Kalprotektín vo výkaloch; Ústredná vojenská pohotovostná fakultná nemocnica Dr.
Kalprotektín vo výkaloch
Všeobecné informácie
Pacienti s prejavmi dolného zažívacieho traktu (bolesti brucha, zmeny v črevnom prechode) často vyžadujú početné vyšetrenia, aby sa odlíšili funkčné poruchy (syndróm dráždivého čreva) od organických stavov (zápalové ochorenie čriev, nádory).
Teoreticky by získanie negatívnych výsledkov u reaktantov akútnej fázy (CRP-C-reaktívny proteín, ESR) malo s najväčšou pravdepodobnosťou vylúčiť organické podmienky; Štúdie však ukázali, že CRP aj ESR nie sú veľmi presnými markermi na rozlíšenie syndrómu dráždivého čreva od organických chorôb zažívacieho traktu1. Vermeire a kolegovia teda preukázali, že ulcerózna kolitída má často zníženú alebo chýbajúcu odpoveď CRP, pretože existuje aktívny zápalový proces.
Vysvetlenie tohto nálezu by mohlo súvisieť so skutočnosťou, že testy ako ESR, CRP, orosomukoid, počet leukocytov a krvných doštičiek, interleukín-6, interleukín-1-beta, faktor nekrózy nádorov (TNF alfa), ktoré odrážajú systémové následky zápalu, sú nešpecifické a nemeria priamo črevný zápal. Pacienti s diagnostikovaným zápalovým ochorením čriev môžu podstúpiť bežné zápalové testy a na druhej strane môžu byť tiché formy ochorenia spojené so zvýšenými hodnotami.
Vzhľadom na vyššie uvedené pozorovania sa pokúsil o alternatívny prístup k tomuto problému a bolo potrebné uchýliť sa k hodnoteniu črevného zápalu analýzou bielkovín získaných z neutrofilov, ako je kalprotektín a laktoferín, vo výkaloch.
Kalprotektín je dôležitou súčasťou cytoplazmy polymorfonukleárnych granulocytov (PMN), takže tento neglykozylovaný proteín predstavuje až 60% proteínov rozpustených v cytozole granulocytov. Najprv ho izoloval z granulocytov Fagerhol a nazval ho proteínom L1; neskôr bol premenovaný na kalprotektín kvôli jeho intracelulárnym vlastnostiam viazania vápnika, pravdepodobne s úlohou chrániť bunku pred vlastnými katalytickými a bakteriálnymi enzýmami4. Taktiež dôsledkom väzby na zinok má priamy antibakteriálny účinok deaktiváciou životne dôležitých mikrobiálnych enzýmov a indukciou apoptózy. Kalprotektín má teda regulačnú funkciu v zápalovom procese a má antimikrobiálne aj antiproliferatívne vlastnosti. Uvoľňuje sa v lúmene čreva v čase aktivácie leukocytov alebo v dôsledku ich degradácie. Diagnostické využitie fekálneho kalprotektínu pre širokú škálu črevných porúch skúmalo niekoľko skupín výskumníkov s veľmi dobrou zhodou výsledkov.
Podľa štúdie pri hraničnej hodnote 50 μg/g výkalov má test na kalprotektín vo výkaloch pozitívnu prediktívnu hodnotu 85%, negatívnu prediktívnu hodnotu 68%, senzitivitu 100% a špecificitu 92%. Tieto údaje naznačujú, že stanovenie fetálneho kalprotektínu je možné použiť ako skríningový test na odlíšenie syndrómu dráždivého čreva od organického ochorenia, pretože hladiny kalprotektínu sú u pacientov so zápalovým ochorením čriev a kolorektálnym karcinómom zriedka normálne.
Pokiaľ ide o sledovanie pacientov so zápalovým ochorením čriev, niekoľko štúdií dokumentuje význam fekálneho kalprotektínu ako neinvazívneho markera na hodnotenie zápalovej aktivity. V štúdii, ktorá zahŕňala deti so zápalovým ochorením čriev, teda koncentrácia kalprotektínu vo výkaloch významne korelovala so stupňom makroskopického rozšírenia a závažnosťou zápalu hrubého čreva a normalizácia tohto markera naznačila úplné zahojenie sliznice.
Ďalšia štúdia hodnotila úlohu fekálneho kalprotektínu ako prediktívneho markera klinických relapsov u pacientov so zápalovým ochorením čriev. Pretože u významného počtu pacientov v klinickej remisii so zvýšeným obsahom kalprotektínu dôjde k relapsu do 1 roka, usúdilo sa, že stanovenie tohto markera môže byť užitočné pri identifikácii pacientov (s ulceróznou kolitídou alebo Crohnovou chorobou s ochorením hrubého čreva) s vysokým rizikom relaps choroby.
Odporúčania pre stanovenie fekálneho kalprotektínu
-odlíšenie pacientov so syndrómom dráždivého čreva od pacientov so zápalovým ochorením čriev;
-triedenie pacientov s brušnými príznakmi, ktoré si vyžadujú invazívne vyšetrenia;
-stanovenie stupňa aktivity ochorenia, štádia hojenia slizníc a rizika relapsu u pacientov so zápalovým ochorením čriev;
-sledovanie odpovede na liečbu detí so zápalovým ochorením čriev; U tejto kategórie pacientov je invazívny zákrok často náročný a vyžaduje si celkovú anestéziu.
zbierka
Výcvik pacientov - je potrebné sa vyhnúť podávaniu nesteroidných protizápalových liekov 2 dni pred zberom.
Odobratý exemplár - čerstvé výkaly spontánne vylučované kedykoľvek počas dňa.
Zberová nádoba - jednorazová nádoba na dobre uzavreté výkaly s vekom; pridávanie konzervačných látok je zakázané.
Objem vzorky - asi 2 g.
Vyskúšajte stabilitu - 7 dní pri 2 - 8 °.
Metóda a interpretácia výsledkov
Metóda - ELISA.
Referenčné hodnoty - sú závislé od veku a pohlavia:
Interpretácia výsledkov
Negatívny výsledok u pacientov, ktorí spĺňajú rímske kritériá pre syndróm dráždivého čreva, s najväčšou pravdepodobnosťou vylučuje (> 99%) organický stav.
Fekálny kalprotektín je priamym meradlom črevného zápalu a koreluje s aktivitou ochorenia u pacientov so zápalovým ochorením čriev. Kalprotektín je teda črevným ekvivalentom rýchlosti sedimentácie erytrocytov.
Zvýšené hladiny kalprotektínu vo výkaloch môžu byť spôsobené zápalovými ochoreniami čriev, infekciami, polypmi, neoplastickými procesmi alebo podávaním nesteroidných protizápalových liekov.
V nasledujúcej tabuľke je uvedená interpretácia výsledkov podľa hodnôt získaných u detí> 6 rokov a dospelých:
Hodnota kalprotektínu vo výkaloch (µg/g)
Interpretácia výsledku
Výsledok nenaznačuje prítomnosť zápalu gastrointestinálneho traktu.
Výsledok naznačuje mierny zápal gastrointestinálneho traktu; zápalová reakcia môže byť spôsobená infekciou, potravinovou alergiou alebo konzumáciou nesteroidných protizápalových liekov.
Výsledok naznačuje významný zápal gastrointestinálneho traktu spojený so zápalovým ochorením čriev, infekciami, konzumáciou nesteroidných protizápalových liekov, polypmi, adenómami alebo kolorektálnym karcinómom. Na zistenie príčiny zápalu je potrebné ďalšie vyšetrenie.
Okrem vyššie uvedeného komentára: u pacientov so zápalovým ochorením čriev tento výsledok naznačuje obdobie aktivity ochorenia spojené so zápalom sliznice. U pacientov so zápalovým ochorením čriev v klinickej remisii naznačuje tento výsledok zvýšené riziko relapsu do 1 roka.