Humánne zaobchádzanie so zvieratami - PDF na stiahnutie zadarmo
Humánne zaobchádzanie so zvieratami pre lepšiu vedu SMERNICA Novo Nordisk 2010/63/EÚ O OCHRANE ZVIERAT POUŽÍVANÝCH NA VEDECKÉ ÚČELY RÁMEC PRE HODNOTENIE ZÁVAŽNOSTI (POSÚDENIE EXPOZÍCIE) Životné prostredie 1
Obsah Pracovný dokument o rámci na hodnotenie závažnosti. 1-22 (Posúdenie stresu) Príklady na ilustráciu procesu posudzovania závažnosti. 24 - 94 (hodnotenie stresu), denné hodnotenie a hodnotenie skutočnej závažnosti
Obsah Príslušné články smernice 2010/63/EÚ. 3 Všeobecné súvislosti. 3 Všeobecné informácie o hodnotení závažnosti. 4 Úvahy pred uskutočnením štúdie. 6 ukazovateľov závažnosti. 6 všeobecných kategórií. Pri hodnotení skutočnej závažnosti je potrebné vziať do úvahy 7 faktorov. 8 spôsobov, ako zabezpečiť konzistentnosť pri hodnotení a určovaní skutočnej závažnosti. 11 Vypracovanie hodnotiaceho listu špecifického pre daný proces. 12 Dôslednosť pri hodnotení skutočnej závažnosti. 12 Kto by mal prispieť informáciami na vyhodnotenie skutočnej závažnosti. 14 Monitorovacie nástroje, médiá a ďalšie informácie. 14 Príloha I. 16 Technické výrazy spojené s klinickými pozorovaniami. 16 Príloha II.19 Ďalšie čítanie, pokyny a online zdroje na hodnotenie dobrých životných podmienok zvierat, ktoré sú predmetom vedeckých postupov. 19 2
1.3 Návrhy hľadaných výrazov pre výskum literatúry Nasledujúce hľadané výrazy sú užitočné pri hľadaní informácií o hodnotení závažnosti: Úzkosť Choroby správania Bodové stresové potreby Kvalita života Hodnotenie škodlivých účinkov Príjemné nepohodlie Poškodenie Utrpenie Hodnotenie bolesti Hodnotenie zlepšenia Hodnotenie utrpenia zvierat Bolesť zlepšenie pohody Hodnotenie poškodenia Cieľové parametre bez bolesti (alebo kritériá ukončenia) Meranie bolesti Behaviorálne hodnotenie Hodnotenie blahobytu objektívne hodnotenie stupeň závažnosti blaha Indikátor pozitívnych ukazovateľov blahobytu Skóre dobrých životných podmienok zvierat alebo ovplyvňujúcich hodnotenie ujmy pozitívnych ukazovateľov stupnice závažnosti dobrých životných podmienok zvierat humánnych koncových bodov pozitívnych dobrých životných podmienok pri chorobe zvierat utrpenie potrebuje kvalitatívne správanie hodnotenie stres hodnotenie objektívne hodnotenie kvalita života utrpenie nepohodlie spresnenie bolesti hodnotenie blahobytu tieseň bolesť zadok skóre skóre hárky ukazovateľ blahobytu hodnotenie poškodenia meranie bolesti bodovací systém výsledky blahobytu 21
Obsahový model 1, onkologické štúdie. 27 Model 1 (a) Udržiavanie bunkových línií ľudských nádorov u imunodeficientných holých myší. 28 Model 1 (b) Účinnosť nových farmaceutických zložiek v boji proti rastu nádoru. 34 Model 2 Experimentálna autoimunitná encefalomyelitída (EAE) u myší. 41 Artritída 3, model 3. 51 Model 4 takt. 62 Model 5 Výroba polyklonálnych protilátok u králikov. 75 Model 6 - Výroba a konzervácia geneticky modifikovaných zvierat. 82 GenA tm1a model (financovanie) laboratórium. 84 Laboratórny kód modelu g (genb). 90 Vzorové laboratórium GenC tm1a (financovanie). 92 26
Injekcia 3 21 4 22 5 22 1.3. Nezistila sa žiadna anomália (nepoužije sa) 2.3. Odber vzoriek k. A. f. 3.3. k. A. f. 4.3. Odber vzoriek 1 21 2 22 3 21 4 22 5 22 k. A. f. 5.3. k. A. f. 6.3. Odber vzoriek k. A. f. 7.3. Agresívne správanie; nezistené rany 8.3. Meranie nádoru 1 0,1 2 0,1 3 0,1 4 bez nádoru 5 0,2 1 21 2 22 3 21 4 22 5 22 myš 1 mala rany po uhryznutí na chvoste a chrbte, ktoré si vyžadovali lokálne ošetrenie; realizované v individuálnom ubytovaní. Nest box poskytnutý pre jednotlivo umiestnené zviera, ale odstránený z klietky so zvyšnými štyrmi myšami v prípade, že to bol spúšťač agresie. 9.3. Rany myši 1 dezinfikované, dobre sa hoja; žiadny dôkaz agresie medzi zostávajúcimi zvieratami. 32
10.3. Meranie nádoru 1 0,2 2 0,1 3 0,1 4 bez nádoru 5 0,2 rany myši 1 dezinfikované. 11.3. Dezinfikované rany myši 1. 12.3. Meranie nádoru 1 0,4 2 0,3 3 0,3 4 bez nádoru 5 0,5 1 22 2 22 3 21 4 21 5 23 13,3. k. A. f. 14.3. Euthanizácia a odstránenie nádoru Rany myši 1 sa uzdravili, žiadna ďalšia dezinfekcia. 33
Príklad tabuľky s výsledkami Úroveň číslo Dátum 1.6. 2.6. 3.6. 4.6. Vzhľad Telesná hmotnosť Stav srsti Funkcie tela Dyspnoe a/alebo tachypnoe Spotreba potravy Prostredie mäkká stolica alebo hnačka Krvavá hnačka Správanie, zaobchádzanie Agresivita Abnormálna chôdza Abnormálne držanie tela Neochota k pohybu Ukazovatele špecifické pre daný postup Veľkosť nádoru Ulcerácia nádoru Pohybové poškodenie v dôsledku nádoru Celkové skóre Ostatné pozorovania 38
Príklady klinického hodnotenia Vzhľad Bodovanie Telesná hmotnosť Strata hmotnosti 5 - 10% 1 Strata hmotnosti 11 - 15% 2 Strata hmotnosti 16 - 20% 3 Strata hmotnosti 20% ms E. Stav srsti Mierne chlpatá srsť 1 Mierna piloerekcia 2 Významná piloerekcia 3 Funkcie tela Tachypnoe zrýchlené dýchanie) 1 dýchavičnosť (ťažké dýchanie) 3 prostredie mäkká stolica alebo hnačka 1 krvavá hnačka ms E. Správanie Napätie alebo nervozita pri manipulácii 1 jasný strach pri manipulácii, napr. B. Chvenie, 3 vokalizácie, agresivita Pohyb Chôdza/držanie tela mierne abnormálne 1 Chôdza/držanie tela zjavne abnormálne 2 Značné 3 miery Skóre 1 Skontrolujte frekvenciu monitorovania 2 Zvážte ďalšie opatrenia starostlivosti, napr. B. Zvýšený príjem tekutín 4 Konzultácia s veterinárnym lekárom 6 Zváženie koncového bodu, ktorý je pokiaľ možno bezbolestný 39
Poruchy pohybu/neochota pohybovať Nehybnosť> 24 h, pozri E. Indikátory špecifické pre daný postup Veľkosť nádoru> 1,2 cm, pozri E. Vredy nádoru, pozri E. Poškodenie pohybu v dôsledku M. pozri E. Nádor 40
Klinický priebeh relaps-remitujúcej fázy Podávanie terapeutického prostriedku (počas progresívnej fázy) Značný úbytok hmotnosti (napr. Až o 35%) Chronické neurologické deficity Nepohodlie v dôsledku injekcie Vedľajšie účinky alebo neúčinnosť účinnej látky V nádobách je neustále prístup k vode a potravinám. zaistené na podlahe klietky. Telesná hmotnosť a kondícia sa monitorujú denne a hodnotia sa častejšie od začiatku chudnutia (ak je to potrebné). K dispozícii sú namočené potravinové a tekutinové bloky doplnené v prípade potreby subkutánnym prísunom. Všetky stresory sú znížené vrátane úrovne hluku. V prípade potreby sa okolitá teplota zvýši pomocou vykurovacích rohoží a prídavnej podstielky a materiálu na zahniezdenie. Zvieratá sa po injekcii kandidátneho liečiva starostlivo monitorujú. klinické ochorenie Klinické príznaky pridruženého ochorenia, napr. B. Zakrivená poloha Zvieratá sa bezbolestne usmrtia, ak sa pozoruje niektorý z vyššie uvedených ukazovateľov alebo ak sa vyskytnú závažné vedľajšie účinky novej účinnej látky. 44
Príklad vhodného výsledkového listu Tabuľka: Klinický výsledkový list pre myši EAE Dátum: Vzhľad Telesná hmotnosť Stav srsti Funkcie tela Ovládanie močového mechúra Tón chvosta Dýchanie Prostredie Stav hniezda Správanie Sociálne správanie Chôdza Ukazovatele špecifické pre postup 46
Bočná pokojová poloha Čas vyrovnania (vzpriamovací reflex) Paréza Paralýza Ostatné pozorovania (voľný text) Poznámky: Každý indikátor bol hodnotený podľa systému uvedeného v nasledujúcej tabuľke: Napríklad do tabuľky vedľa tónu chvosta by bola zadaná hodnota 1, ak by bol pozorovaný znížený zdvih a hodnota 2 vedľa stavu hniezda, ak bolo hniezdo špinavé. Tabuľka: Bodovací systém pre ukazovatele v klinickom výsledkovom liste EAE Bodovanie: 1 = nízke 2 = stredné 3 = veľké chudnutie Až 10% 10 až 20% 20 až 35% stav srsti Mierne zanedbaný Nedostatok starostlivosti o srsť Jasná/dlhotrvajúca piloerekcia Kontrola močového mechúra Inkontinencia Kontrola močového mechúra Poznámky k zadržaniu k miernej strate kontroly, napr. B. Malé množstvo moču v hniezde. Močový mechúr je cítiť, ale pri manipulácii sa vyprázdňuje. Výraznejší únik moču. Na vyprázdnenie močového mechúra je potrebné vyvinúť väčšie úsilie. Inkontinencia Zviera nemôže močiť bez pomoci; Známky 47
Pred podaním adjuvans sa zvieratá vopred nakŕmia vysokoenergetickými doplnkovými krmivami, ako je želé a kondenzované mlieko, s použitím nižšej dávky adjuvans a s použitím alternatívneho protokolu štúdie, ktorý umožňuje skrátenie trvania štúdie. Tieto vylepšenia boli zapracované do protokolu pre budúce štúdie; zámerom bolo porovnať skutočné úrovne závažnosti s cieľom zistiť, či sú zlepšenia účinné. 50
Literatúra Bendele, A. M., Zvieracie modely reumatoidnej artritídy, in: J Musculoskel Neuron Interact 2001; 1 (4): 377-385. Jasemian, Y. a kol., (2011) Zdokonalenie modelu artritídy vyvolanej kolagénom u potkanov pomocou infračervenej termografie, Br. J. Med. & Med. Res., 1 (4): str. 469-477. Joe, B., Griffiths, M.M., Remmers, E.F., Wilder, R.L., Zvieracie modely reumatoidnej artritídy, Current Rheumatology Reports 1999, 1139-149. Štúdia V tomto príklade je artritída indukovaná u 18 samcov a 18 samíc potkanov Lewis opakovanými injekciami Freundovho neúplného adjuvans (FIA) a kolagénu do spodnej časti chvosta. Denná liečba sa začína o desať dní neskôr (10. deň), keď sa rozvinula artritída, a pokračuje každý deň ďalších 14 dní (do 24. dňa). Cieľom štúdie je testovať predpokladané lieky. Predtým publikované údaje o príbuzných látkach sa skúmali s cieľom zistiť, či podávanie analgetík bude v rozpore s vedeckými cieľmi, a zistilo sa, že také podávanie spôsobí v skúške zmätok. Preto sa počas vývoja artritídy nepodávajú lieky proti bolesti; ani kontrolná skupina nedostávala žiadne lieky proti bolesti. S cieľom zmierniť utrpenie sa osobitná pozornosť venuje nefarmaceutickým metódam tlmenia bolesti (napr. Zlepšeniu podmienok bývania). Všetky zvieratá sú denne pozorované a vážené a hodnotené pomocou všeobecného klinického výsledkového listu; Vyšetrujú sa tiež v deň 0 (pred prvou injekciou) a v deň 10 (pred začiatkom liečby) a v deň 13, 16, 20 a 24. Toto vyšetrovanie zahŕňa nepriame merania poškodenia funkcií tela, ako je meranie priemeru kĺbu (strmeňom) a klinické hodnotenie založené na systéme hodnotenia artritídy. Na základe klinického skóre (pozri nižšie) sa sledujú čo najbolestivejšie koncové body. 52
Ľahký prístup k vode a jedlu (napr. Na podlahe klietky) počas celej štúdie. Použitie klinického hodnotiaceho systému pre artritídu, ktorý hodnotí rozsah opuchu a počet postihnutých kĺbov. Podávanie farmaceutických látok (test a kontrola, dvakrát) denne) subkutánnou alebo intraperitoneálnou injekciou. Krátkodobé nepohodlie po injekcii. Na základe dostupných údajov o zvieratách sa neočakávajú žiadne vedľajšie účinky účinných látok. Starostlivé denné klinické sledovanie pomocou všeobecného klinického výsledkového listu. Ak sa vyskytnú významné vedľajšie účinky, uvažuje sa o čo najmenej bolestivých výsledkoch. (od 10. do 24. dňa) Vyhodnotenie účinku aktívnych zložiek na stupeň artritídy (dni 0, 10, 13, 16, 20 a 24) V závislosti od použitých metód sa môžu vyskytnúť ďalšie krátkodobé bolesti alebo utrpenia, napr. B. použitím Von Freyových chĺpkov a posuvných meradiel alebo potrebou manipulácie. Starostlivé klinické monitorovanie Znížte frekvenciu monitorovania (na minimum potrebné pre vedecké ciele), kým sa zviera nezotaví. Pozri poznámku k tabuľke 54 nižšie
Zadné končatiny sú povolené, poskytujú pohodlné prostredie a ľahký prístup k jedlu a vode, komplexný monitorovací systém a najbolestivejšie možné možné parametre. Preto by tento projekt nebol klasifikovaný ako nad hornou hranicou a je možné ho schváliť na základe inak pozitívneho posúdenia projektu vrátane posúdenia škodlivosti a prínosu. Nižšie je uvedený príklad klinického prehľadu denného pozorovania artritických potkanov. Dátum: 1. deň 2. deň 3. deň 4. deň Vzhľad Telesná hmotnosť Nedostatočná starostlivosť dehydratácia Telesné funkcie Dyspnoe Tachypnoe Správanie nechuť k pohybu Letargia/apatia Nehybnosť 56
Anotácie Indikátor špecifický pre postup Bodovanie pre artritické labky (pozri tabuľku 2) Ostatné pozorovania (voľný text) Celkové hodnotenie Poznámka: Každý indikátor bol bodovaný pomocou systému v tabuľkách 1 a 2 nižšie. Napríklad hodnota 1 by bola zadaná do výsledkového listu vedľa nedostatočnej starostlivosti (tabuľka 1) a hodnota 5 vedľa ukazovateľa špecifického pre postup, ak by boli dve zadné končatiny hodnotené bodovou hodnotou 3 alebo 2 (tabuľka 2). Opatrenia a sledované parametre popísané nižšie zohľadňujú požiadavku vyhnúť sa čo najviac vážnemu utrpeniu, ale nie eutanázovať zvieratá, kým sa nezískajú dostatočné údaje; to druhé by si vyžadovalo použitie iných, naivných zvierat. 57
Tabuľka 1: Bodovací systém pre ukazovatele použité vo formulári na klinické hodnotenie Bodovanie Vzhľad Normálny: Strata hmotnosti 24 h ms E. Zvuky pri manipulácii 1 Zvuky, napätie a nervozita pri manipulácii 2 Zvuky pri pohybe/spontánne 3 Indikátor špecifický pre postup Bodovanie pre artritické labky (tabuľka 2) 0-8 ms E.: Pozornosť čo najbolestivejšiemu koncovému bodu bez ohľadu na prítomnosť alebo absenciu ďalších klinických príznakov 59
Mierne abnormálna chôdza 1 Výrazne abnormálna chôdza 2 Značné poruchy pohybu 3 Nehybnosť> 24 hodín, pozri E. Napätie alebo nervozita pri manipulácii 2 Zjavne strach pri manipulácii, napr. B. 3 Chvenie, vokalizácia, agresivita Prostredie Mierne dezorganizované hniezdo 1 Ťažko rozpoznateľné hniezdo 2 Bez hniezda 3 Neurologické skóre Ohyb predných labiek 1 Znížená odolnosť proti bočnému tlaku 2 (a ohyb predných labiek), bez otáčania Rovnaké správanie ako v úrovni 2, s 3 Gyroskopy 72
Opatrenia Pretože chirurgické komplikácie sa zvyčajne identifikujú v pooperačnej fáze, je veľmi dôležité dôkladné sledovanie a odborník, empatické hodnotenie počas prvých 24 hodín, aby sa zabezpečila identifikácia nepriaznivých účinkov a opatrenia podniknuté na ich potlačenie a aby sa Zvieratá sú usmrtené, ak ich utrpenie presahuje kategóriu ťažkého stupňa. Príklad hárku s pozorovaniami pre jedno zviera (dni 0-4) Deň 0 1 2 3 4 Vzhľad Telesná hmotnosť (v g) (bodová hodnota) 320 (0) 292 (1) 285 (2) 287 (1) 292 (1) Stav srsti Shaggy fur/piloerection 1 1 0 1 0 správanie chôdza 3 2 2 2 1 reakcia na manipuláciu 0 0 2 0 0 stav prostredia vnorenia 3 2 1 0 0 neurologické hodnotenie špecifické pre procedúru 2 2 1 1 1 celkové hodnotenie 9 8 8 5 3 73
Objem lézie (skóre MRI) * 11% Iné pozorovania Zotavenie sa z procedúry bez incidentu, bez komplikácií Dávka podaná 30 minút a 6 hodín po zákroku Pohybuje sa v klietke a snaží sa vytvoriť hniezdo Testy správania, spočiatku úzkostné, ale všetky testy dokončené; lepšia štruktúra hniezda O kožušinu sa dnes stará menej dobre, ale váha je stabilná a boli dokončené dobré testy správania sa hniezda, menej úzkosti a výrazne lepšia chôdza * Je uvedený objem lézie (hodnotený pomocou MRI skenovania), aby vyšetrovateľ mohol na konci štúdie zadať príslušnú hodnotu. Tieto údaje možno potom korelovať s klinickými pozorovaniami a pozorovaniami správania, aby sa umožnilo ďalšie zlepšenie dohľadu, starostlivosti o zvieratá a postupov. 74