Kultúra cervikálnej sekrécie (s vhodným antibiogramom) - Synevo
Všeobecné informácie
Normálna flóra ženských pohlavných orgánov sa líši v závislosti od pH a koncentrácie estrogénu v sliznici, ktoré úzko súvisia s vekom, a to nasledovne:
- v prepubertálnej a postmenopauzálnej flóre dominujú stafylokoky a korynebaktérie (rovnakú flóru nájdeme na povrchu epitelu);
- u sexuálne aktívnych žien sa mení mikrobiálna flóra, ktorá sa skladá z Enterobacteriaceae, streptokokov, stafylokokov, anaeróbnych baktérií (laktobacily, nesporulované anaeróbne bacily, anaeróbne koky). Laktobacily sú normálnou vaginálnou mikrobiálnou flórou u týchto žien.
Hemolytický streptokok skupiny B (Streptococcus agalactiae) je prítomný vo vaginálnej flóre a môže sa prenášať na novorodencov (s výskytom novorodeneckých komplikácií) 1 .
Klasifikácia infekcieženských pohlavných orgánov
Infekcie ženských pohlavných orgánov sú častou príčinou gynekologických konzultácií. Môžu sa vyvíjať ako:
• endogénne infekcie spôsobené mikroorganizmami z normálnej vaginálnej flóry;
• exogénne infekcie spôsobené najmä sexuálne prenosnými mikroorganizmami:
- baktérie (Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis - sérotypy D-K, Treponema pallidum)
- vírusy (Herpes simplex - typ 2, papilomavírus)
- prvoky (Trichomonas vaginalis).
Ďalšia klasifikácia rozdeľuje infekcie ženských pohlavných orgánov na:
- infekcie nízkeho pohlavného orgánu - postihujú vulvu, pošvu a krčok maternice - zvyčajne sa vyskytujú v dôsledku infekčného pohlavného styku alebo v dôsledku nerovnováhy normálnej pohlavnej flóry.
- Vysoko genitálne infekcie - postihujúce maternicu, vajíčkovody, vaječníky - sa vyskytujú často ako rozšírenie nízko genitálnych infekcií. Má sa za to, že mikroorganizmy nachádzajúce sa v pošve a krčku maternice vstupujú do dutiny maternice a môžu sa dostať cez endometrium do vajíčkovodov a vaječníkov 1; 2. .
Nízko genitálne infekcie
Vulvarálne infekcie môžu byť bakteriálne, vírusové, plesňové alebo parazitárne a môžu sa vyskytovať izolovane alebo v súvislosti s vaginitídou. Môže byť:
- bežné infekcie: folikulitída, vriedky, pyodermia;
- špecifické infekcie: Trichomonas vaginalis, plesňové infekcie, Treponema pallidum, Herpes simplex - typ 2, papilomavírus (najmä 6 a 11);
- menej často Sarcoptes scabiae.
Bartholinitída (zápal Bartholinových žliaz, ktorý sa nachádza na spojnici vulvy a vagíny), môže byť spôsobená Neisseria gonorrhoeae, C. trachomatis alebo exacerbáciou miestnej genitálnej flóry. Blokovanie žľazového potrubia zápalovým procesom môže spôsobiť absces, z ktorého je možné izolovať aeróbne a anaeróbne zárodky.
Vaginitída (najčastejšie popisovaná ako vulvovaginitída) môže byť:
- špecifické: produkované hubami, Trichomonas vaginalis, Treponema pallidum, Papilomavirus;
- nešpecifické: - vyrobené množením normálnej vaginálnej flóry;
- produkované cudzími telesami - v prípade prítomnosti antikoncepčných prostriedkov alebo u dievčat náhodným zavedením cudzích telies do vagíny.
Staphylococcus aureus, ktorý sa nachádza v pošve u 5 - 10% zdravých žien, môže pri používaní hyperabsorpčných tampónov počas menštruácie spôsobiť hnisavý výtok a toxický šok.
U dievčat je možná vulvovaginitída s N. gonorrhoeae, C. trachomatis alebo Streptococcus pyogenes. V prípadoch nesprávnej hygieny sú možné prípady vulvovaginitídy s Enterobius vermicularis v dôsledku migrácie parazita do pošvy.
Vaginóza - nezápalový infekčný syndróm - spočíva v nahradení normálnej laktobacilovej flóry anaeróbnymi bakteriálnymi druhmi (Bacteroides spp., Prevotella spp., Porphyromonas spp., Peptostreptococcus spp., Mobiluncus spp.) Spojenými s Gardnerella vaginalis. Tieto bakteriálne druhy sú súčasťou normálnej flóry pošvy, ale v prípade vaginózy je ich premnoženie až 1000-krát vyššie. Aj keď sa infekcia vyvíja hlavne počas sexuálnej aktivity, môže sa vyskytnúť aj u dospievajúcich a dospievajúcich.
Exfoliáciu maternice môžu ovplyvniť:
-T. vaginalis, Candida albicans - infekcie, ktoré sa vyvíjajú ako cervikovaginitída;
-Papilomavírus (najmä typy 16 a 18) - podieľa sa na etiológii intraepiteliálnych cervikálnych novotvarov;
-Herpes simplex typu 2 - sa vyvíja s endo a exocervikálnymi ulceróznymi léziami.
Maternicová endokéla môže byť miestom infekcie:
-N. gonorrhoeae - sa môže vyvinúť asymptomaticky asi u 30% infikovaných žien. Kontaminácia sliznice močovej trubice a konečníka môže spôsobiť súbežnú lokalizáciu na týchto úrovniach s klinickými prejavmi uretritídy alebo proktitidy;
-C. trachomatis (D-K sérotypy) - nespôsobuje vaginitídu. Pacienti majú často infekciu dvojakej etiológie (gonokoky s chlamýdiami). V laboratóriách Synevo je možné diagnostikovať infekciu C. trachomatis detekciou antigénu v sekrécii zhromaždenej z endokolu. Zber zo spodnej časti zadného vaku sa neodporúča (môžu sa vyskytnúť falošne negatívne výsledky) 1,2,3 .
Diagnóza nízko genitálnych infekcií
Odber patologických produktov sa vykonáva v gynekologických pracoviskách pomocou vhodných nástrojov, zvyčajne zo spodnej časti zadného pošvového vaku.
V čase zberu je dobré vykonať (dokonca aj v poradni) dva rýchle testy, ktoré môžu viesť diagnózu:
-stanovenie pH pošvovej sekrécie pomocou indikátorového papiera (pH> 5 môže naznačovať infekciu T. vaginalis alebo prítomnosť vaginózy);
-test prchavých amínov („test vône“) - pridaním niekoľkých kvapiek 10% roztoku KOH cez pošvový sekrét zachytený na chlopni. Uvoľnenie nepríjemného zápachu z pokazených rýb vedie k podozreniu na vaginózu 2 .
V laboratóriách Synevo sa vaginálny výtok zhromažďuje na dvoch tampónoch a dvoch mikroskopických podložných sklíčkach:
-do nádoby Vagicult (špeciálne médium na obohatenie a detekciu Trichomonas vaginalis a kvasiniek) sa vloží tampón, z ktorého sa medzi čepeľou a lamelou pripraví čerstvý prípravok. Vyšetrenie sa vykonáva objektívom 10x a 40x a umožňuje zvýraznenie parazita T. vaginalis, kvasiniek - púčikov a hýf - a zápalovej reakcie (intenzívna pri trichomoniáze, diskrétna pri kandidóze a neprítomná pri vaginóze);
-druhý tampón odobratý na transportnom médiu (Amies alebo Stuart) sa použije na výsev na kultivačné médium;
-mikroskopické podložné sklíčka budú zafarbené Gram (na zhodnotenie pošvovej flóry) a Giemsa (na vyhodnotenie zápalovej reakcie) 3 .
Za normálnych podmienok vykazuje grampozitívny náter grampozitívne bacily, priame alebo mierne zakrivené s rovnobežnými stranami, s premenlivou hrúbkou a dĺžkou až po polymorfizmus, niekedy vláknitý, ktorý predstavuje laktobacilárnu flóru (Döderleinove bacily, pozri obrázok 21.5.5.1) 2. Pri vaginóze je laktobacilárna flóra nahradená Gram-variabilnými bacilami (G. vaginalis, Bacteroides spp.) A zakrivenými gramnegatívnymi bacilami (Mobiluncus) - pozri obrázok 21.5.5.2. Vaginóza je charakterizovaná prítomnosťou „záchytných buniek“ - povrchových vaginálnych buniek, ktoré majú na svojom povrchu bohatú bakteriálnu flóru (pozri obrázok 21.5.5.3). Prítomnosť grampozitívnych guľatých oválnych útvarov naznačuje vaginálnu kandidózu (pozri obrázok 21.5.5.4 1; 2 .
Obr. 21.5.5.1: Lactobacillus spp. (Gramovo zafarbenie, x 1000, obrázok z vlastnej zbierky v laboratóriu)
Normálny vzhľad vaginálnej vzorky: prítomnosť mnohých dlaždicových epiteliálnych buniek, niekoľko polymorfonukleárnych buniek, doderleínové bacily.
Obr. 21.5.5.3: Šmuh naznačujúci bakteriálnu vaginózu: (Gramovo zafarbenie, x1000, obrázok z vlastnej zbierky v laboratóriu)
Obr. 21.5.5.4 Kvasinky prítomné vo vaginálnej sekrécii (Gramovo zafarbenie, x1000, obrázok z vlastnej zbierky v laboratóriu)
Vizualizácia gramnegatívnych „diplo“ kohútov s výskytom prevažne intraleukocytových kávových zŕn s najväčšou pravdepodobnosťou naznačuje infekciu Neisseria gonorrhoeae (pozri obrázok 21.5.5.5).
Trichomonas vaginalis je najlepšie viditeľný na pôvodnom prípravku. Má guľatý oválny tvar s rozmermi 7-23/5-15 μm. Normálne má 4 predné bičíky a jeden zadný, čo mu dodáva rýchlu pohyblivosť. Môžete tiež vidieť zvlnenú membránu a axostyl, ktorý sa pohybuje pozdĺž bunky. Parazita možno pozorovať aj na Gramovom nátere (pozri obrázok 21.5.5.6).
Obr. 21.5.5.5 Neisseria gonorrhoeae (Gramovo zafarbenie, x1000, obrázok z vlastnej zbierky v laboratóriu)
Obr. 21.5.5.6 Trichomonas vaginalis (Gramovo zafarbenie, x1000, obrázok z vlastnej zbierky v laboratóriu).
Naočkovanie sekrétu zhromaždeného na tlmivom roztoku transportným médiom sa uskutoční na agarovom médiu Columbia s 5% baranovej krvi a laktózovom médiu s inkubáciou v obvyklej atmosfére po dobu 18 - 24 hodín pri 35 - 37 ° C. Izolované mikroorganizmy sú identifikované až do úrovne druhov a sú uskutočňované. antibiogram iba pre mikróby, ktorých prítomnosť sa zistila aj na nátere zafarbenom Gramom, spolu so zápalovou reakciou. Sleduje sa tiež prítomnosť Streptococcus agalactiae u tehotných žien v poslednom trimestri tehotenstva. .
Ak existuje podozrenie na infekciu N. gonorrhoeae, inkubácia sa uskutoční v atmosfére s 5% CO2.
V prípade podozrenia na kandidózu sa vzorka naočkuje na Sabouraudovo médium s chloramfenikol 3. Candida albicans je zvyčajne prítomná v pošve 15 - 20% žien a v treťom trimestri tehotenstva dosahuje 30%. Preto je masívna kolonizácia vagíny 2 významná pre infekciu Candida spp. Po izolácii kvasiniek v kultúre bude identifikovaný a vykonaný antifungálny program 3 .
U dievčat sa odber uskutoční od otvorenia vagíny alebo sa môže odobrať endovaginálne, ak je k dispozícii dostatočné vybavenie; cieľom je diagnostikovať vulvovaginitídu u S. pyogenes a N. gonorrhoeae 2 .
Diagnóza bartholinitídy sa stanoví odberom hnisavého výpotku pomocou dvoch tampónov: jedného na mikroskopiu a jedného na sejbu na kultivačné médium. Inkubácia sa musí uskutočňovať za aeróbnych aj anaeróbnych podmienok; zvlášť sa sleduje prítomnosť N. gonorrhoeae. V prípade „sterilného“ hnisu je podozrenie na infekciu C. trachomatis alebo Ureaplasma urealyticum 1,2. .
Vysoko genitálne infekcie
- na úrovni sliznice maternice: endometritída;
- ak zápal zahŕňa aj maternicový sval: endomyometritída.
Vyskytuje sa akútna infekcia: - po pôrode alebo po pôrode (rizikovým faktorom je vaginóza) a po enduterinných vyšetreniach alebo zákrokoch (hysterosalpingografia, implantácia IUD).
Ich etiológia je rôznorodá a zahŕňajú aeróbne a anaeróbne baktérie, ktoré sú súčasťou endogénnej vaginálnej flóry: skupina B Streptococcus, enterokoky, Enterobacteriaceae, Gardnerella vaginalis, anaeróbne gramnegatívne bacily, Mycoplasma hominis, Clostridium perfringens (spôsobené septickým potratom), Streptococcus atď. 2 .
V 10-20% prípadov sa môže vyvinúť akútna endometritída s bakteriémiou.
Chronická endometritída (spojená s endocervicitídou a salpingitídou) môže byť spôsobená C. trachomatis (vzostupným množením) alebo Mycobacterium tuberculosis (hematogénnou cestou).
Zápal endotubárneho epitelu alebo vajíčkovodu všeobecne (salpingitída) môže byť spôsobený:
- M. tuberculosis, N. gonorrhoeae, C.trachomatis - intrakanalikulárnym množením;
- aero-vaginálna anaeróbna flóra (pri postaborte alebo popôrodnej endometritíde);
- zápal mezosalpinxu a pobrušnice pokrývajúci široké väzivo: anexitída.
Pretože je ťažké určiť presné anatomické umiestnenie infekcie, používa sa názov zápalové ochorenie panvy (laparoskopická diagnóza). .
Diagnóza vysoko genitálnych infekcií
Patologický produkt sa odoberie zavedením katétra alebo sterilnej sondy do dutiny maternice, na čo sa prispôsobí sterilná striekačka a nasaje sa endometriálna tekutina; potom sa k injekčnej striekačke pripojí sterilná ihla, hrot ihly je chránený sterilným vatovým tampónom, odstránia sa vzduchové bubliny, hrot ihly je utesnený gumovou zátkou a čo najskôr odoslaný do laboratória.
Pri endometritíde po pôrode alebo po pôrode sa krvné kultúry uskutočňujú aj na aeróbnych a anaeróbnych médiách.
Pri zápalovom ochorení panvy, pri ktorom existuje podozrenie na infekciu C. trachomatis, sa môže použiť sérologické vyšetrenie.
Na bakteriologickú diagnostiku genitálnej tuberkulózy sa odoberá menštruačná krv alebo sliznica maternice vyliečená v predmenštruačnom období. 2. Patologické produkty na detekciu BK sa nespracovávajú v laboratóriách spoločnosti Synevo.
Vzorky prijaté v laboratóriu:
• je mikroskopicky vyšetrený na náteroch zafarbených podľa Grama a Giemsy;
• je zasiate na kultivačné médium: agar Columbia s 5% krvi Barana (jedna platňa pre aeróbnu inkubáciu a druhá pre anaeróbnu inkubáciu) a agar Mac Conkey 2,3 .
Izolované bakteriálne druhy sa identifikujú až na druhovú úroveň a vykoná sa antibiogram. Testovanie citlivosti na antibiotiká sa nevykonáva na anaeróbnych zárodkoch 3 .
1. Betty A. Forbes, Daniel F. Sahm, Alice S. Weissfeld. Infekcie pohlavných orgánov. In Bailey and Scott’s Diagnostic Microbiology. Mosby, USA, 11. vydanie. 2002, 939-953.
2. Dumitru Buiuc. Laboratórna diagnostika infekcií ženských pohlavných orgánov. V pojednaní o klinickej mikrobiológii. Dumitru Buiuc, Marian Negut, Medicala, Rumunsko, 1. vyd. 1999, 304-318, 672-675.
3. Laboratórium Synevo. Konkrétne odkazy na použitú technológiu spracovania 2010. Typ odkazu: Katalóg.