Preanalytiká. Pokyny na manipuláciu so vzorkou materiálu vo veterinárnej praxi

Predanalýza Pokyny na manipuláciu so vzorkou materiálu vo veterinárnej praxi

veterinárnej

Skúmavky na klinickú chémiu séra biele s granulami (Sarstedt), žlté s gélom (BD) hematologické skúmavky EDTA červené (Sarstedt) alebo fialové (BD) skúmavky na heparín oranžové (Sarstedt) alebo zelené (BD) koagulačné analýzy citrátové skúmavky zelené (Sarstedt) alebo modré (BD) Špeciálne tuby EDTA aprotinínové tuby ružové (stanovenie ACTH) Glukóza a laktát Tuky s fluoridom sodným žlté (Sarstedt) alebo šedé (BD) Nálepky s čiarovým kódom pevne pritlačte, aby dobre priľnuli a nezliehali počas prepravy alebo strojového spracovania. 7.

Odber krvi u psov a mačiek Odber krvi u psov a mačiek sa vykonáva u spolupracujúcich zvierat vo vena cephalica antebrachii dexter (pre pravákov), ktorý je umiestnený nad a trochu mediálne na povrchu predlaktia. Pravá predná končatina je zafixovaná a natiahnutá zozadu pomocníkom tak, aby bola žila utiahnutá. Uľahčuje to nájdenie a zabraňuje samovoľnému pohybu žily. U nepokojných zvierat sa môže krv odobrať aj z bočnej safény (pes) alebo zo strednej žily (mačka) nad členkom na zadnej končatine. Na utiahnutie žily je končatina natiahnutá a žila je upchatá v priehlbine kolena (pes) alebo v polovici výšky na vnútornej strane stehna (mačka). Odber krvi z hlavovej žily 10

Krčná žila, krčná žila, je vhodná aj na odber krvi. Hlava alebo ňufák je držaný smerom hore a fixovaný asistentom, zatiaľ čo osoba, ktorá odoberá krv, ľavou rukou prekrví krčnú žilu na úrovni hrudného vchodu. V prípade husto osrstených alebo nepokojných zvierat je potrebné miesto vpichu oholiť a opatrne vydezinfikovať pred zavedením zavedeného katétra. Odber krvi z krčnej žily Odber krvi z mozgovej žily s motýľom a kužeľom monovette 11

KRVNÉ Antikoagulancium Odber krvi malým domácim miláčikom Rýchlosť prietoku krvi je rozhodujúca pre získanie dostatočného množstva krvi. Preto sa odporúča používať kanyly s veľkým objemom lúmenu (20 G) a príslušné zberné nádoby. U králikov a fretiek, rovnako ako u psov a mačiek, sa môže krv odoberať pomocou skúmaviek EDTA a séra s normálnou veľkosťou; u morčiat a činčíl sa odporúča použitie nádobiek na malé vzorky so skrutkovacím viečkom alebo nádob na jedno použitie s kapilárnym účinkom (napr. Multivette, Microvette, Sarstedt). . Mikrokanyly V prípade malých žiliek sú na podporu dostatočného odberu krvi obzvlášť vhodné nové typy mikrokanúl (mikrokanyla, Sarstedt). Pretože kanyly nemajú kužeľ, môže krv optimálne odtekať, aj keď je krvný tlak nízky. Drážkovaná rukoväť zaisťuje bezpečné vedenie kanyly. Odporúčame použiť veľkokapacitnú mikrokanylu 21 G (zelená). 12

Metóda voľby odberu krvi králikom, morčatám, činčile a fretke je v praxi z bočnej safény, sú však možné aj iné miesta vpichu. Punkčné miesta u drobných cicavcov Druh Punkčné miesta Králik V. saphena lateralis 1, V. cephalica antebrachii 1, A./V. auricularis lateralis 1 (iba malé množstvo), ucho 2 morča V. saphena lateralis 1, V. cephalica antebrachii 1, podložky 2 Chinchilla V. jugularis, V. saphena lateralis 1, V. cephalica antebrachii 1, V. caudali, V. sublingualis 2, vložka 2, ucho 2, fretka, krčná jugulárna žila, bočná žila safény 1, antebrachiálna žila 1, guľa 2, ucho 2 Degu jugulárna žila, bočná žila safény 1, sublingválna žila, hlavová žila antebrachii, guľa škrečka V. sublingualis 2, žila saphena lateralis, žila cephalica, guľa 2 myš, potkan V. tvárový 2, V. sublingualis, V. saphena lateralis, V. cephalica antebrachii, V. caudalis, guľa 2 1 sú vhodné pre venózne katétre 2 kvapkajúce malé množstvo priamo z miesta vpichu 13

Pre diferenciálny krvný obraz sa odporúča pripraviť a odoslať dva krvné nátery ihneď po odbere. Dostatočnú veľkosť vzorky je často ťažké získať od vtákov a plazov. Množstvá uvedené v špecifikácii služieb predstavujú minimálne množstvá pre príslušné skúšky, ale vzťahujú sa iba na skúmanie jednotlivých parametrov. Prípustné vzorky Vzorky krvi z vtákov a plazov Vzorky krvi vtákov a plazov sú veľmi náchylné na hemolýzu a rozpad buniek. EDTA má hemolytický účinok na krv plazov. Lítium heparín je preto najvhodnejší ako antikoagulant (krv lítia heparínu pre krvný obraz a stanovenie obsahu olova, plazma lítia heparínu pre klinicko-chemické parametre a sérologické testy). Vták do 1% telesnej hmotnosti Andulka (40 g telesnej hmotnosti) maximálne 0,4 ml korela (100 g telesnej hmotnosti) maximálne 1,0 ml veľkého papagája (400 g telesnej hmotnosti) maximálne 4,0 ml plaz až do 0,5% telesnej hmotnosti, tj maximálne 0,5 ml na 100 g telesnej hmotnosti. 16

Odber krvi vtákom U vtákov sa krv odoberá buď z krídlovej žily alebo z pravej krčnej žily. Technika odberu krvi z žily krídla Pomocník zafixuje vtáka v polohe na chrbte a skúšajúci jednou rukou vytiahne jedno krídlo nabok. Po zvlhčení lakťovej oblasti je viditeľná ulnárna žila prebiehajúca v pravom uhle k šliach a môže byť zablokovaná palcom ruky, ktorá drží krídlo. Žila je prepichnutá druhou rukou. Krv sa odoberá aspiráciou s pripojenou injekčnou striekačkou. Po vybratí kanyly je oblasť vpichu ľahko stlačená tampónom namočeným v chloride železitom. Odber krvi z žily krídla amazonky Pacient je spravidla uložený späť do klietky s pripojeným tampónom. Tampón prilepený na koži v dôsledku zrážajúcej sa krvi neskôr odpadne. 17

Odber krvi koňom U koní sa venózna krv zvyčajne odoberá z jednej z dvoch krčných žíl (vonkajšej krčnej žily). Venepunkcia sa vykonáva pri prechode zo strednej do hornej tretiny krku, pretože sval omohyoideus sa nachádza ochranne medzi povrchovou jugulárnou žilou a hlbšou spoločnou krčnou tepnou, čo znižuje riziko arteriálnej punkcie. Žily sa vyšetrujú na preťaženie, odtok krvi, zväčšený obvod alebo na prítomnosť zápalu alebo predchádzajúceho poškodenia. Spravidla stačí povrchová dezinfekcia vlasov a pokožky. V prípade veľmi dlhej a hustej srsti (napríklad shetlandské poníky, Islanďania) môže byť užitočné vlasy ostrihať, aby ste lepšie vizualizovali žilu a dezinfikovali miesto vpichu. Alternatívne je možné odobrať krv aj z hlavovej žily, safény (najmä u žriebät) alebo z povrchovej epigastrickej žily. Odber krvi z krčnej žily 20

Odber krvi z ťavovitých krvi Krv sa odoberá aj z jugulárnej žily ťavovitých. Na rozdiel od väčšiny domácich zvierat prebieha jugulárna žila a krčná tepna v ťavách nového sveta spolu cez najdlhšiu časť krku a sú od seba vzdialené iba tri až štyri centimetre pred dolnou čeľusťou omohyoideus. Náhodné prepichnutie tepny môže preto viesť k rozsiahlej tvorbe hematómu. Pretože ťavovité zvieratá môžu aktívne tlačiť pohyblivé krčné svaly pred žilu, sú vďaka prieniku svalov možné veľmi vysoké hodnoty CK (> 10 000 U/l). Kvôli hodnotnej kvalite srsti je holenie miesta odberu krvi u ťavovitých rastlín kontraindikované. Keďže žily sa zrútia veľmi rýchlo, zvyčajne nie je možné odobrať krv pomocou vákuového systému. Aby sa kožušina neznečistila krvou, odporúča sa odber krvi aspiráciou (napr. S-Monovette, Sarstedt). Odber krvi z alpaky 21

KRVNÉ Antikoagulanciá Odoberanie krvi hovädziemu dobytku, ovciam a kozám Vonkajšia jugulárna žila sa tiež zvyčajne používa na odber krvi dobytku, oviec a kôz. Je ľahko prístupný a zreteľne sa prejavuje pri priehrade. U hovädzieho dobytka sa môže krv odobrať aj z strednej kaudálnej žily na spodnej strane chvosta. Odber krvi z chvostovej žily Odber krvi z krčnej žily 22

KRVNÉ Antikoagulancium Príprava krvného náteru Po stieraní prvej kvapky krvi z dobre premiešanej skúmavky kapilárou alebo pipetou na koniec sklíčka, potom vložte druhé sklíčko pred miesto aplikácie a mierne ho posuňte dozadu. Krv je rovnomerne rozložená po okraji sklíčka v 45 - Držte uhol a veďte ho rýchlo a rovnomerne na opačnú úzku stranu. Krv je odoberaná za okraj, nie tlačená! Ideálny je náter, ktorý je približne 2/3 dĺžky povrchu šmýkačky, ponecháva okraj z oboch strán voľný a končí jasnou vlajkou. Nechajte rozmazanie na plocho. Označte sklíčko na okraji podložky ceruzkou alebo štítkom s čiarovým kódom (nalepte na úzku stranu bodu pripevnenia; nie na vlajku).

správny nesprávny počet čiarových kódov číslo čiarových kódov číslo čiarových kódov číslo čiarových kódov číslo čiarových kódov číslo čiarových kódov číslo čiarových kódov číslo čiarových kódov číslo čiarových kódov ideálne príliš krátke, príliš dlhé bez vlajky OT odvážne príliš úzke, príliš široké, nerovnomerné

Nedostatočné otočenie EDTA skúmavky po odstránení a tým nedostatočné premiešanie krvi s EDTA pridanou ako antikoagulantom vedie tiež k tvorbe zrazenín (pozri tiež postup odberu krvi, s. 9). dôjde (zvýšená viskozita krvi). Na rozlíšenie medzi spontánnou aglutináciou a tvorbou valcovania je užitočné trikrát umyť krv rovnakým množstvom soľného roztoku. Ak aglutinácia pretrváva, imunitná hemolytická anémia sa považuje za preukázanú. Aglutinácia erytrocytov Spontánna aglutinácia erytrocytov musí byť odlíšená od preanalytickej koagulácie krvi. Môže to byť známka imunitnej hemolytickej anémie, pri ktorej môže prítomnosť autoaglutínov (IgG a IgM) viesť k makroskopicky viditeľnému zhlukovaniu erytrocytov. Existuje možnosť zámeny s takzvanou tvorbou valcov, čo je náhodný nález hlavne u koní a mačiek alebo v súvislosti s akútnym zápalom spontánna aglutinácia pri imunohemolytickej anémii (pes) 33

Testy moču Vzorky moču musia byť bez vonkajšej kontaminácie, aby bolo možné vyhodnotiť zakalenie alebo zmeny farby bez artefaktov. S výnimkou mikrobiologických testov sa všetky testy uskutočňujú s použitím natívneho moču. Ak je to potrebné, vzorka sa musí rozdeliť a pre zmysluplný výsledok sa musí poslať stabilizovaný a natívny moč. Na prepravu sú potrebné skrutkovateľné nádoby. Cystocentéza Cystocentéza je najvhodnejšou metódou na zber moču u psov a mačiek. Ak sa to urobí správne, je to bezpečný a ľahký postup. V závislosti na osobných skúsenostiach a technickom vybavení praxe je možné cystocentézu vykonať pomocou ultrazvuku alebo naslepo. Na vpich je potrebná kanyla (22 G, čierna) a injekčná striekačka (10 ml). Podľa stavu srsti sa miesto vpichu oholí a po aplikácii alkoholu sa dezinfikuje pokožka alebo sa srsť rozdelí. Aseptická príprava miesta vpichu nie je potrebná. 34

Ak je to možné, močový mechúr je prepichnutý pod sonografickou kontrolou. Ak je močový mechúr dostatočne naplnený a hmatateľný, možno cystocentézu vykonať aj bezpečne bez ultrazvukového prístroja a vykonáva sa na psovi v stojacej polohe alebo v ľahu alebo v polohe na boku. U mačiek je punkcia najjednoduchšia v bočnej polohe. Močový mechúr je pripevnený jednou rukou, druhá ruka zavádza kanylu s pripojenou striekačkou do ventrálnej oblasti ventrolaterálnej oblasti močového mechúra a nasáva ju. Katetrizácia U koní a hovädzieho dobytka sa používa močový katéter, pokiaľ nie je možné odobrať spontánne vylúčený moč. V prípade malých zvierat by sa mal močový katéter primárne použiť na kontrolu priechodnosti močovej trubice, inak prevládajú nevýhody tejto metódy odstraňovania (trauma sliznice, riziko zavlečenia choroboplodných zárodkov). Ultrazvuková cystocentéza s usmernením 35

Extrakcia Výhody a nevýhody Laboratórne vyšetrenia spontánne priamy odber - nesterilný stav moču 1 gén (napr. S kontamináciou močovým sedimentom 1 naberačka močovej trubice, predkožky, klinicko-chemická alebo vaskulárna) Vaginálne a okolité vyšetrenia (napr. UP/C) 1, 2 z nevhodného na imunologické vyšetrenia mikrobiologická podstielka (napr. UCC) 1,2 (katéter, vyšetrenia perleťová podstielka) katéter močový mechúr- nízka kontaminácia- stav moču1 nebezpečenstvo katétra sediment moču1 poranenie močovej trubice/klinicko-chemické a močový mechúr (kontaminácia imunologické vyšetrenia 1,2 krvi) mikrobiologické vyšetrenie 2 mikróby sa vtlačia do močového mechúra zvonka cystotranskutánny čistý močový mechúr mikrobiologické vyšetrenie 2 centrálne prepichnutie akejkoľvek kontaminácie pri všetkých ostatných vyšetreniach (pozri vyššie) krv v močovom mechúre 1 = natívny moč (sterilná, nepotiahnutá skúmavka) ) 2 = stabilizovaný moč (špeciálna skúmavka s kyselinou boritou) V závislosti od požadovaných vyšetrení Ak je to potrebné, rozdeľte moč a odošlite natívny aj stabilizovaný moč. 37

Odber by sa mal vykonať pred začatím liečby antibiotikami. Ak nie je možné zaslať vzorky priamo do laboratória, môžu sa vzorky uchovávať v chladničke 1 až 2 dni na kultúrne bakteriologické testy. To platí aj pre vzorky mlieka a moču v skúmavkách s pridaným stabilizátorom. Mikrobiologický testovaný materiál Pre výsledok bakteriologického testu je nevyhnutný správny výber materiálu vzorky. Na dosiahnutie vysokej úrovne informačnej hodnoty musí byť materiál získaný a odoslaný takým spôsobom, aby pôvodne prítomné patogény zostali schopné reprodukcie alebo aby boli počas prepravy zistiteľné. Anaeróby a obzvlášť citlivé baktérie, ako napr B. β-hemolytické streptokoky alebo Haemophilus spp., Nesmie sa skladovať, ale okamžite priniesť do laboratória. Tiež by sa mal čo najskôr vyšetriť predovšetkým sterilný materiál vzorky (krvná kultúra, synovia atď.), Pretože v prípade infekcie môže najmenšia zmena počtu zárodkov alebo spektra zárodkov viesť k sfalšovanému výsledku. 38

Na mikrobiologické spracovanie a vyhodnotenie vyšetrovacieho materiálu sú bezpodmienečne potrebné okrem zaistenia totožnosti aj tieto informácie: Dôležitá predbežná správa čas/dátum Pôvod vyšetrovacieho materiálu (napr. Ster z krčka maternice, pleurálna punkcia) Poradie a otázka (napr. Detekcia patogénnych zárodkov a/alebo špeciálne) Zárodky) Tampóny Pri vyberaní tampónu dbajte na to, aby neprišiel do kontaktu s nesterilnými predmetmi alebo bakteriálne kolonizovanými sliznicami atď. Šmuhy z oblastí, ktoré sú fyziologicky kolonizované baktériami (pokožka/ústna dutina/nos), sú uvedené iba pre konkrétne otázky. V prípade výterov z nosa sa musí po vyčistení nosového zrkadla zabezpečiť čo najhlbšie odstránenie. Pre čo najlepšie výsledky vyšetrenia je potrebné tampón ihneď po vybratí preniesť na transportné médium. Predbežná diagnóza/klinické informácie (napr. Nástup choroby, klinické príznaky, pobyt v zahraničí) Predbežná liečba antibiotikami Podrobnosti o predbežných vyšetreniach, napr. B. MRSA už detekovaná dňa. Tlustý tampón tenký tampón 39

Vaginálna cytológia Cytologický obraz pošvového steru u feny umožňuje určiť stav cyklu a poskytuje informácie o patologických procesoch. Na tento účel sa, pokiaľ je to možné pod kontrolou zrkadla, získa škvrna z lebečnej, chrbtovej alebo bočnej pošvovej klenby, vyvalí sa na podložné sklíčko a vzorka sa potom vysuší na vzduchu. Vzhľadom na krehkosť buniek nemožno tampóny, ktoré neboli vytrhnuté, vyhodnotiť. Technika zavádzania vaginálneho náteru 45

DOPRAVA Preprava/preprava vzoriek Po označení tub a vyplnení testovacieho formulára sú vzorky zabalené na prepravu. SYNLAB.vet poskytuje potrebné materiály väčšinou zadarmo. Obal musí mať dostatočný ochranný účinok pred nevyhnutelnými prepravnými nákladmi, ktoré sa vyskytujú počas prepravy (predovšetkým sa nesmie roztrhnúť alebo prasknúť) a nesmie spôsobiť žiadne narušenie procesu spracovania. V prípade prepravy poštou a vnútroštátnymi kuriérskymi službami sa preto musí vždy použiť viacdielne balenie, ktoré sa skladá zo skutočnej nádoby na vzorky, ochranného alebo prepravného obalu a vonkajšieho obalu. Ak sa posiela kvapalný materiál, musí sa medzi primárnu a sekundárnu nádobu vložiť absorpčná vrstva (absorpčná vložka). Prepravné balenie sa skladá z 3 komponentov: 1.) samotná skúmavka so vzorkou (primárna nádoba) 2.) nepriepustná sekundárna nádoba Namiesto kartónovej škatule možno použiť aj prepravnú obálku PE. Na štítku s vyňatým materiálom vzorky (pozri nižšie) je vyňatá veterinárna lekárska vzorka. Látky kategórie B musia byť označené štítkom nebezpečného tovaru UN 3373. 3.) vonkajší obal 48