Herpes vírus (Herpes - vírus) DNA typu 12 v krvi - Synevo
Všeobecné informácie
Typy 1 a 2 vírusu herpes simplex (HSV-1, HSV-2) sú zodpovedné za širokú škálu stavov, od kožných infekcií slizníc až po infekcie CNS a občasné infekcie vnútorných orgánov, z ktorých niektoré môžu byť smrteľné. HSV-1 je spájaný hlavne s infekciami očí a úst, zatiaľ čo HSV-2 spôsobuje genitálne lézie.
Aj keď HSV-1 a HSV-2 sú najbližšími herpesvírusmi, sú to odlišné sérologické a genetické entity.
Genóm HSV má dvojvláknovú lineárnu štruktúru DNA; Molekula DNA je zložená z dvoch jedinečných domén, L (dlhá) a S (krátka), kovalentne spojených. Medzi 2 typmi herpes vírusu je sekvenčná homológia 50%. Typovo špecifické oblasti sú dôležité pre imunitnú odpoveď hostiteľa 3 .
HSV je rozšírený všadeprítomne; väčšina populácie (> 80%) má anti-HSV protilátky, čo naznačuje veľmi časté vystavenie tomuto vírusu. Prenos sa uskutočňuje v úzkom kontakte s infikovanými ľuďmi (najčastejšie slinami a pohlavnými sekrétmi). Matky s aktívnymi léziami počas pôrodu môžu tiež prenášať infekciu na nenarodené 3; 6 .
Klinický obraz a vývoj infekcií HSV závisia od postihnutej anatomickej oblasti, veku a imunitného stavu hostiteľa, ako aj od antigénneho typu vírusu. .
Primárna infekcia (primárna infekcia) môže byť často asymptomatická; súčasne obidva vírusové typy môžu spôsobiť genitálne a orofaciálne infekcie. Závažné prípady primárnej infekcie sú sprevádzané systémovými príznakmi a prejavmi spojenými s poškodením slizníc aj extramukóznych oblastí, ktoré majú vyššiu mieru komplikácií a dlhšie trvanie klinických prejavov.
Opakovaná infekcia spočíva v epizodickom opätovnom objavení sa príznakov na území predtým postihnutom prvou infekciou. Klinická expresia recidívy je menej závažná ako pri primárnej infekcii. Frekvencia reaktivácie je ovplyvnená anatomickou oblasťou a typom vírusu.
Gingivostomatitída a faryngitída sú najbežnejšími klinickými prejavmi primárnej infekcie HSV-1. Pre keratokonjunktivitídu sú charakteristické hnisavé očné sekréty, vyrážky na močovom mechúre, ulcerácia rohovky, ktoré môžu v závažných prípadoch viesť až k slepote.
Eczema herpeticum je vážna forma superinfekcie HSV u ľudí s ekzémami alebo inými dermatologickými stavmi.
V prípade genitálneho oparu je priemerný vek výskytu u oboch pohlaví 20 - 24 rokov. Vezikulo-ulceratívne lézie sa nachádzajú na vulve, vagíne, krčku maternice u žien, penisu u mužov a v perianálnych alebo análnych oblastiach. Medzi komplikácie genitálneho herpesu patrí meningizmus (28% prípadov) a aseptická meningitída (5% prípadov) 3; 4; 6 .
Novorodenci získavajú infekciu HSV kontaktom s infikovanými sekrétmi, najčastejšie počas pôrodu. 90% novorodeneckého oparu je stiahnutých perinatálne, 5 - 8% je vrodených a niektoré prípady sa získajú postnatálne kontaktom s členmi rodiny alebo zdravotníckym personálom, ktorí majú symptomatickú alebo asymptomatickú orolabiálnu infekciu HSV-1. 70% prípadov neonatálneho oparu je spôsobených HSV-2 a väčšinou sa získa počas pôrodu. Vrodený herpes je takmer vždy spôsobený primárnymi infekciami matky ako s HSV-1, tak s HSV-2; postihnutí novorodenci majú mikrocefáliu, hydrocefalus a chorioretinitídu 3; 5; 6 .
Pokiaľ ide o syndrómy CNS, primárna alebo rekurentná infekcia HSV-1 je prevažne spojená s herpetickou encefalitídou; Medzi syndrómy CNS spojené hlavne s infekciou HSV-2 patrí meningitída, rekurentná aseptická meningitída (Mollaretova choroba) a neonatálna meningoencefalitída. Zavedenie testov PCR, ktoré detegujú HSV-DNA v mozgovomiechovom moku, identifikovalo mierne alebo atypické formy herpetickej encefalitídy, ktoré sa spočiatku pripisovali iným vírusom. Tiež detekcia HSV-DNA v mozgovomiechovom moku stanovila diagnózu a etiologickú úlohu HSV-1 pri encefalitíde mozgového kmeňa, myelitíde, multifokálnej alebo difúznej encefalitíde bez ovplyvnenia spánkového laloku u detí, novorodeneckej encefalitíde 2 .
Diseminovaná infekcia HSV sa prejavuje mnohonásobnými vezikulami na veľkých plochách kmeňa a končatín; je zriedkavou komplikáciou primárneho kožného oparu na sliznici. Kožné rozšírenie sa zvyčajne vyskytuje v počiatočných štádiách ochorenia a je často spojené s aseptickou meningitídou, hepatitídou alebo pneumóniou. Medzi ďalšie komplikácie primárnej infekcie HSV-2 patria: monoartritída, trombocytopénia, nekróza nadobličiek a myoglobinúria. Tehotenstvo môže tiež predisponovať k rozšíreným viscerálnym infekciám 3 .
Imunokompromitovaní pacienti majú zvýšené riziko vzniku závažných infekcií HSV. V dôsledku rozsiahlych kožných infekcií sa HSV môže šíriť do vnútorných orgánov, ako sú pečeň, pľúca, nadobličky, kostná dreň a gastrointestinálny trakt. Viscerálne šírenie je výsledkom virémie 1; 3 .
Pre stanovenie diagnózy infekcie HSV sú nevyhnutné klinické kritériá. Vzhľadom na vplyv diagnostikovania celoživotnej sexuálne prenosnej choroby by však mala správna starostlivosť o pacienta zahŕňať laboratórne potvrdenie. Najlepšou metódou na potvrdenie infekcie HSV je rýchla detekcia HSV-DNA v produktoch odobratých z lézií in situ hybridizáciou alebo technikami PCR. Detekcia vírusovej DNA je 3-4 krát citlivejšia ako izolácia vírusu v kultúre 3 .
Odporúčania pre stanovenie HSV - DNA - diagnostika infekcií HSV; takže:
- HSV - DNA v krvi: včasná detekcia infekcií HSV so zvýšeným potenciálom šírenia, najmä u jedincov s oslabenou imunitou (virémia HSV je prechodným javom u malého počtu pacientov s genitálnou infekciou, ale môže byť dôležitá pri vzniku rozšíreného ochorenia); včasná diagnostika diseminovanej neonatálnej infekcie 1; 4 .
- HSV - DNA v lézii: diferenciálna diagnostika kožných lézií, najmä v prípade atypických aspektov; v prípade genitálneho oparu metóda PCR detekuje HSV-DNA aj v neskorých obdobiach vývoja lézií 3; 4; 5; 6 .
- HSV - DNA v mozgovomiechovom moku: diagnostika syndrómov CNS spojených s HSV (senzitivita a špecificita> 95% pre meningitídu, rekurentnú aseptickú meningitídu Mollaret’s, neonatálnu meningoencefalitídu, diseminované ochorenie); je metóda „zlatého štandardu“ na diagnostiku infekcií CNS 2; 5 .
Výcvik pacientov - nevyžaduje sa 4 .
Odobratý exemplár - a) príde krv; b) produkt odobratý z lézie suchým tampónom; c) mozgovomiechový mok odobratý lumbálnou punkciou 4 .
Zberová nádoba - a) vacutainer obsahujúci EDTA ako antikoagulant; b) nárazník bez transportného média; c) sterilná nádoba 4 .
Zozbierané množstvo - a) toľko, koľko umožňuje vákuum; c) minimálne 2 ml 4 .
Po zbere potrebné spracovanie - a), c) dôkazy nie bude odstredený 4 .
Príčiny odmietnutia dôkazov - a) staré, zrážané, hemolyzované vzorky; použitie heparínu ako antikoagulancia 4 .
Vyskúšajte stabilitu - vzorky krvi z lézie alebo mozgovomiechového moku sú stabilné 1 týždeň pri 2-4 ° C 4 .
Metóda - PCR v reálnom čase Light-Cycler: reťazová polymerizačná reakcia s detekciou nahromadeného produktu PCR v reálnom čase, meraním emitovanej fluorescencie (kvalitatívny test); test rozlišuje medzi HSV-1 a HSV-2 4 .
Referenčné hodnoty
Detekčný limit
Interpretácia výsledkov
Detekcia HSV-DNA v rôznych patologických produktoch podporuje klinickú diagnostiku infekcie spôsobenej týmto vírusom 5 .
Detekcia virémie koreluje s vírusovým rozšírením u imunokompetentných aj imunokompromitovaných jedincov a je spojená so zvýšenou mierou úmrtnosti 1 .
Pri herpetickej encefalitíde sa HSV-DNA dá obvykle zistiť v mozgovomiechovom moku ihneď po objavení sa neurologických symptómov a zostáva pozitívna aj v prvom týždni antivírusovej liečby 2. HSV-DNA nie je detekovaná v mozgovomiechovom moku pacientov, ktorí nemajú infekciu CNS spôsobenú vírusom 5 .
Limity a interferencie
Negatívny výsledok nevylučuje možnosť infekcie HSV, najmä na úrovni CNS 5 .
1. Berrington William R a kol. Klinické koreláty vírusu herpes simplex vírusu u hospitalizovaných dospelých. In Clinical Infection Diseases, 2009, roč. 49, č. 9, 1295 - 1301. V HERPES 11 dodatok 2, 2004.
2. Guy Boivin. Diagnóza herpetických vírusových infekcií centrálneho nervového systému.
3. Joshua T. Schiffer. Vírus herpes simplex. In Mandell, Douglas, and Bennett’s Principles and Practice of Infectious Diseases, 7. vydanie, Churchill Livingstone, Elsevier, 2010, 1943-1955.
4. Laboratórium Synevo. Konkrétne odkazy na použitú technológiu spracovania 2015. Typ odkazu: katalóg.
5. Klinika Mayo. Mayo Medical Laboratories. Test Catalog Herpes Simplex Virus (HSV), Molecular Detection, PCR. www.mayomedicallaboratories.com. Typ odkazu: Internetová komunikácia.
6. Michael Costello, Margaret Yungbluth. Vírusové infekcie. In Henry’s Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods, Saunders-Elsevier, 21. vydanie, 980-989.