Medullogram alebo cytologické vyšetrenie kostnej drene Medlife

Cytologické vyšetrenie dreňového aspirátu spolu s dreňovou biopsiou predstavuje nevyhnutné vyšetrenie pri hematologickej diagnostike. Medulogram sa robí, keď klinické údaje, hemoleukogram, morfologické vyšetrenie krvného náteru alebo iné laboratórne testy naznačujú možnosť primárneho alebo sekundárneho hematologického ochorenia a morfologický rozbor drene. môže podporiť diagnózu.

medullogram

Mikroskopické vyšetrenie sa spočiatku robí v hodnote asi 10x/20x pre:

-ocenenie kvality náteru (prítomnosť gruntov, kvalita zafarbenia, prítomnosť artefaktov),

-hodnotenie celulárnosti (pomer tukových buniek)

- prítomnosť megakaryocytov, myelomatóznych buniek, žírnych buniek

-prítomnosť osteoblastov/osteoklastov, skupín nádorových buniek (zhlukov)

-prítomnosť Gaucherových buniek, Niemann-Pick, histiocyty s inklúziami „modré ako more“, granulómy.

-sú identifikované oblasti rozdrvenia dreňových chrupaviek (centrum”), Oblasti Intermedia s bohatou bunkovosťou, v ktorej sa dreňové bunky javia izolované alebo zoskupené na krvotvorných ostrovoch (zachovávajúc do istej miery architektonickú štruktúru drene) a oblasti periférne, s menším počtom buniek (zriedením). V pediatrických prípadoch sa kostná dreň javí ako rovnomerná disperzia buniek.

Následné vyšetrenie náteru s cieľom 100x ponorením sa urobí na asi 300 - 500 neporušených bunkách z medzilehlých oblastí [1]

Cytologické vyšetrenie dreňového aspirátu zahŕňa:

  • Hodnotenie celulárnosti: zhodnotenie objemu dreňových buniek v porovnaní s inými zložkami buniek kostnej drene (napr. Tukovými bunkami). Zlatým štandardom pre hodnotenie bunkovosti je biopsia kostnej drene. V dreňovom aspiráte je bunková bunkovosť zriedená periférnou krvou odsávanou súčasne s dreňovou šťavou, pričom je vždy nižšia v porovnaní s bunkovou hodnotou indikovanou biopsiou u rovnakého pacienta.
  • Pomer G/E: pomer medzi bunkami myeloidnej (G) a erytroidnej (E) série; sa počíta na vyhodnotenie relatívnej bunkovitosti dvoch hlavných bunkových línií. Normálnym pomerom je normálny pomer medzi 2: 1 a 4: 1. Nízky pomer G/E môže znamenať hypopláziu série granulocytov alebo hyperpláziu série erytrocytov.
  • Vyhodnotenie krvotvorných sérií z morfologického a maturačného hľadiska s cieľom uviesť semikvantitatívny výsledok;
  • Identifikácia abnormálnych buniek (leukemických alebo nádorových buniek)
  • Zvýraznenie abnormálnych makrofágov v lipidóze: Gaucherova bunka, Niemann-Pickova bunka, histiocyty s inklúziami „modré ako more“

Z medulárneho aspirátu je možné vykonať ďalšie testy, ktoré spolu s cytologickým vyšetrením zvyšujú presnosť hematologickej diagnózy [4]:

  • imunofenotypizácia
  • Genetická analýza chromozómov
  • FISH test (fluorescenčná in situ hybridizácia)
  • Ďalšie testy genetickej a molekulárnej biológie (mutácia JAK2, BCR-ABL atď.)

Najkonzistentnejšou časťou morfologického vyšetrenia je vyhodnotenie krvotvornej série z morfologického a maturačného hľadiska, aby bolo možné semikvantitatívne podať správu:

Vyhodnotenie erytropoézy (séria erytrocytov)

Prekurzory erytrocytov sú: proerytroblast (pronormoblast), bazofilný erytroblast (normoblast), polychromatofilný erytroblast (normoblast) a oxyfilný erytroblast (normoblast).
Znížený pomer granulo-erytroblastov (G/E), ktorý je zvyčajne 2/1 - 4/1, sa nachádza v erytroidnej hyperplázii (zvýšený počet medulárnych prekurzorov erytroidu), ktorá sprevádza rôzne typy anémie (anémia z nedostatku železa, megaloblastická anémia, sideroblastická anémia)., talasémia). Pomer je možné označiť ako nízky a dokonca reverzný pri regeneračných anémiách (posthemoragických/hemolytických). Zvýšený pomer G/E naznačuje buď hyperpláziu série granulocytov alebo erytroblastopéniu.
Výskyt polychromatofilných foriem (

50%) a oxyfilné látky (> 30%) naznačujú normálne dozrievanie červenej série. Zvýšenie percenta bazofilných erytroblastov (> 5 - 20%) naznačuje nedostatok hemoglobinizácie (z anémie z nedostatku železa, závažných megaloblastických anémií).

  • Proerytroblast je veľká, okrúhla bunka, ktorá má priemer 15 - 20 um. Jadro zaberá takmer celú bunku. Chromatín je usporiadaný v jemnom retikulárnom obrazci, ale je zafarbený intenzívnejšie ako myeloblastový chromatín. Jadierka sú prítomné, ale je ťažké ich pozorovať. Cytoplazma je bazofilná, intenzívnejšia ako cytoplazma myeloblastu.
  • Bazofilný erytroblast je menší ako proerytroblast, s jadrom, ktoré zaberá menej cytoplazmy, chromatínový obrazec sa začína organizovať do blokov, cytoplazma je tmavomodrá.
  • Polychromatofilný erytroblast je menší ako predchádzajúci, s jadrom usporiadaným do zrejmých blokov chromatínu a cytoplazma je vďaka obsahu syntetizovaného hemoglobínu sivá alebo sivoružová.
  • Oxyfilný erytroblast je o niečo väčší ako zrelý erytrocyt. Jadro je malé, pyknotické. Cytoplazma je červenkastá, rovnako ako zrelý erytrocyt.

Vyhodnotenie granulopoézy (série myeloidných alebo granulocytov)

Prekurzory granulocytov sú: myeloblast, promyelocyt, neutrofilný/eozinofilný/bazofilný myelocyt a metamyelocyt spolu so zrelými nesegmentovanými a segmentovanými neutrofilnými/eozinofilnými/bazofilnými formami. Myeloidné bunky sú prevládajúcim prvkom v kostnej dreni, pričom najpočetnejšie sú zrelé bunky.

Vyhodnotenie megakaryopoézy (megakaryocytová séria)

Prekurzory megakaryocytov sú: megakaryoblast, promegakaryocyt (10% - 15% z celkového počtu), netrombocytogénny megakaryocyt (60-70%) a trombocytogénne megakaryocyty (10-20%). Megakaryocyty sú veľmi veľké bunky (30 - 150 um), polyploidné (8N, 16N, 32N atď.). Promegakaryocyty majú intenzívne bazofilnú cytoplazmu (zvýšený počet ribozómov) a jadro je neobývané a má mladý vzhľad. Netrombocytogénne megakaryocyty majú vďaka granuláciám rubínovo červenú cytoplazmu a jadro je nepravidelné s rôznym počtom lalokov. Trombocytogénne megakaryocyty majú cytoplazmu s kvázi zoskupenými granulami v budúcich krvných doštičkách, majú krvné doštičky susediace s ich perifériou a jadro je menšie a hustejšie. Megakaryocyty sú zvyčajne najmenej zastúpeným bunkovým typom v kostnej dreni

Ostatné bunkové prvky normálny nález pri aspirácii miechy:

monocyty sú morfologicky identické s tými v periférnej krvi. Promonocyty majú jemnejší chromatín, viditeľné jadierka a niekoľko granulácií v bazofilnej cytoplazme.

Makrofágy (histiocyty) pochádza z monocytov, ale majú priemer väčší 20 - 30 μm. Jadro je oválne s jemným chromatínovým vzorom a s jedným alebo dvoma malými jadierkami. Cytoplazma je modrošedá alebo bezfarebná a často obsahuje fagocytárne bunky, bunkové zvyšky a vakuoly.

lymfocyty sú podobné ako na periférii, rôzneho počtu, v závislosti od stupňa kontaminácie materiálu vyšetrovaného periférnou krvou.

plazmocyty majú premenlivú veľkosť, zvyčajne s priemerom medzi 12 - 16 µm, okrúhle alebo oválne, s malým okrúhlym jadrom umiestneným excentricky. Chromatín je kondenzovaný a usporiadaný do blokov. Cytoplazma je tmavomodrá s jasnou paranukleárnou oblasťou, akoby aura .

stožiar sú ľahko rozpoznateľné podľa obsahu tmavomodrých granúl, ktoré zaberajú celú cytoplazmu pokrývajúcu jadro. Pokiaľ je to viditeľné, jadro má štruktúru vezikulárneho chromatínu.

Osteoklasty a osteoblasty sú bunkové prvky, ktoré sa zriedka vyskytujú v dreni. Častejšie sa vyskytujú u detí alebo ľudí s hyperparatyreoidizmom alebo s určitými nádormi (osteoblastická reakcia).

Osteoklasty sú veľké bunky s priemerom nad 100 um. Môžu byť zamieňané s megakaryocytmi, ale sú viacjadrové, s jemným vzorom chromatínu a viditeľnými jadierkami.

Cytoplazma sa líši od mierne bazofilnej až po intenzívne acidofilnú kvôli obsahu acidofilných granúl.

Osteoblasty sú oválne bunky s priemerom asi 30 um. Vyskytujú sa často v skupinách. Jadro je často výstredné, s rovnomerne distribuovaným chromatínom a 1-3 jadierkami. Cytoplazma je bledomodrá so zreteľnou centrozomálne čírou oblasťou oddelenou od jadra (odlišnou od čírej paranukulárnej oblasti plazmatickej bunky).

Medullogram možno odporučiť v:

  • Vyšetrenie cytopénie (leukopénia, trombocytopénia, bicitopénia alebo pancytopénia) na potvrdenie/vyvrátenie leukémie, myelodysplastického syndrómu, aplázie hypo/miechy, agranulocytózy
  • Nehemolytická anémia, ktorá nebola diagnostikovaná ako anémia z nedostatku železa v dôsledku nedostatku vitamínu B12 alebo folátu alebo talasémie, si vyžaduje vyšetrenie bunkovej bunkovej podstaty.
  • Identifikácia, stanovenie a sledovanie akútnej leukémie
  • Diagnostika a monitorovanie myelodysplastických syndrómov
  • Diagnóza hromadenia: Gaucherova choroba, Niemann-Pickova choroba, histiocytový syndróm „modrý ako more“
  • Vyšetrovanie monoklonálnej gamapatie na diagnostiku mnohopočetného myelómu alebo Waldenströmovej choroby.
  • Diagnóza a štádium malígnych ochorení metastázujúcich do kostnej drene.
  • Vyhodnotenie zásob železa v kostnej dreni (hemosiderín)

Nasledujúca tabuľka obsahuje konkrétne odporúčania pre cytologické vyšetrenie aspirátu miechy a histologické vyšetrenie biopsie miechy [3]

+ povinná skúška

(+) voliteľná skúška

Ø vyšetrenie nie je indikované

Zmeny parametrov hemoleukogramu/diagnostické predpoklady

Pr. Cytologický z aspirácie miechy

Histologické vyšetrenie biopsie miechy