Profil ALEX (alergik Explorer) - IgE - Synevo

Všeobecné informácie

synevo

Alergia sprostredkovaná IgE a alergologické testy in vitro

Prevalencia alergických ochorení sprostredkovaných IgE dramaticky rastie, a to tak v rozvinutých, ako aj v rozvojových krajinách. Mnoho detí trpí závažnými potravinovými alergiami a anafylaxiou a veľký počet dospievajúcich a mladých dospelých postihnutých astmou a alergickou nádchou má znížený výkon v každodenných činnostiach. Z týchto dôvodov je potrebné zlepšiť liečbu pacientov s alergickými stavmi 1 .

Ďalším problémom súvisiacim s používaním alergénových extraktov sú glykoproteíny obsiahnuté v extraktoch, ktoré môžu interagovať s IgE v sére pacientov, čo vedie k falošne pozitívnym výsledkom pri stanovení alergén-špecifického IgE. Glykány produkované rastlinami a hmyzom charakterizované prítomnosťou epitopov fukózy a/alebo xylózy sa nazývajú krížovo reaktívne uhľohydrátové determinanty (CCD). Percento pacientov senzibilizovaných na CCD rastlín/hmyzu sa odhadovalo na 23%. Títo pacienti s anti-CCD IgE vykazujú krížovú reaktivitu so všetkými rastlinami obsahujúcimi CCD epitopy, čo vedie k veľkému počtu pozitívnych výsledkov v špecifických stanoveních IgE založených hlavne na extraktoch alergénov, napodobňujúcich existenciu viacerých senzibilizácií. Na druhej strane sa uvádza, že anti-CCD protilátky majú malý klinický význam. Preto je nevyhnutné znížiť interferencie vyvolané CCD 1 in vitro alergickými testami; .

Charakteristika testu ALEX

ALEX je diagnostický nástroj in vitro na alergickú senzibilizáciu, pomocou ktorého je možné súčasne určiť rozšírený profil špecifických IgE proti 282 alergénom (152 „celých“ alergénových extraktov a 125 molekulárnych zložiek). Tento test sa týka prevažnej väčšiny inhalačných, potravinových, latexových a jedov alergénov Hymenoptera. Používa sa technológia „macroarray“, pri ktorej sa alergény distribuujú vo forme škvŕn na nitrocelulózovej membráne obsiahnutej v čipu. Test určuje kvantitatívne Špecifický IgE zameraný tak na extrakty alergénov, ako aj na príslušné molekulárne zložky (špecifická a krížová reaktivita). Kombinácia alergénových extraktov s molekulárnymi zložkami v rovnakom teste umožňuje charakterizáciu senzibilizácie IgE a určenie, či ide o „skutočnú“ reakciu alebo krížovú reaktivitu. Použitie inhibítorov CCD v prvej inkubačnej fáze znižuje interferenciu vyvolanú CCD a zvyšuje špecificitu testu. Okrem toho sa stanoví celkový IgE 5; 6 .

Podľa nedávnej štúdie má ALEX dobrú koreláciu s testom ImmunoCAP ISAC, najbežnejšie používaným „microarray“ testom v molekulárnej alergológii 5 .

Odporúčania na vykonanie testu ALEX - diagnostika alergických chorôb spolu s anamnestickými údajmi a klinickým vyšetrením.

Použitím molekulárnych alergénnych zložiek poskytuje test dôležité informácie o:

  • indikácia špecifickej imunoterapie, najmä pri respiračných alergiách a alergiách spôsobených jedmi z hmyzu;
  • riziko závažných alergických reakcií na potraviny (napr. zásobné proteíny Ara h 1,2,3 alebo 6 spôsobujú závažné alergické reakcie na anafylaktický šok, zatiaľ čo proteíny Ara h 8 a PR-10 sa nepodieľajú na závažných reakciách, obe skupiny proteínov poskytujúce pozitívne výsledky pri testovaní na arašidové extrakty);
  • krížová reaktivita (krížová reaktivita).

Tento test je obzvlášť výhodný pre polysenzibilizovaných pacientov a pacientov so syndrómom orálnej alergie 5; 6 .

Výcvik pacientov - à jeun (nalačno) alebo po jedle (po jedle) 6 .

Odobratý exemplár - venózna krv 6 .

Zberová nádoba Vacutainer bez antikoagulancia s/bez separačného gélu 6 .

Po zbere potrebné spracovanie - oddeľte sérum odstredením 6 .

Objem vzorky - minimálne 1 ml ser 6 .

Dôvody zamietnutia skúsiť - hemolyzované sérum 6 .

Stabilita vzorky - separované sérum je stabilné 7 dní pri 2-8 ° C; 6 mesiacov pri - 20 ° C 6 .

Metóda - Multiplexná ELISA.

Tuhou fázou je nitrocelulózová membrána, v ktorej sú alergény distribuované (pozri tabuľku nižšie so zoznamom použitých alergénov) a ktorá je obsiahnutá v čipu. V prvej fáze sa membrána inkubuje s pacientovým zriedeným sérom, použité riedidlo obsahuje inhibítor CCD. Po 2 hodinách inkubácie sa čipy dôkladne premyjú, potom sa v nasledujúcom kroku inkubujú 30 minút s ľudskou anti-IgE protilátkou značenou alkalickou fosfatázou. Po novom premývacom kroku sa pridá enzymatický substrát. Po vysušení membrán sa pomocou digitálneho fotoaparátu zmeria intenzita farby získaná pre každú škvrnu alergénu. Hodnoty získané pre špecifické IgE sa poskytnú pomocou softvéru určeného na testovanie v makročipoch. Stanoví sa tiež celková hladina IgE 6 .

Hlásenie výsledkov pre špecifické IgE

Správa, ktorú pre pacienta vydá laboratórium, bude obsahovať:

  • všetky skupiny testovaných alergénov, typy alergénov (extrakty alebo molekulárne zložky) a jednotlivé špecifické hodnoty IgE (vyjadrené v kUA/L);
  • celková hladina IgE (vyjadrená v kUA/l);
  • súhrn zistených senzibilizácií, pri ktorých sú skupiny alergénov označené farbou zodpovedajúcou najvyššej identifikovanej triede senzibilizácie 6 .