Asociácia BVD so psdacínovým PDD syndrómom

Asociácia BVD so syndrómom PDD u psitakcíny

Prvýkrát zverejnené: 9. mája 2016

Amazona aestiva

Redakčná skupina: MEDICHUB MEDIA

Abstrakt

Ochorenie proventrikulárnej dilatácie (PDD) je zápalové ochorenie vtákov, ktoré primárne postihuje autonómne nervy horného a stredného tráviaceho traktu, pričom prípady zvyčajne vykazujú dysfunkciu gastrointestinálneho traktu, ako je dysfágia, regurgitácia a prítomnosť nestrávenej potravy vo výkaloch. Celkový počet 54 vtákov druhu Psittacine patriacich k rôznym druhom (6 Amazona aestiva, 1 Amazona ventralis, 7 Ara ararauna, 4 Ara macao, 12 Psittacus erithacus, 2 Cacatua galerita, 1 Cacatua alba, 2 Cacatua sulphureus, 1 Pionis menstruus, 2 Pioniti. leucogaster, 11 Psittacula krameri, 5 Psittacula eupatria). Skríning metódami PCR na prítomnosť ABV identifikoval 47 infikovaných zvierat, ktoré boli v testoch pozitívne. Ostatné vtáky boli v týchto testoch negatívne. Taktiež sa pozorovala hojná prítomnosť kvasných kvasiniek v rôznych orgánoch infikovaných papagájov.

Zhrnutie

Dilatované proventrikulárne ochorenie (PDD) je zápalové ochorenie, ktoré postihuje vtáky v autonómnych nervoch horného a stredného tráviaceho traktu, pacienti majú zvyčajne dysfunkcie gastrointestinálneho traktu, ako je dysfágia, regurgitácia a prítomnosť nestrávenej potravy vo výkaloch. 54 vtákov druhu psittacine, ktoré patria k rôznym druhom (6 Amazona aestiva, 1 Amazona ventralis, 7 Ara ararauna, 4 Ara macao, 12 Psittacus erithacus, 2 Cacatua galerita, 1 Cacatua alba, 2 Cacatua sulphureus, 1 Pionis menstruus, 2 Pioes leucogaster, 11 Psittacula krameri, 5 Psittacula aupatria) boli predmetom predkladanej štúdie. Skríningové metódy PCR na zistenie prítomnosti vtáčieho bornavírusu (AVV) identifikovali 47 prípadov pozitívnej infekcie. Zvyšok subjektov vykazoval negatívny výsledok. V rôznych orgánoch infikovaných papagájov sa tiež pozorovala hojná prítomnosť kvasinkových kvasiniek.

Štúdie preukázali, že existuje niekoľko genotypov vírusov, ktoré ovplyvňujú prevažne určité druhy papagájov a spôsobujú odlišný obraz a vývoj lézií. Výskum doteraz neobjasnil výskyt každého genotypu v populáciách papagájov a nedokázal jasne rozlíšiť medzi konkrétnym genotypom a určitými druhmi papagájov. Štatistické štúdie je pomerne ťažké vykonať, pretože sa zistilo, že ten istý genotyp možno izolovať z rôznych druhov (najmä na farmách s niekoľkými druhmi papagájov sa vírus prenáša bez ohľadu na genotyp na akýkoľvek druh) a v mnohých prípadoch dva alebo viac genotypov je izolovaných od toho istého jedinca. Laboratórna analýza navyše odhalí prítomnosť vírusu (v mnohých prípadoch je výsledok poskytnutý ako pozitívny Bornavirus) bez odkazu na genotyp.

Laboratórna analýza sa vykonáva buď na zistenie prítomnosti a identifikácie vírusu, alebo na zistenie špecifických protilátok. Potvrdzujúca diagnóza pozitívneho vtáčieho narodeného vírusu sa v súčasnosti robí pomocou PCR analýzy, ktorá odhalí prítomnosť vírusu v biologických vzorkách, ale necertifikuje chorobný stav. Mnoho testovaných papagájov (rôznych druhov) bolo detegovaných s pozitívnym narodeným vírusom, ale bez klinického alebo lézneho obrazu. Okrem toho PCR analýza odhalí vírus bez stanovenia presného genotypu zisteného vírusu. Stanovenie protilátok a titra protilátok ukazuje, že imunitný systém vtáka reaguje na vírus, ktorý sa dostal do tela. Aj keď sa predpokladá, že vysoký titer protilátok naznačuje infekciu a pokus tela o zničenie vírusu, klinický výskum ukázal, že pozitívne papagáje s veľmi vysokým titrom protilátok majú najvyššie riziko vzniku PDD (u pozitívnych papagájov s protilátka nebola diagnostikovaná s PDD ani po niekoľkých mesiacoch, počas ktorých nebol vták negatívny).

U mnohých jedincov sa vyvinú PDD alebo nervové a tráviace príznaky. V tomto štádiu je možné diagnostikovať diagnózu na základe krvných testov (pozitívna PCR na vtáčí Bornavirus alebo špecifické antivírusové protilátky). Klinickú diagnózu PDD je ťažké stanoviť na základe symptómov, pretože mnohé príznaky sa vyskytujú pri mnohých iných infekčných, parazitárnych alebo metabolických ochoreniach. Diagnóza PDD sa potvrdzuje na základe špecifických lézií tráviaceho traktu (najmä lézií proventrikulárneho systému), doplnených o histologické vyšetrenia na vzorkách odobratých z proventrikulu, pipety, obličiek, mozgu a miechy.

Uskutočnili sme štúdiu, ktorá zahŕňala 54 psitakcínov taxonomicky klasifikovaných druhov v rôznych rodoch: 6 Amazona aestiva, Amazona ventralis, 7 Ara ararauna, 4 Ara macao, 12 Psittacus erithacus, 2 Cacatua galerita, Cacatua alba, 2 Cacatua sulphureus, jeden Pionis menstruus, 2 Pionites leucogaster, 11 Psittacula krameri, 5 Psittacula eupatria. Distribúcia podľa pohlavia bola 31 mužov a 23 žien. Vek sa pohyboval od menej ako 1 rok do 17 rokov, bol neznámy a ťažko oceniteľný pre 7 vtákov. Z celkového počtu vtákov zahrnutých do tejto štúdie bolo 9 odoslaných na pitvu, boli odobraté postmortálne biologické vzorky, zatiaľ čo ďalších 12 vtákov bolo odobratých biopsiou. Všetky vtáky vykazovali klinické príznaky PDD, prejavy sa sústreďovali na tráviaci trakt (znížená telesná hmotnosť, hnačky, nestrávená strava vo výkaloch alebo rozšírený proventriculus), niektoré vtáky tiež vykazovali príznaky po poškodení nervového systému (tremor, ataxia alebo kŕče).

Diagnóza bola stanovená pomocou PCR. Štandard PCR obsahujúci SDC s cieľovou sekvenciou C sa získal klonovaním cieľovej sekvencie do vektora pomocou klonovacej súpravy s dvojitým promótorom Topo TA podľa pokynov výrobcu. Genetický materiál bol extrahovaný pomocou súpravy na minimálnu prípravu SNAP podľa pokynov výrobcu. Koncentrácia genetického materiálu sa stanovila spektrofotometriou pomocou prístroja Gene Quant II RNA/DNA a RNA sa použila ako templát pre SDC-C PCR test na potvrdenie prítomnosti SDC C sekvencie pre C. jejuni. Štandardy sa získali z prípravkov obsahujúcich medzi 1,2 a 1,2 x 108 ekvivalentov genómu na 3 μl štandardného genetického materiálu, ktoré sa pred použitím skladovali pri -20 ° C, nechali sa rozmraziť a zmraziť najviac trikrát. PCR priméry a vzorky (CJTP2) boli vyvinuté pomocou softvéru Primer Express na zameranie špecifickej oblasti.

Na analýzu genetického materiálu purifikovaného technikou RT-PCR sa podľa pokynov výrobcu extrahoval činidlom na prípravu vzorky. Množstvo (1 ml) vzorky pripravenej a obsiahnutej v riedidle sa centrifugovalo pri 16 000 x g počas 10 minút, aby sa usadili biologické častice, a supernatant sa opatrne odsal a odstránil. Vzorky sa centrifugovali ešte raz pri 16 000 x g po dobu 1 minúty, všetky zvyšky supernatantu sa odstránili a zvyšok sa resuspendoval v 200 ul činidla na prípravu vzoriek silnou homogenizáciou. Suspenzie sa zahrievali 10 minút plávaním na vodnom kúpeli; Vzorky sa odstránili a nechali sa 2 minúty ochladiť na teplotu miestnosti, potom sa znova 2 minúty centrifugovali pri 16 000 x g. Pre 50 ul riedidla pre molekulárnu biológiu bolo pridané množstvo 50 ul supernatantu a zriedená vzorka genetického materiálu bola použitá ako štandard pre RT-PCR analýzu...

Syndróm PDD a implicitné ABV sa priamo pripisovali letalite v 34 prípadoch. Prežitie sa zaznamenalo, keď klinické príznaky papagájov vybledli alebo dokonca zmizli a prežili najmenej mesiac po predložení úradu. Screening štandardnými metódami na prípady pitvy zistil, že išlo o infikované vtáky, a pozitívne označil vykonané testy, a to: Ara ararauna, 2 Psittacus erithacus, Cacatua galerita, Amazona ventralis, Amazona aestiva, 4 Psittacula krameri.

Pozorovala sa tiež hojná prítomnosť fermentačných mikroorganizmov v rôznych orgánoch papagájov zahrnutých do štúdie. Z celkového počtu vtákov so zložitou tráviacou patológiou deväť uhynulo krátko po príchode na kliniku kvôli vážnym príznakom. Dostupné orgány týchto zvierat sa odobrali na mikrobiologické vyšetrenie a PCR analýzu. Vo väčšine prípadov bol vírus zistený vo väčšine orgánov chorých vtákov vrátane mozgu, pečene, obličiek, srdca a pľúc. Vzorky stolice odobraté zo všetkých klinických prípadov boli pozitívne iba u 24 vtákov. Homogenáty z orgánov a odobratých biologických vzoriek sa pridali do rôznych kultúr vtáčích a cicavčích buniek. V dňoch 7, 10 a 14 po infekcii sa kultúry kontrolovali z hľadiska charakteristických zmien. Pokusy na kultúrach vtáčích a cicavčích buniek odhalili prekvapivo široké spektrum orgánov a bunkových typov, v ktorých vírus rastie, čo ukazuje, že nemá prednosť pre bunky centrálneho a periférneho nervového systému.

Fermentačné mikroorganizmy sa skúmali u všetkých vtákov s typickými klinickými príznakmi PDD zahrnutými do štúdie, aby sa korelovali a porovnali možnosti, ktoré klinická diagnóza odhalí PDD, ale výsledky PCR sú negatívne ABV, čo je možný vývoj choroby v dôsledku vývoja kvasiniek. alebo iné fermentačné mikroorganizmy, ktoré môžu spôsobiť podobné ochorenie. Získané výsledky naznačujú, že existuje kolektívny infekčný faktor prenosu a prenos sa môže uskutočňovať tráviacim alebo dýchacím traktom.

  • Vtáčie narodené vírusy sa potvrdili ako primárne etiologické činidlo PDD u papagájov.
  • Infikované vtáky, aj keď nevykazujú klinické príznaky, tvoria rezervoár vírusu, ktorý zaisťuje pravidelné vylučovanie vírusu stolicou.
  • Analýza biologických vzoriek odobratých z vtákov môže zistiť pozitívne narodené vírusy, u ktorých sa môžu vyvinúť klinické príznaky (vrátane PDD) alebo môžu zostať klinicky zdravé.
  • Inkubačná doba je pomerne krátka, od 12 do 14 dní do 30 dní.
  • Diagnóza PDD umožňuje ustanoviť terapeutický kurz založený hlavne na protizápalových liekoch (nesteroidných látkach), ktoré vo väčšine prípadov zabezpečia okamžité zastavenie alebo spomalenie vývoja ochorenia.
  • Prognóza je vždy nepriaznivá.