Erytropoetín - CSID Čo sa stane Doktor
Všeobecné informácie
Erytropoetín (EPO), glykoproteínový hormón kódovaný génom umiestneným na dlhom ramene chromozómu 7 a vylučovaný hlavne obličkami, zasahuje do kontroly erytropoézy. Normálne sa hladiny erytropoetínu líšia inverzne s hematokritom. Hypoxia stimuluje uvoľňovanie EPO, ktoré následne indukuje produkciu erytrocytov v kostnej dreni. Zvýšený erytrocyt, hematokrit a hemoglobín potláčajú uvoľňovanie EPO.
EPO stimuluje proliferáciu, rast a diferenciáciu prekurzorov erytroidov, čo vedie k zvýšenému počtu erytrocytov.
EPO má dominantný účinok na jednotky tvoriace kolónie erytroidov (CFU-E), pronofoblasty a bazofilné erytroblasty4; 5. Jedným z najpozoruhodnejších účinkov EPO je schopnosť hormónu udržiavať životaschopnosť týchto buniek pri absencii akéhokoľvek účinku na bunkový cyklus. Účinok na megakaryocyty je malý1; 5.
Hematopoetické bunky, ktoré reagujú na EPO, majú na svojom povrchu špecifické receptory pre tento hormón (EPOR). Po naviazaní EPO na receptory nasleduje proces fosforylácie tyrozínu. Pretože EPOR nemá kinázovú doménu, musí byť spojená s tyrozínkinázou, ktorá je súčasťou rodiny Janusových kináz a nazýva sa JAK2. Bodová mutácia (Val617Phe) v JAK2 vedie k jeho aktivácii. Táto aktivujúca somatická mutácia bola zistená u väčšiny pacientov so skutočnou polycytémiou a s nižšou frekvenciou u iných chronických myeloproliferatívnych novotvarov1.
Skutočná polycytémia je ochorenie klonálnych kmeňových buniek charakterizované autonómnou produkciou krvotvorných buniek. Nárast hmoty erytrocytov vedie k kompenzačnému potlačeniu hladín EPO. Medzi zmeny spojené s polycytémiou vera patria: trvale zvýšené hodnoty hemoglobínu (Hb> 18,5 g/dl u mužov a> 16,5 g/dl u žien), často sprevádzané leukocytózou a trombocytózou, splenomegália, erytromelalgia, trombóza v neobvyklých oblastiach4. Nízke hodnoty erytropoetínu v sére sú jedným z menších diagnostických kritérií pre skutočnú polycytémiu6.
Sekundárna polycytémia môže byť dôsledkom adekvátneho alebo neadekvátneho zvýšenia množstva erytrocytov. Adekvátne sekundárne polycytémie sa vyvíjajú v dôsledku stavov spojených s chronickou hypoxiou (biotop vysokej nadmorskej výšky alebo pľúcne ochorenie). Produkcia EPO je vysoká na kompenzáciu hmoty erytrocytov a na pokus o dodanie väčšieho množstva kyslíka do tkanív. Neadekvátne sekundárne polycytémie sú spôsobené radom nádorov obličiek, pečene, pľúc alebo mozgu, ktoré vylučujú nadbytok EPO alebo podobných molekúl4.
Pretože 80-90% množstva EPO sa produkuje v obličkách, je chronické zlyhanie obličiek sprevádzané výrazným poklesom produkcie erytropoetínu s následnou anémiou. Pečeň môže syntetizovať malé množstvo EPO, takže anefrickí pacienti majú zvyškové množstvo EPO produkovaného v pečeni3; 4.
Chronické zápalové ochorenia, zhubné nádory, odmietnutie štepu a ťažké traumy pravdepodobne vedú k inhibícii produkcie erytropoetínu cytokínmi (IL-1, TNFα), ale anémia za týchto podmienok je výsledkom multifaktoriálnych javov3.
V roku 1989 bola zavedená liečba rekombinantným ľudským erytropoetínom; Kandidáti na túto terapiu sú pacienti s chronickým zlyhaním obličiek, ako aj s anémiou rôznych príčin: chemoterapia, AIDS a niektoré hematologické poruchy4.
Dôvodom, prečo je EPO na dopingovom zozname vo výkonnostných športoch, je zvýšenie objemu krvi, erytrocytov a hemoglobínu na zvýšenie transportnej kapacity kyslíka. Takže zvýšenie hemoglobínu o 0,3 g/dl vedie k zvýšeniu cvičebnej kapacity o 1%. Použitie EPO môže byť ťažké dokázať, pretože syntetická forma sa nelíši od prírodnej. Závery možno urobiť nepriamo zmenami v hemoglobíne, hematokrite, feritíne a receptore pre transferín3.
Odporúčania pre stanovenie sérového erytropoetínu
• Diferenciácia primárnej (vera) polycytémie od sekundárnej polycytémie, • identifikácia kandidátov na liečbu rekombinantnou ľudskou EPO, • vyšetrovanie nejasnej príčiny normocytovej anémie, • hodnotenie pacientov podstupujúcich liečbu EPO s nedostatočnou krvotvornou odpoveďou, • sledovanie pacienta s nádormi vylučujúcimi EPO3; 4.
zbierka
Výcvik pacientov - pôst (napr. pôst) 3.
Odobratý exemplár - úžasný venos3.
Zberová nádoba - vacutainer bez antikoagulancia s/bez separačného gélu3.
Po zbere potrebné spracovanie - sérum sa oddelí odstredením3.
Skúšobný objem - minimálne 0,5 ml ser3.
Vyskúšajte stabilitu - separované sérum je stabilné 7 dní pri 2-8 ° C; dlhá doba pri -20 ° C3.
Metóda a interpretácia výsledkov
Metóda - imunochémia s chemiluminiscenčnou detekciou (CLIA) 3.
Referenčné hodnoty - 4,3-29 IU/L3.
Interpretácia výsledkov
V prípade polycythemia vera sú hodnoty EPO nízke alebo na dolnej hranici referenčného rozsahu, zatiaľ čo v sekundárnych formách sú vysoké.
U pacientov s anémiou spojenou s chronickým zlyhaním obličiek sú veľmi nízke hodnoty EPO v porovnaní so stupňom anémie, ktorá je dôsledkom neschopnosti postihnutej obličky produkovať erytropoetín. Odmietavé záchvaty u pacientov po transplantácii obličky sú tiež sprevádzané zníženým obsahom erytropoetínu3.
U pacientov s anémiou z nedostatku železa, talasémiou alebo zlyhaním miechy sú zaznamenané vysoké hodnoty EPO4.
Zvýšené hladiny erytropoetínu môžu byť spôsobené nádormi obličiek, ktoré produkujú EPO, alebo ktoré blokujú lokálny prietok krvi tvorbou hypoxie bez anémie alebo všeobecnej hypoxie3.
Pacienti, ktorí zle alebo vôbec nereagujú na liečbu erytropoetínom a ktorých sérové hladiny EPO sú normálne alebo dokonca zvýšené, môžu mať ďalšie nerozpoznané príčiny anémie. Ak však nemožno identifikovať žiadny iný faktor, bude sa brať do úvahy možnosť vývoja anti-EPO protilátok. Tento stav môže mať vážne klinické následky s rizikom dreňovej aplázie červenej série4.
Limity a interferencie
Niektorí pacienti s polycytémiou vera majú normálnu hladinu erytropoetínu v sére.
Tento test neumožňuje rozlišovať medzi endogénnym a exogénne podávaným EPO4.
• Drogy
klesá: acetazolamid, amfotericín B, cisplatina, enalapril, furosemid, teofylín.
zvyšuje: anabolické steroidy, daunorubicín, erytropietín, fluoxymesterón, hydroxymočovina, teofylín, zidovudín.
• Analytické interferencie
Heterofilné protilátky prítomné v sére pacientov môžu interagovať s imunoglobulínmi obsiahnutými v komponentoch súpravy a meniť výsledky3.