DNA vírusu Varicella-zoster (VZV) (krv, CSF, plodová voda) - Synevo

Všeobecné informácie

vírusu

Vírus varicella-zoster (VZV) je súčasťou čeľade Herpesviridae; obsahuje dvojvláknovú DNA centrálne umiestnenú a obklopenú obálkou 6 .

VZV spôsobuje dermálne vezikulárne lézie, ktoré sú klinicky vyjadrené ako ovčie kiahne (primárna infekcia) alebo pásový opar (reaktivácia). Primárna infekcia sa prejavuje najmä u detí do 10 rokov generalizovanou vezikulárno-pustulárnou vyrážkou, ktorá je vo väčšine prípadov sama ustupujúca. U detí so zníženou imunitou sú kožné prvky početnejšie, často majú hemoragickú základňu, je ťažšie ich liečiť a niekedy sú superinfikované grampozitívnymi baktériami 3; 5; 6 .

Komplikácie kuracích kiahní sú zriedkavé a ovplyvňujú predovšetkým CNS a pľúca. Neurologické abnormality zahŕňajú akútnu cerebelárnu ataxiu, encefalitídu, meningitídu, priečnu myelitídu. Cerebelárna ataxia (prevalencia 1 zo 4 000 prípadov) sa najčastejšie rozvinie do 1 týždňa od objavenia sa vyrážky, ale môže sa vyskytnúť aj po 21 dňoch. U detí je to zvyčajne benígna komplikácia, ktorá odznie do 2 - 4 týždňov; metódami PCR možno VZV-DNA detekovať v mozgovomiechovom moku. Závažnejšou komplikáciou je encefalitída, ktorá je sprevádzaná úmrtnosťou 5 - 20% a neurologickými následkami u 15% preživších. Ťažkou komplikáciou, ktorá sa často vyskytuje u dospelých a pacientov so zníženou imunitou, je pneumónia proti kiahňam (dýchavičnosť s tachypéniou, kašeľ, horúčka, intersticiálne rádiologické zmeny), ktorá môže byť pre tehotné ženy v druhom alebo treťom trimestri tehotenstva smrteľná 6 .

Ak dôjde k primárnej infekcii v prvých 28 týždňoch tehotenstva, existuje 1-2% riziko poškodenia plodu (syndróm ovčích kiahní plodu alebo vrodené ovčie kiahne). VZV-DNA je možné detegovať pomocou techniky PCR v plodovej vode; test má veľmi vysokú citlivosť, ale nízku špecifickosť pre syndróm ovčích kiahní plodu. Neboli však hlásené žiadne prípady poškodenia plodu v súvislosti s nedetegovateľnou VZV-DNA v plodovej vode. Riziko vrodených ovčích kiahní je vysoké, ak je prítomnosť VZV-DNA v plodovej vode sprevádzaná sugestívnymi zmenami ultrazvuku 1 .

Ak sa infekcia matky vyskytne v termíne, existuje značné riziko ovčích kiahní u novorodenca s úmrtnosťou až 30% 1; 6 .

Po primárnej infekcii VZV vírus pretrváva v latentnom stave v senzorických gangliách pozdĺž dorzálneho koreňa miechových nervov a hlavových nervov. Reaktivácie sa vyskytujú u 10 - 20% dospelých, častejšie po 50. roku života a prejavujú sa jednostrannou vyrážkou močového mechúra s dermatomatickou distribúciou 5. U pásového oparu môže byť klinicky vyjadrené poškodenie CNS, ako je meningoencefalitída alebo encefalitída. Zriedkavou komplikáciou, ktorá sa objaví po herpes zoster ophthalmicus, je cerebrálna granulomatózna angína. U ľudí so zníženou imunitou je vývoj pásového oparu závažnejší a dlhší. Pacienti s malígnou lymfoproliferáciou majú zvýšené riziko diseminácie kože a poškodenia vnútorných orgánov (zápal pľúc, hepatitída a meningoencefalitída) 6 .

Charakteristické lézie zvyčajne naznačujú diagnózu pásového oparu. Avšak vírus herpes simplex (HSV) aj vírusy Coxsackie môžu spôsobiť dermatomálne vezikulárne lézie. Na diferenciálnu diagnostiku sa môže použiť detekcia vírusovej DNA v léziách, ktorá je rýchlejšia a citlivejšia ako izolácia vírusu v bunkových kultúrach. .

Odporúčania pre stanovenie VZV - DNA - diagnostika infekcií VZV; takže:

  • VZV - DNA v krvi: včasná detekcia komplikovaných infekcií VZV u pacientov s ťažkou imunosupresiou (napr. Po medulárnej transplantácii) s cieľom nasadiť antivírusovú liečbu 3; 6 .
  • VZV - DNA v lézii: diferenciálna diagnostika kožných lézií 4; 6 .
  • VZV - CSF DNA: diagnostika syndrómov CNS spojených s VZV (senzitivita a špecificita> 95% pre pásový opar bez herpesu, aseptická meningitída, encefalitída, priečna myelitída, vaskulitída CNS, cerebellitída); najväčší úžitok z testovania pacientov s neurologickými syndrómami bez sprievodnej vyrážky; test PCR je užitočnejší pri diagnostike neurologických komplikácií ovčích kiahní; pre syndrómy CNS spojené s herpes zoster je potrebných viac údajov na podporu užitočnosti testu, pretože bola zistená VZV-DNA v mozgovomiechovom moku pacientov s nekomplikovanými kožnými infekciami 2 .
  • VZV - DNA v plodovej vode: diagnostika infekcie plodu VZV 1; 6 .

Výcvik pacientov - nevyžaduje sa 3 .

Odobratý exemplár - a) príde krv; b) produkt odobratý z lézie suchým tampónom; c) mozgovomiechový mok odobratý lumbálnou punkciou; d) plodová voda 3 .

Zberová nádoba - a) vacutainer obsahujúci EDTA ako antikoagulant; b) nárazník bez transportného média; c) a d) sterilná nádoba 3 .

Zozbierané množstvo - a) toľko, koľko umožňuje vákuum; c) a d) minimálne 2 ml 3 .

Po zbere potrebné spracovanie - a), c), d) dôkazy nie bude odstredený 3 .

Príčiny odmietnutia dôkazov - a) staré, zrážané, hemolyzované vzorky; 2. použitie heparínu ako antikoagulancia .

Vyskúšajte stabilitu - vzorky krvi z lézie, mozgovomiechového moku alebo plodovej vody sú stabilné 1 týždeň pri 2 - 4 ° C 3 .

Metóda - PCR v reálnom čase Light-Cycler: reťazová polymerizačná reakcia s detekciou nahromadeného produktu PCR v reálnom čase, meraním emitovanej fluorescencie (kvalitatívny test) 3 .

Referenčné hodnoty - VZV - nezistiteľná DNA 3 .

Detekčný limit - 10 detí/vzorka 3 .

Interpretácia výsledkov

Detekcia VZV-DNA v rôznych patologických výrobkoch podporuje klinickú diagnostiku infekcie spôsobenej týmto vírusom 5 .

Limity a interferencie

Negatívny výsledok nevylučuje možnosť infekcie VZV, najmä na úrovni CNS 5 .

1. Ašraf Fouda. Slepačie kiahne v tehotenstve. www.obgyn.net/educational-tutorial. Typ odkazu: Internetová komunikácia.

2. Guy Boivin. Diagnóza herpetických vírusových infekcií centrálneho nervového systému. V HERPES 11, Supplement, 2004.

3. Laboratórium Synevo. Konkrétne odkazy na použitú technológiu spracovania 2015. Typ odkazu: katalóg.

4. Mark J. Espy a kol. Diagnostika infekcií vírusom Varicella-Zoster v klinickej laboratóriu metódou LightCycler PCR. In J Clin Microbiol. 2000 september; 38 (9): 3187–3189.

5. Klinika Mayo. Mayo Medical Laboratories. Katalóg testov: Varicella-Zoster Virus (VZV), Molecular Detection, PCR. www.mayomedicallaboratories.com. Typ odkazu: Internetová komunikácia.

6. Richard J. Whitley. Vírus kuracích kiahní. In Mandell, Douglas, and Bennett’s Principles and Practice of Infectious Diseases, 7. vydanie, Churchill Livingstone, Elsevier, 2010, 1963-1968.