Myší model protokolu čiastočnej obštrukcie čreva (preložený do nemčiny)

3. Pooperačné pozorovanie.

1. Po dokončení operácie premiestnite zvieratá v inkubátore do zotavovacej miestnosti, kde sa reguluje teplota a vlhkosť. Po chirurgickom zákroku sledujte zvieratá každých 15 minút počas prvej hodiny, potom každých 30 minút počas druhej hodiny, kým sú zvieratá v inkubátore.
2. Len čo je predpísané pozorovanie dokončené, premiestnite zvieratá do ich vlastnej klietky a každý deň ich sledujte z hľadiska klinických indikácií bolesti 18 a zaistite, aby bola chirurgická rana správne prítomná bez akýchkoľvek príznakov komplikácií (hojenie je dehiscencia).

Vyžaduje sa predplatné. Odporučte prosím JoVE svojmu knihovníkovi.

Reprezentatívne výsledky

Vyžaduje sa predplatné. Odporučte prosím JoVE svojmu knihovníkovi.

Diskusia

Ukázali sme, že u myší, ktoré podstúpili operáciu intestinálneho PO, sa dôsledne a reprodukovateľne vyvinula hypertrofia hladkého svalstva čreva, ktorá napodobňuje intestinálnu obštrukciu človeka. Operácie črevnej obštrukcie boli vyvinuté pre rôzne zvieratá, ako sú myši 7, potkany 10, morčatá 11, psy 12 a mačky 13. Myší model intestinálnej obštrukcie má čas, cenu, veľkosť a fenotypové výhody oproti iným väčším zvieracím modelom. Vývoj hypertrofie u myší alebo potkanov trvá iba 10 - 14 dní 10, v porovnaní s 2 - 4 týždňami u morčiat, psov a mačiek 11, 12, 13. Náklady na nákup a údržbu myší sú v porovnaní s inými modelmi tiež obrovským finančným prínosom. Navyše sú myši malé a ľahko použiteľné na operáciu PO. Najdôležitejšie je, že u myší, ktoré dostávajú operáciu PO, sa postupne a vo veľkom rozsahu rozvinie hypertrofia v tenkom čreve, zatiaľ čo u iných väčších zvierat sa vyvinie menej rozsiahly rast.

Tento PO chirurgický protokol sa považuje za hlavný chirurgický zákrok pre myši. Všetky chirurgické nástroje a materiál by mali byť pred použitím sterilizované a chirurgický zákrok by sa mal vykonávať v čistom prostredí vyhradenej operačnej sály, aby sa minimalizovalo znečistenie, ktoré môže viesť k infekcii a zápalu u myší. Okrem toho by sa myšiam po operácii mal podať prostriedok na tlmenie bolesti. Máme pomalú verziu buprenorfínu, ktorá je účinná až do 7:00 - 22:00. Po operácii navyše myši mali ťažkosti s žuvaním a prehĺtaním tuhej potravy. Až 5 dní po operácii sa myšiam poskytlo mäkké krmivo (pevná strava s trochou vody pridanej na zjemnenie potravy) a po 5 dňoch sa im preplo na normálne pevné krmivo.

Naša intestinálna PO chirurgia poskytuje in vivo model hypertrofie intestinálnej obštrukcie, pri ktorej sú bunky SMC, ICC a PDGFRa + neobvykle remodelované. Tento PO model je tiež ideálny na pochopenie toho, ako sú enterické neuróny zmenené PO a ako sú ovplyvnené hlavné motorické aktivity v tenkom a hrubom čreve 23. Tieto bunky je možné dynamicky prestavovať za patologických podmienok, ako aj za kultivovaných podmienok 15, 16. Zistili sme, že tieto bunky u myší SO sa správali trochu inak ako normálne myši bez operácie (obrázok 2 a Obrázok 3). Väčšina intestinálnych obštrukcií u ľudí nastáva v dôsledku adhézií brucha vyvinutých po operácii vedúcej k hypertrofii hladkého svalstva 3, 4, 5, 21. Po operácii SO sme tiež zistili, že bunky SMC, ICC a PDGFRα + boli mierne hypertrofické v tenkom čreve v porovnaní s (obrázok 3)), čo naznačuje, že samotný chirurgický zákrok môže vyvolať hypertrofiu hladkého svalstva čreva. Ak je to tak, operácia SO nie je úplným negatívom pre operáciu PO. Nie a SO by sa mali použiť na porovnanie s PO črevom.

V súhrne sme zistili nákladovo efektívny, spoľahlivý a opakovateľný PO chirurgický protokol u myší, ktoré produkovali silné črevné obštrukcie. Počas vývoja postihnutia sa SMC, ICC, PDGFRα + ako aj neuronálne bunky dynamicky remodelujú v rôznych tkanivových vrstvách a lokalitách. Tento model obštrukcie in vivo ponúka nové poznatky o našich znalostiach o tom, ako sa vyskytujú fenotypové zmeny v upchatom čreve na bunkovej úrovni.

Vyžaduje sa predplatné. Odporučte prosím JoVE svojmu knihovníkovi.