacharidovej zložky a teda od sekrécie inzulínu. Účinok dodatočného obsahu uhľohydrátov by sa potom mal analyzovať v nasledujúcich experimentoch. 8.

10 Tabuľka 1: Antropometrické údaje skupiny testovaných osôb (n = 10) Priemerný SD SEM Vek (roky) 25,30 0,95 0,30 Výška (m) 1,86 0,08 0,03 Hmotnosť (kg) 80,74 9, 60 3,03 BMI (kg/m2) 23,39 1,88 0,59 Pas (cm) 85,60 8,11 2,57 Obvod bokov (cm) 90,00 5,42 1,71 Obvod pása/bokov 0, 95 0,05 0,02 Obsah tuku (%) 17,11 3,95 1,25 RR systol. (mmHg) 116,50 10,01 3,17 RR diastola. (mmhg) 70,50 11,17 3,86 Pulz (bpm) 66,40 3,86 1,22 II.2 Nastavenie testu II.2.1 Postup testu Všetky testy začali o 8:00 v Klinikum Rechts der Isar, v Else Kröner-Fresenius - Centrum pre výživovú medicínu. U postených osôb bola zavedená do žily zavedená kanyla v ohybe lakťa. Po 30 minútach odpočinku v sede sa experimenty začali približne o hodine. Čas 0 min = bezprostredne pred začatím stravovania. Každý deň experimentu zahŕňal dva príjmy potravy. Prvé jedlo v čase 0 minút bolo testovacím jedlom, ktoré sa menilo od testovacieho dňa do testovacieho dňa. Každá testovaná osoba dostala nasledujúce testovacie jedlá v 7 rôznych testovacích dňoch, medzi ktorými bola aspoň jeden deň prestávka: 10

13 Sendviče 2. jedla mali energetickú hustotu 2,77 kcal/g 100 g = 277 kcal, energetické percento: sacharidy 44,4%, bielkoviny 16,2%, tuky 39,4% II.2.3 Posúdenie sýtosti a hladu Aby bolo možné vyhodnotiť subjektívny pocit hladu a sýtosti testovaných osôb, museli dokumentovať svoje vnímanie každých 15 minút (počnúc 15 minút pred prvým príjmom potravy) vo vizuálnych analógových škálach (podľa Blundell, Flint) (obr. 1) (6, 35) Na 10 cm dlhej vodorovnej čiare zvislá čiara označuje hodnotenie pocitov medzi minimom a maximom predstaviteľného. Boli položené otázky týkajúce sa hladu, sýtosti, pocitu sýtosti, ako aj možnej konzumácie požadovaného pokrmu, čo naznačuje možnú averziu k akémukoľvek príjmu potravy. Čiara bola nameraná a uvedená v mm. Dátum Čas min. Názov Test Označte zvislou čiarou Cítim: nie som hladný, veľmi hladný, nie som plný, žiadny pocit sýtosti, najsilnejší pocit sýtosti, nič, čo by som mohol jesť. - a pocit sýtosti 13

18 β-d-glc + NAD D-glukonolaktón + NADH + H Množstvo vytvoreného NADH je úmerné koncentrácii glukózy. Stanovenie sa uskutočnilo z plazmy krvných vzoriek ošetrených NaF-EDTA. Za účelom deproteinizácie sa 50 ul vzorky materiálu zmiešalo s 500 ul kyseliny chloristej a potom sa ostro odstredili (Eppendorf, Revolutions, Düsseldorf, Nemecko). 50 ul supernatantu sa inkubovalo s 500 ul reakčného roztoku, ktorý bol zahriaty na 25 ° C, pri 25 ° C počas 10 až maximálne 60 minút. Nakoniec sa zmerala absorbancia vzoriek proti slepej hodnote činidla pri vlnovej dĺžke 340 nm v spektrofotometri Uricon (Kontron, Neufahrn, Nemecko). 18

34 Energia (kcal) nsn s množstvo (g) sendviče Energia (kcal) nsnsn s množstvo (g) P 35 1. testovacie jedlo Sendvičové jedlo 100 Sýtosť (mm) Hlad (mm) Čas (minúty) Schnitzel pure Schnitzel 70/30 Schnitzel 50/50 Obrázok 6: Porovnanie trendov hladu a sýtosti v experimentoch ad libitum 35