Vplyv tkanivových makrofágov na metabolické choroby - PDF na stiahnutie zadarmo

Vplyv tkanivových makrofágov na metabolické choroby MASTEROVÁ PRÁCA pre získanie akademického titulu Master of Science na Hamburskej univerzite aplikovaných vied Fakulta biologických vied Katedra biotechnológie Prof. Dr. Oliver Ullrich Dr. Andre Broermann predložila: Christiane Dickel Utorok, 13. novembra 2012

tkanivových

Univerzita aplikovaných vied Hamburg Fakulta biotechnológie Katedra biologických vied Lohbrügger Kirchstrasse 65 21033 Hamburg v spolupráci s: Boehringer Ingelheim Pharma GmbH & Co. KG Birkendorfer Strasse 65 88397 Biberach an der Riss Autor: Christiane Dickel Dátum predloženia: 13.11.2012 Prvý skúšajúci: Druhý skúšajúci: Prof. Dr. Oliver Ullrich Dr. Andre Broermann

Obsah 1. Úvod. VI 1.1 Obezita a inzulínová rezistencia. VI 1.2 Evolučná perspektíva. VIII 1.3 Makrofágy pri metabolických ochoreniach. X 1.3.1 Podtypy makrofágov. X 1.3.2 Transendotelová migrácia makrofágov. XIII 1.3.3 Úloha CCR2 a MCP-1 pri nábore makrofágov. XIII 1.4 Markery bielych krviniek pre FACS analýzu. XV 1,5 zvieracích modelov. XVI 1.5.1 Ob/ob myš. XVI 1.5.2 Myš db/db. XVII 1.5.3 DIO myš. XVII 1.6 Možnosti liečby cukrovky typu II. XVIII 1.7 Cieľ. XXII 2. Materiály a metódy. XXIII 2.1 Materiály. XXIII 2.1.1 Spotrebný materiál. XXIII 2.1.2 Použité zariadenia. XXIII 2.1.3 Chemikálie. XXIV 2.1.4 Protilátky. XXVI 2.1.5 Kŕmne zmesi pre zvieratá. XXVI 2.2 Metódy. XXVII 2.2.1 Príprava tkaniva. XXVII 2.2.2 Izolácia buniek. XXVII 2.2.3 Počet buniek. XXVII 2.2.4 Imunofluorescenčné farbenie. XXVIII 2.2.5 Analýza triediča fluorescenčne aktivovaných buniek (FACS). XXIX III

2.2.6 Vyhodnotenie. XXX 2.2.7 Test tolerancie na inzulín (ITT). XXXI 2.2.8 Orálny glukózový tolerančný test (ogtt). XXXII 2.2.9 Stanovenie cytokínov. XXXII 2.2.10 Zvieratá. XXXIII 2.2.11 Štatistika. XXXIII 3. Výsledky. XXXIV 3.1 Stanovenie stratégie spracovania myšacieho, nadsemenného tukového tkaniva pre FACS analýzu bankomatov. XXXIV 3.2 Stanovenie metódy FACS pre kvantitatívnu analýzu leukocytov. XXXV 3.2.1 Tandemový panel (panel pre 4 osoby). XXXV 3.2.2 Analýzy s 3-násobným zafarbením. XXXVI 3.2.3 Kombinovaný panel (panel pre 4 osoby). Test systému XLI 3.3. XLIV 3.3.1 Leukocyty v genetickom modeli cukrovky. XLIV 3.3.1.1 Porovnanie metód. XLIV 3.3.1.2 Analýza s 3 panelmi. XLVII 3.3.1.3 Analýza s kombinovaným panelom. LI 3.3.1.4 Porovnanie výsledkov. LII 3.3.2 Leukocyty v modeli cukrovky vyvolanej stravou. LIII 3.4 Subchronická štúdia antagonistu CCR2 u myší huccr2. LVI 3.4.1 leukocyty. LVI 3.4.2 Koncentrácia MCP-1 v krvnej plazme. LXII 3.4.3 Metabolické parametre. LXIII 4. Diskusia. LXV 4.1 Vytvorenie FACS analýzy na kvantifikáciu celkových a prozápalových makrofágov v myšom tukovom tkanive. Tandemový panel LXV 4.1.1. Kombinovaný panel LXV 4.1.2. Trojité farbenie LXV 4.1.3. Panel LXVI 4.1.4 M1/​​M2. LXVI IV

4.2 Porovnanie metód. Genetické modely myší LXVII 4.3. LXVIII 4.4 Model diéty vyvolanej obezity (DIO). LXX 4.5 Porovnanie modelov obezity. LXXI 4,6 Zvýšené počty ATM u obéznych myší. LXXII 4.7 CCR2 antagonizmus ako terapeutická možnosť pre diabetes typu II. LXXIII 4.7.1 Čísla ATM pred liečbou látkou. LXXIII 4.7.2 Protizápalový účinok pioglitazónu v modeli DIO. LXXIV 4.7.3 CCR2 antagonizmus bez protizápalového účinku na tukové tkanivo semenníkov. LXXIV 4.7.4 Vzťah medzi zápalom tukového tkaniva a metabolickými parametrami v tomto experimente. LXXV 5. Výhľad. LXXVI 6. Zhrnutie. LXXVII 7. Zoznam skratiek. LXXVIII 8. Zoznam obrázkov. LXXXI 9. Zoznam tabuliek. LXXXIV 10. Bibliografia. LXXXV 11. Príloha. LXXXIX 11.1 Údajové listy pre kŕmne zmesi. LXXXIX 11.1.1 Dátový list podávača krytu. LXXXIX 11.1.2 Údajový list pre stravu s vysokým obsahom tukov. XC 11.1.3 Údajový list pre normálnu stravu. Protokol XCI 11.2 FACS protokolu Dr. Chavakis na TU Drážďany. XCII čestné vyhlásenie. XCVII ďakujem. XCVIII V