Laboratórium; Stav moču

Stavom moču je bežné vyšetrenie zloženia moču kvalitatívnymi detekčnými metódami a ak je to potrebné, ďalšími kvantitatívnymi stanoveniami.

Normálne vlastnosti moču

Chemické zloženie moču sa veľmi líši v závislosti od množstva a typu potravy. Vylučovanie niektorých látok tiež podlieha dennému a nočnému rytmu, takže stanovenie denného vylučovania sa musí vykonať pri 24-hodinovom odbere moču.

farba: Svetložltá až tmavo žltá v závislosti od koncentrácie moču.

červenkastý (hemoglobín)
hnedočervená (urobilinogén, porfyríny)
hnedožltá - nazelenalá (biliverdín, bilirubín)

Zmena farby moču je často spojená s chorobami pečene a žlčových ciest, ale môže to byť tiež spôsobené liekmi alebo niektorými potravinami.

Čerstvý moč by mal byť čistý, môže dôjsť k zakaleniu

Zrážanie slabo rozpustných solí (CaPO4 alebo CaCO3)
Bunky alebo baktérie (patologické!)

Bielkoviny sa nikdy nezrazia v čerstvom moči (kyselina močová!). V staršom moči, prípadne denaturovanom, nerozpustné bielkoviny môžu mať za následok zakalenie alebo zrážanie.

Objem a špecifická hmotnosť:

Pri celkovom príjme vody 2 litre (1 liter nápojov + 1 liter tuhej stravy obsahujúcej vodu) sa obličkami vylúči 1 - 1,5 litra. 1 liter moču váži 1002 - 1036 g, v závislosti od jeho koncentrácie. Objem a špecifická hmotnosť sa musia meniť v opačnom zmysle, to znamená, že nízka špecifická hmotnosť znamená veľký objem moču a naopak. Špecifická hmotnosť 1026 s denným objemom 2,5 litra preto nie je normálna a naznačuje vylučovanie látok, ktoré sa zvyčajne v moči nenachádzajú (osmotická diuréza!).
Meranie sa vykonáva pomocou aerometra.

Reakcia moču (hodnota pH):

Normálny moč má zvyčajne mierne kyslú reakciu (fyziologický rozsah pH 4,5 - 8). Ani v prípade metabolickej acidózy hodnota pH neklesne pod 4,5, pretože zvýšené množstvo vylučovaných protónov je tlmené NH3 a fosfátom.

Močový sediment:

Močové sedimenty sa získavajú odstredením čerstvého moču. Normálny sediment obsahuje 0-3 leukocyty a 0 erytrocytov na jedno zorné pole, niektoré bunky epitelu, často kryštály solí alebo kryštály kyseliny močovej a uráty (sediment sfarbený do červena porfyrínmi a urochrómami).
Močové sedimenty by naopak nemali obsahovať žiadne baktérie (infekcie močových ciest!) Alebo príliš veľa buniek.

Zloženie moču:

Voda 95-99%, pevné látky 1-5%
Organické látky: - Močovina (20 - 40 g) - Metabolizmus aminokyselín
- Kyselina močová (1 g) - metabolizmus purínov
- Kreatinín (1-2 g) - metabolizmus svalov
- Kreatín (stopový)
- Aminokyseliny (stopy)
- Bielkoviny (stopy)
- Glukóza (stopová)
- Galaktóza (nedetegovateľná)
- Laktóza (neskoro v tehotenstve a počas dojčenia)
- Prekurzory hemu a degradačné produkty

Anorganické látky: Elektrolyty (Cl-, Na +, K +, Ca2 +, Mg2 +, NH3

Patologické zložky moču

Najčastejšie patogény spôsobujúce infekcie močových ciest, vrátane E. coli, redukujú dusičnany (NO3-) prítomné v moči na dusitany (NO2-). Pozitívny dusitanový test je preto známkou infekcie močových ciest.

Proteinúria je častým, ale nešpecifickým príznakom pri ochoreniach obličiek. Pri poškodení tubulárnych reabsorpčných mechanizmov sa v moči objavujú najmä malé bielkoviny. Na druhej strane môže byť reabsorpčná kapacita tubulov ohromená, napríklad ak sa po svalovej traume objaví v plazme veľké množstvo myoglobínu. Ak sú glomeruly poškodené, môže dôjsť k poškodeniu jednej alebo viacerých rôznych glomerulárnych filtračných bariér.
Benígne zvýšené proteinúrie v zdravých obličkách, ktoré sa najlepšie pozorujú do 30. roku života, tvoria až 90% proteinúrií v tejto vekovej skupine (napr. Pri fyzickej námahe, emočnom strese, hypotermii, zahrievaní alebo tehotenstve).
Proteín je možné zistiť v moči rôznymi spôsobmi: zrážaním tepla, zrážaním kyselín, tvorbou farebných komplexov (biuretové činidlo) alebo Coomassie blue (Bradford).

Glukóza a iné cukry:

Limitná koncentrácia v krvnej plazme, nad ktorou je prekročená resorpčná kapacita, je medzi 10 a 12 mmol glukózy na liter. V zriedkavých prípadoch sa môže glukozúria vyskytnúť aj v dôsledku genetického defektu jedného z kotransportérov Na +/glukóza.
Na konci tehotenstva a počas dojčenia sa môže laktóza vylučovať močom.
Ak sa v krvi vyskytne galaktóza alebo fruktóza, tieto dva cukry sa filtrujú v obličkách, ale vstrebávajú sa iba čiastočne.

aminokyseliny:

Voľné aminokyseliny sa nachádzajú vo všetkých telesných tekutinách. V malom množstve sa vylučujú aj močom. Iba pri závažných ochoreniach pečene alebo metabolických chorôb sa jednotlivé aminokyseliny objavujú vo veľkom množstve v moči.

Detekčné reakcie možno rozdeliť do dvoch skupín:

Všeobecné testy (ninhydrínový test)
Špecifické testy pre jednotlivé aminokyseliny

Ketónové telieska:

Ketónové telieska (acetón, acetoacetát a b-hydroxybutyrát) sa vyskytujú v moči pri dlhodobom hladovaní a pri cukrovke.

Bilirubín ako produkt rozkladu hemoglobínu sa zvyčajne vylučuje žlčou ako diglukuronid. Pretože nielen nekonjugovaný, ale aj konjugovaný bilirubín sa ľahko viaže na albumín, bilirubín sa nevylučuje obličkami. Bilirubín diglukuronid je z albumínu vytlačený iba žlčovými kyselinami a vylučuje sa močom, ak z dôvodu choroby veľké množstvo bilirubín diglukuronidu prenikne do krvných kapilár súčasne s žlčovými kyselinami. Pozitívna detekcia bilirubínu v moči je preto vždy znakom ochorenia pečene.

Urobilinogén:

Bilirubín, ktorý vstupuje do žlče žlčou, je baktériami redukovaný na urobilinogén a sterkobilinogén. Väčšina z týchto žlčových pigmentov sa dostane do stolice, malá časť sa vstrebáva a cez portálnu žilu sa vracia do pečene, ktorá - pokiaľ sú pečeňové bunky zdravé a funkčné - zničí väčšinu absorbovaného urobilinogénu alebo sterkobilinogénu alebo sa vráti späť do žlče. vylúčený. Malý zvyšok uro- a sterkobilinogénu, ktorý nechá prejsť pečeňou, sa dostane do obličiek a vylúči sa močom.

Urobilinogén sa čoraz viac vylučuje močom, ak je obmedzená funkčná kapacita pečene (napr. Cirhóza pečene) alebo preťažená (napr. Pri hemolytickej anémii) alebo ak je obídený portálny obeh pečene. Pri úplnej nepriechodnosti žlčových ciest však už viac bilirubínu nedorazí do čreva, urobilinogén sa už nemôže tvoriť a teda sa žiadny urobilinogén vylučuje močom.

Pokusy

Zistenie obsahu redukujúcich cukrov pomocou Benediktovho činidla

Pozor: Disacharidy typu trehalózy (napr. Sacharóza) nereagujú s Benediktovým činidlom, pretože stratili svoje redukčné vlastnosti.

Detekcia bielkovín varením vzorky a detekcia CaPO4 alebo CaCO3

Princíp merania:

Varenie moču denaturuje bielkoviny. Ak sú prítomné bielkoviny, mal by sa objaviť zákal. Táto vzorka nie je dostatočne citlivá na to, aby poskytla pozitívnu reakciu s normálnym obsahom bielkovín v moči. Ak sa moč po varení okyslí, rozpustia sa všetky kryštály CaPO4 alebo CaCO3.

Suchá chémia

Pomocou testovacích prúžkov je teraz možné jednoduchým spôsobom vykonávať nielen kvalitatívne, ale aj kvantitatívne analýzy. Zodpovedajúce reagencie sú na testovacom prúžku (reakčná zóna!) V suchej forme.
Tieto testovacie prúžky sa používajú pravidelne, najmä kvôli stavu moču.

Pokus 1: stav moču pomocou testovacieho prúžku
Experiment 2: Kvantitatívna detekcia glukózy a ALAT (GPT) v krvi (reflektometria!)

Meranie kyseliny močovej v moči

Teoretické základy

Metabloizmus

Pri štiepení DNA a RNA vznikajú puríny a pyrimidíny. Posledne uvedené je možné recyklovať alebo zaviesť do Krebsovho cyklu pomocou acetátu. Organizmus tak môže v malej miere získavať energiu zo štiepenia pyrimidínov oxidáciou v Krebsovom cykle. Puríny sa nedajú metabolizovať rovnakým spôsobom. Sú hydroxylované a vylučované močom ako kyselina močová.
Puríny sú obsiahnuté vo forme DNA v každej bunke (okrem erytrocytov!), A sú tak uvoľňované, keď bunka zomrie. Denne tiež prijímame viac purínov do jedla (napr. Konzumáciou mäsa, rýb, čaju, kaviarne atď.). Tretím zdrojom purínu je endogénna syntéza purínov.
Pri bežnej strave sa väčšina denných purínov recykluje a použije sa na novú syntézu nukleotidov. Koncentrácia kyseliny močovej v sére preto závisí od rýchlosti produkcie alebo eliminácie. Kyselina močová je filtrovaná, reabsorbovaná a vylučovaná v obličkách. Pomer medzi sekréciou a reabsorpciou následne určuje účinnosť vylučovania.

Rozpustnosť v kyseline močovej

U mnohých cicavcov (ale nie u ľudí) prevádza urikáza kyselinu močovú na oveľa rozpustnejší alantoín. Kyselina močová sa vyzráža z hodnoty nasýtenia 400 mmol/l. Hyperurikémia môže viesť k dne, ktorý sa prejavuje usadeninami kryštálov kyseliny močovej v kĺboch, obličkách a iných tkanivách.

Praktický experiment

Princíp merania:

Enzymatické dávkovanie podľa PAP metódy (peroxidáza/para-amino-fenazón).
Kyselina močová sa urikázou premieňa na alantoín, H2O2 a CO2 pri konzumácii O2 a 2 H2O.
Kyselina močová + O2 + 2 H2O ® alantoín + H2O2 + CO2 (urikáza)
Množstvo vytvorenej H2O2 je úmerné koncentrácii substrátu. Redukcia H2O2 na 2 H2O pomocou peroxidázy súvisí s oxidáciou bezfarebnej zmesi, ktorá sčervená. Fotometricky nameraná koncentrácia farbiva je úmerná koncentrácii kyseliny močovej v sére.

Poznámky:

Žena 90 - 360 mmol/l
Muž 150 - 480 mmol/l
Hodnoty sa líšia podľa veku; prístup na
Postmenopauzálne ženy - hodnoty mužov.

1,8 - 3,6 mmol/l/deň (na nízko purínovej diéte)
Pri strave bohatej na puríny alebo pri ochoreniach s rozsiahlou smrťou buniek (leukémia, reumatizmus) sa môže vylučovanie kyseliny močovej prudko zvýšiť.

Hyperurikémia sa vyskytuje až u 20% dospelej populácie. Iba 5% z nich však vykazuje aj príznaky dny. To znamená, že hyperurikémia vedie k dny len v obmedzenej miere.
Rozlišujeme dva typy hyperurikémie:

Primárna hyperurikémia v dôsledku dedičných porúch metabolizmu purínov (biosyntéza alebo eliminácia).
Sekundárna hyperurikémia spôsobená zvýšenou produkciou purínov (leukémia, nádor), zníženým vylučovaním kyseliny močovej (renálna insuficiencia, intoxikácia alebo užívanie liekov) alebo nadmerným príjmom purínov s jedlom.

Meranie α-amylázy v sére a moči

Teoretické základy

Rezervné polysacharidy

V rastlinnej ríši je škrob najdôležitejším rezervným polysacharidom, v živočíšnej ríši glykogén. Oba pozostávajú z dlhých, rozvetvených reťazcov glukózy. Škrob existuje vo forme amylózy (rozpustnej vo vode, málo rozvetvenej) alebo vo forme amylopektínu (zle rozpustného, rozvetveného).
U ľudí sa glykogén vyskytuje predovšetkým v pečeni a svaloch. Jeho koncentrácia priamo závisí od energetickej situácie v tele.

a-amylázy

α-amyláza hydrolyzuje a1,4 väzby, čím uvoľňuje maltózu, maltotriózu alebo dlhšie oligosacharidy. Α-amyláza je endo-glykozidáza, pretože môže atakovať a štiepiť glykogén nielen na koncových častiach, ako je exo-glykozidáza, ale aj medzi nimi. Syntetizuje sa hlavne v exokrinných žľazách pankreasu a v slinných žľazách. Amylázu tvoria aj pečeň, tenké črevo, obličky a rôzne karcinómy.
Nízka koncentrácia α-amylázy v krvi je 40% z pankreasu. Ich prítomnosť je spojená s chybnou bazolaterálnou sekréciou buniek pankreasu. Rozlišujeme dva izoenzýmy: pankreatická a exo-pankreatická α-amyláza (inhibícia monoklonálnymi protilátkami!)
α-amyláza je filtrovaná v obličkách (malá molekulová hmotnosť!), ale časť z nich je opäť reabsorbovaná.

Praktický experiment

Princíp merania:

Ako substrát sa používajú syntetické oligosacharidy, ktoré boli predtým označené paranitrofenolom. Na ochranu substrátu pred a-glukozidázou je terminálny cukor substituovaný na hydroxylových skupinách C4 a C6. Len čo a-amyláza prvýkrát rozreže substrát, prebytok a-glukozidázy môže potom substrát ďalej štiepiť a tým uvoľniť paranitrofenol, čo sa dá merať fotometricky.
Rýchlosť, ktorou sa paranitrofenol uvoľňuje, je priamo úmerná koncentrácii a-amylázy, pretože tak substrát, ako aj α-glukozidáza sú prítomné v prebytku.

Meranie absorpcie po dobu 5 minút v intervaloch 1 minúty.
ΔE/min = priemerné zvýšenie koncentrácie v lineárnom rozmedzí
U (mmol/min) = DE/min x 1135 (na liter séra)

Medzné hodnoty:

Stabilita substrátu a enzýmov je obmedzená. Meranie je iba lineárne medzi 5 a 2 000 U/l.

Referenčné hodnoty:

Referenčné hodnoty závisia od použitého substrátu, typu maskovania koncového cukru a reakčnej teploty. Preto neexistujú absolútne štandardné hodnoty.

Sérové hodnoty: do 50 U/l
Hodnoty moču: až 290 U/l

Meranie koncentrácie a-amylázy v sére a v moči slúži na detekciu poruchy pankreasu. Pankreatitída je akútny zápal pankreasu spôsobený zneužívaním alkoholu alebo obštrukciou žlčových ciest.

Pri akútnej pankreatitíde (lézii bunkovej membrány) je znížená epiteliálna bariéra buniek žľazy. Tesné križovatky sa stávajú priepustnými. Α-amyláza sa dostáva do krvi a čoraz viac sa vylučuje močom. Avšak iba 75% pacientov s akútnou pankreatitídou vykazuje zvýšenú koncentráciu α-amylázy v krvi. Na druhej strane, vylučovanie močom je (takmer) vždy zvýšené, pretože pri pankreatitíde je inhibovaná tubulárna reabsorpcia a vylučuje sa viac α-amylázy (zvýšený klírens α-amylázy!).
Postakútne zníženie koncentrácie α-amylázy v krvi môže naznačovať nekrózu pankreasu alebo vyliečenú pankreatitídu.

Ak sú slinné žľazy zapálené (napr. Príušnice), zvyšuje sa tiež koncentrácia α-amylázy v krvi. Pre diferenciálnu diagnostiku je možné inhibovať buď pankreatickú alebo exopankreatickú α-amylázu. Okrem toho sa pri pankreatitíde vo vysokej koncentrácii v krvi nachádzajú aj ďalšie pankreatické enzýmy.

Nové články

Citrátový cyklus: Takmer všetky katabolické metabolizmus-
procesy vedú k aktivovanej kyseline octovej, acetyl-CoA. Vzniká z pyruvátu, ktorý pochádza z glykolýzy, pri b-oxidácii mastných kyselín, ako aj pri odbúravaní mnohých aminokyselín. [ďalej]

Aktivita sérových enzýmov: Meranie aktivity enzýmov je dôležitým nástrojom na detekciu a monitorovanie mnohých chorôb-
podmienky. Pri ochoreniach pečene, srdca a pankreasu sú výsledkom enzýmov-
predpisy sú často nevyhnutné. [ďalej]

pečeň: Absorpčná fáza: vstrebávanie potravy-
látky, vitamíny a elektrolyty.
(Varovanie: lipidy vstupujú do tela hrudným potrubím - chylomikróny!). Fáza hladu: vzpriamená-
udržiavanie stáleho vnútorného prostredia. [ďalej]