MORFOLOGICKÉ VYŠETRENIE KRVNÉHO OVOCIA Medlife
Morfologické vyšetrenie zafarbeného krvného náteru May Grunwald Giemsa hodnotí:

• erytrocyty: abnormality veľkosti, tvaru, štruktúry, inklúzie erytrocytov, obsah hemoglobínu;
• leukocyty: štrukturálne abnormality, prítomnosť inklúzií, prítomnosť atypických, nezrelých foriem;
• krvné doštičky: abnormality vo veľkosti, tvare, štruktúre, usporiadaní na nátere.
Vyšetrenie krvného náteru sa vykonáva na výslovnú žiadosť lekára, ako aj na základe varovných správ z hemoleukogramu vykonaných na automatickom hematologickom analyzátore (napr. Blasty, atypické lymfocyty, ľavá odchýlka, erytroblasty atď.).
Morfologické vyšetrenie erytrocytov
Morfologicky normálne erytrocyty vyzerajú ako: normochromické, normocytové, bikonkávne v tvare disku, bez inklúzií a bez jadier. Množstvo abnormalít erytrocytov je možné zistiť mikroskopickým vyšetrením krvného náteru nasledovne [2,11]:
Morfologická anomália
patofyziológia
Pridružené choroby
Ťažká anémia (napr. Nedostatok železa, hemolytická látka atď.)
Erytrocyty so spikulami (nerovnomerné cytoplazmatické rozšírenia a hustý stred)
Zmena lipidovej vrstvy membrány
Abetalipoproteinémia, porucha pečeňového parenchýmu, postplenektómia.
Kodocyty alebo červené krvinky „na cieľ“
Červené krvinky ako znak streľby na cieľ, hypochromické
Zvýšená redundancia bunkovej membrány
Ochorenie pečene, talasémia, postplenektómia, hemoglobín C.
Eliptický tvar erytrocytu
Abnormálne cytoskeletálne proteíny
Echinocyty alebo červené krvinky
Erytrocyty s krátkymi výbežkami/hrotmi, s centrálnou bledosťou
Zmena membránových lipidov
Spravidla sú to artefakty. Zriedkavé: urémia, karcinóm žalúdka, nedostatok pyruvátkinázy.
Centrálna bledosť erytrocytov
Znížená syntéza hemoglobínu
Anémia z nedostatku železa, sideroblastická látka, talasémia
Zahrnuté: telá Howell-Joly
Inklúzie sú zvyčajne jedinečné, malé, okrúhle, bazofilné
Postsplenektómia, megaloblastická anémia, hemolytická anémia
Kruhové inklúzie (krúžok)
Postsplenektómia, megaloblastická anémia, hemolytická anémia
Malé erytrocyty, priemer 8 um VEM> 100 fl
Mladé erytrocyty, poruchy dozrievania erytrocytov
Megaloblastická anémia, alkoholizmus, ochorenie pečene, hemolytická anémia (retikulocyty), hypotyreóza atď.
Erytrocyty s priemerom> 9 µm, oválne
Šedé alebo modré červené krvinky
Ribozomálny materiál (mladé červené krvinky)
Precipitácia ribozomálnej RNA
Otrava olovom, talasémia
Dispozícia červených krviniek je podobná fyzike mincí
Zhlukovanie červených krviniek paraproteínmi
Paraproteinémia (myelóm, Waldenstromova makroglobulinémia)
Skreslené, fragmentované červené krvinky
Mechanické narušenie mikrocirkulácie (usadeniny fibrínu, mechanické náhrady)
Mikroangiopatická hemolytická anémia (CID - diseminovaná intravaskulárna koagulácia, PTT - trombotická trombocytopenická purpura, chlopňová protéza, ťažké popáleniny)
Sférické erytrocyty, bez centrálnej bledosti, menšieho priemeru
Znížený povrch membrány
Dedičná sférocytóza, imunitná hemolytická anémia
Porucha membrány s abnormálnou katiónovou permeabilitou
Dedičná stomatocytóza, imunitná hemolytická anémia
Molekulárna agregácia hemoglobínu S
Morfologické vyšetrenie krvných doštičiek
Vyhodnocuje sa morfológia krvných doštičiek a hodnotí sa počet krvných doštičiek na ster (semikvantitatívne hodnotenie). Krvné doštičky sú modro-modré cytoplazmatické fragmenty s jemnými azurofilnými granulami, s priemerom 2 až 4 μm a variabilnými tvarmi (často sférické alebo elipsoidné). Odhadovaný počet krvných doštičiek na ster je normálny, ak: je ich prítomnosť 5 - 15/imerzné pole alebo 1 doštička pri 10 - 20 erytrocytoch. [11]
- Megatrombocyty (> 4 μm priemer)
- Urýchlená výroba krvných doštičiek
- Nedostatok hovädzieho mäsa B12
- Myeloproliferatívne syndrómy
- Vrodená trombocytopénia (Bernard-Soulierov syndróm)
- Imunitná trombocytopenická purpura (ITP)
- Fragmenty megakaryocytov
- myelofibróza
- Hypogranulárne doštičky
- Myelodysplastický syndróm
- myelofibróza
- Krvné doštičky s bizarnými tvarmi, s hrubo zoskupenými hrubými granulami:
- Myeloproliferatívne choroby
- splenektómia
Morfologické vyšetrenie leukocytov.
Najčastejšie morfologické abnormality leukocytov sú reaktívne, vyvolané infekciami alebo toxicitou niektorých chemikálií (napr. Liekov); menej časté sú štrukturálne zmeny vyvolané abnormálnym dozrievaním (napr. nukleo/cytoplazmatická asynchrónia) alebo vrodenými anomáliami.
● Degeneratívne zmeny:
- Nekrotické/pyknotické bunky (vzorka staršia ako 4 hodiny; urémia; sepsa)
- Voľné jadrá (chronická lymfocytová leukémia, pľuzgiere akútnej leukémie, artefakt)
● Barrove telá - jadrový materiál pripojený k jadru v tvare „bubienka“, ktorý sa objavuje iba u žien (s dominantným chromozómom X)
● Hypersegmentované neutrofily (> 5 lalokov) spojené s:
- nedostatok megaloblastickej anémie/folátu
- anti-folátová chemoterapia (napr. metotrexát)
● Hyposegmentované neutrofily (2 laloky)
- Anomálie Pelger-Huët (dedičná)
- Pseudo-Pelgerove neutrofily (myelodysplastický syndróm)
● Hypogranulárne neutrofily: neutrofily, ktoré exprimujú zriedkavé granulácie a/alebo absenciu intracytoplazmatických granulácií.
- spojené s myelodysplastickým syndrómom
● Alder-Reillyho abnormalita: veľké, výrazné azurofilné a bazofilné granuly podobné toxickým granulám (môžu byť prítomné v lymfocytoch a monocytoch)
- dedičné, spojené s abnormalitami kostí a chrupaviek
- pri mukopolysacharidóze
● Chédiak-Higashiho syndróm: eozinofilné inklúzie (obrovské lyzozómy) prítomné v: leukocytoch
- Dedičné: čiastočný očný a kožný albinizmus, náchylnosť na bakteriálne infekcie a dyskrázia krvi.
● Neutrofily s toxickými granuláciami (perzistencia primárnych granulácií, často spojená s Döhleovými telieskami a vakuolami)
- Závažné infekcie alebo poškodenie tkaniva
- Lieky, najmä rastové faktory granulocytov
● Döhleho telieska (malé, modrošedé, oválne alebo nepravidelné cytoplazmatické inklúzie)
- bakteriálne infekcie, scaralatina, popáleniny, trauma, tehotenstvo, cytotoxické lieky
- Veľké Döhleho telá sa môžu objaviť v dedičnej abnormalite May-Hegglin.
● Intracytoplazmatické vakuoly (obsahujú enzýmy pôsobiace vo fagocytóze)
● Erytrofagocytóza alebo bakteriofagocytóza - sú fenomény charakteristické pre monocyty alebo neutrofily (obe bunky majú receptory IgG/C3)
- horúca autoimunitná hemolytická anémia
- diseminovaný lupus erythematosus
- sepsa
● Atypické/reaktívne lymfocyty sa objavujú ako odpoveď na rôzne vírusové alebo nevírusové stimuly
Morfologický aspekt: nepravidelný tvar cytoplazmy a/alebo jadra, bohatá cytoplazma, bazofily, intracytoplazmatické vakuoly, jemný chromatínový vzor, niekedy s nukleolárnym vzorom (podobný blastom)
- vírusové infekcie (Epstein-Barr, Cytomegalovírus, vírusová hepatitída)
- reagenty na lieky alebo nevírusové stimuly (napr. toxoplazmóza)
● Plazmocytové lymfocyty (Turkova bunka) sú stredné formy transformácie B lymfocytov na plazmatické bunky. Morfologický aspekt: jadro je centrálne, mierne excentrické, intenzívne bazofilná cytoplazma je menej zastúpená.
- sa vyskytuje v periférnej krvi po intenzívnej antigénnej stimulácii (napr. po očkovaní)
- pri Waldenstromovej makroglobulinémii - ako zhubné bunky
● Russelove telieska: ružové, červené alebo bezfarebné inklúzie v cytoplazme plazmatických buniek podieľajúcich sa na produkcii imunoglobulínov (Mottova bunka)
- bežne sa vyskytuje u mnohopočetného myelómu
● Plazmocyt s cytoplazmou „v plameni“: plazmatická bunka s červeným okrajom
- sa vyskytuje u mnohopočetného myelómu s IgA
● Riederova bunka: jadro so sardelou
- non-Hodkinove leukemické lymfómy, niektoré akútne leukémie
● Auerove telá: fialovočervené inklúzie oválneho podlhovastého tvaru, ktoré sa objavujú iba v cytoplazme myeloidných blastov; Auerove telieska sú tvorené fúziou primárnych peroxidazo-pozitívnych granulácií.
- prítomnosť Auerových tiel naznačuje akútnu myeloidnú leukémiu
- Pri akútnej promyelocytovej leukémii sa objavuje viac Auerových teliesok
Náter z periférnej krvi sa odporúča s kompletným krvným obrazom !
- Hodnotenie morfológie erytrocytov pri anémiách.
- Hodnotenie morfológie krvných doštičiek pri trombocytopéniách
- Kvantifikácia (%) a morfologický popis výbuchov
- Kvantifikácia (%) a popis atypických lymfocytov pri syndrómoch mononukleózy
- Opis štrukturálnych anomálií leukocytov, kvantifikácia ľavej odchýlky leukocytového vzorca, špecifikácia typov nezrelých granulocytov.
- Artefakty spôsobené nesprávnou technikou naťahovania škvŕn
- Abnormálne rozdelenie leukocytov s usporiadaním veľkých leukocytov na okrajoch sterov a na okraji.
- V dôsledku nesprávneho zobrazenia sa môžu leukocyty na okrajoch javiť ako menšie ako zvyčajne .
- Mechanická deštrukcia buniek s prítomnosťou voľných jadier na nátere pri absencii skutočnej krehkosti bunky (ako pri leukémiách).
2. Artefakty spôsobené nesprávnou technikou farbenia
- Bunky sú nadmerne sfarbené do modra: príliš dlhý čas zafarbenia, príliš zásaditý tlmivý roztok (nesprávne pripravený/starý), staré škvrny alebo príliš silné škvrny.
- Plocha medzi bunkami je sfarbená: nedostatočné umývanie čepele, možná paraproteinémia.
- Zafarbenie je príliš ružové/červené: tlmivý roztok je príliš kyslý, príliš krátky čas na zafarbenie/nadmerné umývanie čepele 4; 5 .
3. Artefakty spôsobené dlhodobým vystavením EDTA (staré vzorky)
- Artefakty erytrocytov: cimbuřím červené krvinky, "cieľové" červené krvinky, stomatocyty.
- Artefakty krvných doštičiek: môžu sa javiť zväčšené, menej sfarbené a bez charakteristických azurofilných granulátov.
- Artefakty leukocytov: cytoplazmatické vakuolizácie/ruptúry, jadrová karyorexia. Monocyty sa objavujú s početnými vakuolami a/alebo nepravidelne laločnatým jadrom.
- Reaktívne lymfocyty sa pri kontakte s EDTA naďalej morfologicky menia, jadro sa stočuje a cytoplazma sa zväčšuje a/alebo vakuolizuje (môže sa zameniť s bunkami lymfómu).
- Jadro lymfoplazmocytov môže byť stočené/„v tvare ďateliny“