MVZ Labor Ludwigsburg - laboratórna medicína
Premenné ovplyvňovania a rušenia
Ovplyvňujúce premenné
- rod: Mnoho analytov má rôzne referenčné rozsahy u žien a mužov (pohlavné hormóny, kreatínkináza, kreatinín, počet erytrocytov a hemoglobín, kyselina močová, cholesterol).
- Vek: Zvýšená koncentrácia hemoglobínu a bilirubínu u novorodencov, zvýšená aktivita alkalickej fosfatázy v rastovej fáze, pokles pohlavných hormónov v menopauze.
- Dedičné faktory: Ľudia s krvnou skupinou 0 majú nižšiu aktivitu von Willebrandovho faktora.
- Etnické pozadie: Ľudia afrického pôvodu majú nižší počet bielych krviniek, ale vyššiu sérovú koncentráciu vitamínu B12, kreatínkinázy a amylázy. Ďalej majú pacienti čínskeho a japonského pôvodu nižšiu aktivitu alkoholdehydrogenázy.
- Hmotnosť a svalová hmota vykazujú koreláciu s koncentráciami kyseliny močovej, cholesterolu, kreatinínu, bielkovín a inzulínu v krvi.
- Stravovacie návyky a fyzická aktivita: Močovina, kyselina močová a nižšie koncentrácie kreatinínu v krvi závisia od strednodobého príjmu bielkovín. Glukóza v krvi sa prudko zvyšuje po jedle. Jedno jedlo s vysokým obsahom tukov zvyšuje hladinu triglyceridov, ale nie hladinu cholesterolu v krvi. Hladiny draslíka a fosfátov v krvi sa znižujú po jedle bohatom na sacharidy v dôsledku zvýšenej sekrécie inzulínu. Neustála ťažká fyzická práca a trauma vedú k zvýšeniu kreatínkinázy. Je dôležité informovať pacienta o dodržiavaní nutričnej abstinencie pred odberom krvi počas zodpovedajúcich analýz.
- Nikotín (fajčenie): U chronických fajčiarov sa zvyšuje koncentrácia C-reaktívneho proteínu a karcinoembryonálneho antigénu (CEA). Hemoglobín, erytrocyty a leukocyty sú zvýšené, rovnako ako obsah CO hemoglobínu.
- alkoholu: Už pri jednej veľkej konzumácii alkoholu sa mierne zvyšuje transamináza alanínaminotransferáza (ALT, GPT), zvyšuje sa koncentrácia kyseliny močovej a laktátu, koncentrácia glukózy sa znižuje. Nasledujúce analyty reagujú na chronickú konzumáciu alkoholu zvýšenými nameranými hodnotami: Gamma-GT, ALT, AST, MCV a CDT (transferín s nedostatkom sacharidov).
- tehotenstvo: Zvýšenie objemu plazmy asi o 50% vedie k zníženiu koncentrácie erytrocytov, hemoglobínu a bielkovín. Mení sa nielen hladina hormónov (progesterón, estriol, prolaktín), ale aj ďalšie analyty, ako je alkalická fosfatáza alebo alfa-1-fetoproteín. Počas tehotenstva a pri užívaní inhibítorov ovulácie môže byť aktivita proteínu S nižšia.
- stres spôsobuje uvoľňovanie kortikotropínu (ACTH), adrenalínu, kortizolu, prolaktínu, somatotropínu (STH), tyreotropínu (TSH) a renínu.
- Biorytmy: Rozlišujú sa sezónne výkyvy, ako je kalcidiol (vitamín D) s najvyššími hodnotami v lete a minimami v zime a tyreotropín (TSH) s najnižšími hodnotami na jar, týždenné hormóny a hormóny plodnosti v závislosti od menštruačného cyklu a cirkadiánne rytmy. Termín definuje biologické procesy s 24-hodinovou periodicitou (kortikotropín [ACTH], kortizol, prolaktín, somatotropín [STH], tyreotropín [TSH], železo, fosfát, pyridíniové zosieťovanie atď.).
- Pozícia tela: Pri prechode z ľahu do sedu je koncentrácia krviniek, bielkovín a látok viazaných na bielkoviny. Ovplyvnené sú erytrocyty, hemoglobín, hematokrit, bielkoviny, vápnik, fosfáty, glukóza, leukocyty, cholesterol a LDH.
- Diagnostické opatrenia a lieky: Apalpácia prostaty vedie k zvýšeniu PSA, intramuskulárna injekcia k zvýšeniu kreatínkinázy a myoglobínu. Lieky pôsobia nielen ako ovplyvňujúce faktory in vivo, ale aj ako rušivé faktory účinné in vitro.
- Venózna kongescia: Podobným spôsobom ako pri zmene polohy tela vedie prekrvenie žíl k posunu plazmy do interstícia a zmenám koncentrácie. Koncentrácia analytov viazaných na bielkoviny (železo, vápnik, bilirubín, cholesterol) a bielkovín (enzýmov) stúpa s časom preťaženia. Čas dopravnej zápchy by nemal presiahnuť 1 minútu.
Rušivé premenné
Rušivé premenné sa môžu vyskytnúť v dôsledku chýb v odbere, kontaminácie a abnormálnych vlastností vzorky. Ovplyvňujú merané premenné analytu mimo organizmu („in vitro“), tj. Po odobratí vzorky. Môžu byť závislé od metódy aj od metódy nezávislé.
Vyšetrovacie materiály a odber vzoriek
Najbežnejším testovacím materiálom pre klinické laboratórium je krv. Jeden rozlišuje:
Venózna krv
Na odber vzoriek venóznej krvi sú k dispozícii rôzne skúmavky na vzorky, prázdne alebo s antikoagulanciami, aditívami alebo aktivátormi zrážania. Väčšina skúmaviek má farebne odlíšené uzávery a viečka, ktoré označujú vhodné prísady.
Sérové skúmavky sú skúmavky vyrobené zo skla alebo plastu bez prísad na odber celej krvi. Plastové skúmavky sú vhodné na stanovenie stopových prvkov alebo na toxikologické analýzy. Sklenené skúmavky sa môžu použiť na chemické, imunologické a infekčné sérologické vyšetrenia zo séra.

Skúmavky na sérum s oddeľovacím gélom od Sarstedta (vľavo) a skúmavky na sérum od Bectona Dickinsona (vpravo).
Sérové skúmavky s koagulačnými aktivátormi (kaolín, oxid kremičitý), zvyčajne vyrobený z plastu, môže napr. B. sa môže použiť v núdzových situáciách, keď je potrebné z dôvodu naliehavosti analýzy dodržať veľmi krátky čas zrážania. Sérové skúmavky s aktivátormi zrážania a separačným gélom po centrifugácii vytvorte nad krvným koláčom hustú separačnú vrstvu a zabráňte kontaktu séra s krvnými bunkami.
Skúmavky EDTA: K2EDTA je antikoagulant vybraný pre analýzy krvného obrazu. Ihneď po odbere musí byť krv trikrát až päťkrát vírená s antikoagulantom v skúmavke. Krv EDTA môže byť zmrazená iba vo výnimočných prípadoch (napr. Pre glutatión).
EDTA skúmavky od Sarstedtu (vľavo) a EDTA skúmavky od Bectona Dickinsona (vpravo).
Heparínové skúmavky obsahujú heparinát sodný alebo heparinát lítny. Používajú sa na typizáciu HLA, cytogenetické vyšetrenia, test kvantiferónov, test transformácie lymfocytov (LTT).
Heparínové skúmavky od Sarstedtu (vľavo) a heparínové skúmavky od Bectona Dickinsona (vpravo).
Citrátové skúmavky: Pre koagulačné testy sa používa zmiešavací pomer 1 + 9, pre sedimentačnú reakciu pomer 1 + 4. Je dôležité dodržiavať predpísané zmiešavacie pomery antikoagulancií a objemy krvi. Preplnenie alebo podplnenie falšuje výsledky merania, pričom nemožno tolerovať odchýlku viac ako 10%. Pri koncentrácii citrátu 0,109 mmol/l sa vápnikové ióny odoberajú z krvi. V rámci laboratórnych analýz je možné pomocou prídavku vápnika prepočítať a tým zahájiť koagulačnú reakciu. Pomer miešania medzi citrátom a krvou by mal byť 1 + 9 s hodnotami hematokritu medzi 25 a 60%. Pre nižšie alebo vyššie hodnoty hematokritu je potrebné upraviť objem citrátu. Objem krvi, ktorý sa má pridať do 0,5 ml citrátu, zodpovedá vzorcu: [60/(100-hematokrit)] x 4,5.
Citrátové skúmavky od Sarstedtu (vľavo) a citrátové skúmavky od Bectona Dickinsona (vpravo).
NaF skúmavky majú fluorid sodný ako ďalšie antikoagulancium okrem inhibítora glykolýzy, oxalátu draselného alebo Na2EDTA. Po centrifugácii sa získa plazma NaF. Plazma sa používa na stanovenie glukózy, laktátu a pyruvátu.
Rúrky s fluoridom sodným od spoločnosti Sarstedt (vľavo) a trubice s fluoridom sodným od spoločnosti Becton Dickinson (vpravo).
Kapilárna krv
Kožné kapiláry prstov, päty alebo ušných lalokov sa prepichnú pomocou lancety a unikajúce kvapky krvi sa nanesú na sklenené podložné sklíčka alebo testovacie prúžky alebo sa alternatívne zhromaždia do mikrociev potiahnutých heparínom (analýza krvných plynov) alebo EDTA. Väčšina vzoriek krvi na prúžky a testy v mieste starostlivosti (POCT) pochádza z kapilárnej krvi, ako napríklad: B. na sledovanie koncentrácie glukózy alebo na rýchly test. Kapilárna krv je prospešná, ak je potrebné len malé množstvo krvi alebo ak je odber krvi ťažký, ako je to u novorodencov a malých detí.
Akýkoľvek neočakávaný alebo klinicky nekonzistentný výsledok získaný s kapilárnou krvou sa má monitorovať laboratórnymi testami s použitím vzoriek séra alebo plazmy.
Arteriálna krv
Použijú sa vzorky krvi získané arteriálnou punkciou Rozbor krvných plynov a stanovenie acidobázickej rovnováhy.
Odber krvi
Akýkoľvek odber krvi spôsobuje poranenie ciev a vyžaduje súhlas pacienta (ak nie je v bezvedomí). Môže sa použiť iba dokonalý a sterilný materiál. Krv by mala byť vždy ako potenciálne infekčné byť považovaný. Musia byť k dispozícii a musia byť implementované všeobecné preventívne opatrenia na profylaxiu infekcie.
Systémy na odber krvi: Vákuová trubica (napr. Vysávače) sú sklenené alebo plastové rúrky. Vákuum je také, že skúmavky sú naplnené špecifikovaným objemom krvi. Gumové zátky sú farebne odlíšené podľa pridaných prísad. Injekčné systémy (napr. Monovette) sú odberové skúmavky, ktoré pripomínajú injekčnú striekačku s pečiatkou, tiež farebne odlíšené a dostupné v rôznych veľkostiach.
Prepichnite kanylu a motýľ: Väčšina punkčných kanyl je vybavená bezpečnostnými zámkami, ktoré zabraňujú úniku krvi po venepunkcii, kým nie je pripojená skúmavka so vzorkou. Priemer prepichovacích kanyl je uvedený v mierke (G). Čím väčšie Hodnota G., tým menší je priemer ihly. Typicky sa používajú ihly 20 a 21 G. Motýľ sa odporúča pre malé žilky alebo deti.
Ostatné materiály: adaptér, škrtidlo, tampón, sadra, popolnice, rukavice a ochrana očí.
Venózne krvácanie
- Majte pripravené všetky materiály
- Autor: Vypočujte pacienta skontrolujte údaje na objednávkovom formulári
- Označte skúmavky menom, menom a dátumom narodenia alebo číslom (čiarovým kódom), ktoré jednoznačne identifikuje pacienta
- Pacient by mal byť minimálne pred odstránením 5 minút sedieť alebo ležať
- Odber krvi by mal byť medzi 7.a9:00 ak pacient leží alebo sedí, pred užitím liekov a pred intramuskulárnymi injekciami
- Kedy Bod extrakcie Vhodné sú povrchové žily lakťa, predlaktia a chrbta ruky. Skontrolujte miesto extrakcie, umiestnite škrtidlo na šírku ruky nad miesto extrakcie a pomocou palpácie vyhľadajte vhodnú žilu. Miesto na odber vzoriek nastriekajte dezinfekčným sprejom, utrite ho tampónom a znovu nastriekajte, počkajte 30 - 60 sekúnd, kým nevyschne
- Nasaďte si rukavice, vložte kanylu do systému na odber a odstráňte chránič ihly
- Pozemnou stranou kanyly otočenou nahor a pod uhlom -5 x r x f
RZB: Relatívne odstredivé zrýchlenie ako násobok zrýchlenia v dôsledku gravitácie g = 9,81 m/s 2
r: polomer rotora v cm
f: frekvencia otáčania v otáčkach za minútu (ot/min)
Je potrebné zvoliť nasledujúce nastavenia odstreďovania (pri 15 - 24 ° C):
Sérum: Po dokončení zrážania (približne 30 minút) by sa vzorka mala používať najmenej 10 minút RCF 3000 x g odstredené.
Plazma: Na získanie bezbunkovej plazmy je antikoagulovaná krv (citrátová, EDTA alebo heparínová krv) najmenej 15 minút RZB 2 500 x g odstredivka (do maximálnej hmotnosti 3 000 x g).
Skladovanie vzoriek v praxi
sérum/ centrifugovaná monovette
všetky analýzy
Krv EDTA
Rozbor krvného obrazu
Krv EDTA
Molekulárna biológia
Krv EDTA
Typizácia lymfocytov, HLA B 27
Stabilita vzorky a skladovanie pri izbovej teplote
Analyty so špeciálnymi skladovacími a prepravnými podmienkami
Pre spoľahlivý test je pri mnohých laboratórnych testoch nevyhnutný súlad s osobitnými prepravnými podmienkami.