Protilátky proti IgG proti Toxoplasma gondii; Ústredná vojenská pohotovostná fakultná nemocnica Dr.

Protilátky proti IgG proti Toxoplasma gondii

Všeobecné informácie

Toxoplasma gondii je prvok, patriaci do radu Coccidia, trieda Sporozoras, veľmi blízky rodu Isospora. Životný cyklus toxoplazmy zahŕňa 3 formy:
- trofozoit: invazívna forma zodpovedná za akútne prejavy infekcie;
- cysta: zodpovedný za pretrvávajúcu a latentnú infekciu;
- oocyst: nenachádza sa u ľudí, ale iba u mačiek (povinný hostiteľ), ktoré majú úlohu v evolučnom cykle toxoplazmy a pri prenose infekcie.

Parazit je svojou povahou všadeprítomný a môže infikovať každého cicavca, ale úplný vývojový cyklus sa vyskytuje iba v čeľadi Felidae (ktorej súčasťou je aj mačka), kde sa parazit reprodukuje a je eliminovaný výkalmi vo forme oocýst.

Toxoplazma je väzbový intracelulárny parazit, ktorý má predispozíciu pre neuróny, mikroglie, choroidy a bunky sietnice, ako aj pre bunky patriace do retikuloendotelového systému.

Nádržou infekcie sú mačky a mnoho ďalších druhov zvierat (psy, ošípané, dobytok, ovce, hlodavce, domáce a voľne žijúce vtáky atď.), Ktoré sa môžu nakaziť a ktorých produkty môžu byť pre človeka zdrojom infekcie.

Ľudia môžu dostať infekciu konzumáciou nedostatočne tepelne upraveného mäsa (s obsahom cýst), konzumáciou potravy kontaminovanej pôdou (s obsahom zrelých cýst) alebo kontaktom s mačacími výkalmi (hry pre deti, geofágia, kontaminovaná zelenina).

Transplacentárna cesta infekcie je hlavným problémom z dôvodu vážnych následkov pre plod. Infekcia je možná aj počas pôrodu. Prenos z človeka na človeka nie je známy, s výnimkou maternice. Zriedkavými spôsobmi prenosu infekcie sú krvné transfúzie parazitov a laboratórne infekcie.

Vnímavosť k infekcii je všeobecná. Dostatočné údaje o stupni a trvaní imunity nie sú známe. Je známe, že špecifické protilátky IgG pretrvávajú po celý život. Podľa niektorých autorov infekcia v niektorých prípadoch pretrváva; v ostatných prípadoch je imunita zabezpečená sterilizáciou organizmu parazitmi. Ľudia so zníženou imunitou (AIDS, predĺžená imunosupresívna liečba, transplantácie orgánov) sú mimoriadne citliví a môžu spôsobiť vážne infekcie: encefalitídu a sepsu.

Frekvencia infekcie sa líši podľa vekových skupín a populácie medzi 20 až 80%, percento sa zvyšuje s vekom, čo vyplýva z prítomnosti pozitívnych sérologických testov, ktorých percento sa zvyšuje s vekom.

Infekcia sa vyvíja vo väčšine prípadov asymptomaticky. Keď sa infekcia prejaví klinicky, pacient trpí syndrómom samolimitujúcej mononukleózy s fyzickou asténiou a lymfadenopatiou. Obdobie parazitémie nie je presne definované, ale nastáva skôr, ako dôjde k sérokonverzii. U HIV pozitívnych pacientov, ako aj u pacientov s poruchami T lymfocytov alebo predĺženým kortikosteroidom, sa častejšie vyskytuje chronická parazitémia.

Infekcia plodu počas prvého trimestra gravidity sa vyskytuje menej často, ale je spojená s vyšším rizikom potratu a abnormalitami plodu. Infekcia nakazená v pokročilejšom období tehotenstva je bežnejšia, má však menšie riziko vyvolania abnormalít plodu. Najvyššie riziko závažného vrodeného ochorenia nastáva, keď sa infekcia získa za 10 - 24 týždňov tehotenstva, a najvyššie riziko vertikálneho prenosu sa vyskytuje počas 26. - 40. týždňa. Primárna infekcia matky bezprostredne pred počatím alebo v prvých 10 týždňoch tehotenstva má rýchlosť vertikálneho prenosu 2%, ale u viac ako 80% infikovaných plodov sa rozvinie závažné ochorenie s mikroftalmiou, chorioretinitídou, hydrocefalom a intrakraniálnymi kalcifikáciami. Medzi 24. a 30. týždňom prevalencia závažnej infekcie klesá z 80 na 20% a po 30. týždni klesá na 6%, hoci viac ako 80% tehotných žien, ktoré majú počas tohto obdobia primárnu infekciu, prenesie infekciu plodu.

Imunitná odpoveď na infekciu je v počiatočnej fáze reprezentovaná objavením sa IgM protilátok počas prvého týždňa ochorenia, ktoré dosiahnu maximálnu hladinu za mesiac, postupne klesajú v priebehu 3 - 6 mesiacov, s možnosťou pretrvávania v nízkych titroch. do 2 rokov. Stanovenie protilátok IgM je užitočné pri diagnostike nedávnej infekcie.

IgG protilátky sa objavia neskôr a dosiahnu svoj maximálny titer asi za 1-2 mesiace, potom pretrvávajú dlho. Sú užitočné pri skríningu imunitného stavu a stanovenia dynamiky majú hodnotu pri diagnostike primárnej infekcie a reaktivácií.

Aby sa zabránilo komplikáciám počas tehotenstva, odporúča sa pred počatím posúdiť imunitný stav. Preto sa predpokladá, že HIV pozitívne ženy pred otehotnením sú chránené z hľadiska prenosu infekcie na budúci plod. Na druhej strane sú séronegatívne ženy vystavené riziku infekcie počas tehotenstva a mali by sa na ne uplatniť profylaktické opatrenia.

Výcvik pacientov - testy nevyžadujú predchádzajúcu prípravu.

Odobratý exemplár - príde krv.

Zberová nádoba - vacutainer bez antikoagulancia s/bez separačného gélu.

Po zbere potrebné spracovanie - sérum sa oddelí odstredením.

Skúšobný objem - minimálne 1 ml séra (na stanovenie oboch typov protilátok).

Príčiny odmietnutia dôkazov - hemolyzovaný exemplár.

Stabilita vzorky - separované sérum je stabilné 3 dni pri 2 - 8 ° C; 6 mesiacov pri -20 ° C. Rozmrazené vzorky centrifugujte a použite supernatant. Zabráňte opakovanému zmrazovaniu/rozmrazovaniu.

Metóda a interpretácia výsledkov

Používajú sa tieto pracovné metódy:

imunochemia pomocou ELFA (enzýmovo viazaná imunofluorescenčná skúška)
imunochémia s detekciou elektrochemiluminiscencie (ECLIA).

Referenčné hodnoty -.sa líši v závislosti od pracovnej metódy:

Interpretácia výsledkov - je zhrnutá v nasledujúcej tabuľke:

Výklad

Následné kroky

Ak existuje podozrenie na nedávnu infekciu, odporúča sa zber zopakovať po 3 týždňoch; u tehotných pacientok sa test bude opakovať v intervaloch 8 - 12 týždňov.

Anamnéza infekcie (staršia ako 2 roky)

Možná akútna infekcia (nemožno vylúčiť falošne pozitívny výsledok)

Odporúča sa otestovať novú vzorku za 1 týždeň.

Možná akútna infekcia (nemožno vylúčiť falošne pozitívny výsledok)

Odporúča sa otestovať novú vzorku za 2 - 3 týždne.

Odporúča sa otestovať novú vzorku za 1 týždeň.

Odporúča sa otestovať novú vzorku za 2 - 3 týždne; ak sa na novej vzorke dosiahnu identické výsledky alebo sa IgG stane pozitívnym, bude sa odporúčať potvrdiť nedávnu infekciu v referenčnom centre.

Infekcia na pozadí alebo falošne nejednoznačný výsledok pre IgM

Odporúča sa vykonať test avidity IgG v rovnakom sére.

Možná nedávna infekcia (za posledné 2 roky)

Odporúča sa vykonať test avidity IgG v rovnakom sére; ak sa získa nízky index, bude sa odporúčať potvrdiť nedávnu infekciu v referenčnom centre (novú vzorku je možné testovať za 2 až 3 týždne, aby sa zvýraznila významná zmena titra protilátok IgG).

Ukážka sérokonverzie IgG protilátok (negatívna → pozitívna) alebo zdvojnásobenie hladiny IgG protilátok v párových sérach získaných v intervaloch 14-21 dní potvrdzuje nedávnu infekciu.

Ak sa u novorodenca detegujú protilátky IgM, ktoré pretrvávajú pri viacerých stanoveních, je s najväčšou pravdepodobnosťou podozrenie na vrodenú infekciu.

Limity a interferencie

Diagnóza nedávnej infekcie Toxoplasma gondii by nikdy nemala byť stanovená na základe jediného pozitívneho výsledku pre protilátky proti Toxo-IgM z dôvodu dlhej perzistencie tohto typu protilátok u niektorých pacientov a možnosti prítomnosti „prirodzených“ IgM protilátok proti antigénom. Toxoplazma, pri absencii infekcie.

IgM protilátky sa zvyčajne detegujú u pacientov s nedávnou primárnou infekciou, ale dajú sa nájsť aj u pacientov s reaktivovanou alebo sekundárnou infekciou.

Najlepšou metódou na diagnostiku infekcie plodu je PCR plodovej vody, ktorá má senzitivitu 83 - 97,5% a špecificitu 100% u tehotných žien, ktoré počas tehotenstva prekonali sérokonverziu.

Vzorky odobraté v počiatočnom štádiu akútnej infekcie nemusia obsahovať detekovateľné hladiny IgM protilátok.

U niektorých pacientov môžu protilátky IgM zmiznúť skoro do 3 týždňov od začiatku. U týchto pacientov je užitočné dynamické stanovenie IgG.

Pacienti s aktívnou chorioretinitídou vyvolanou Toxoplasma gondii zvyčajne nemajú detekovateľné protilátky IgM.

Prítomnosť alebo neprítomnosť špecifických protilátok nemožno použiť na vyhodnotenie účinnosti liečby.

Pozitívne výsledky u pacientov, ktorí dostávali krvné produkty v posledných mesiacoch, nemusia byť platné.

U pacientov so zníženou imunitou je potrebné interpretovať získané výsledky opatrne, pretože zvyčajne majú nízke titre protilátok IgG a protilátky IgM môžu byť nezistiteľné.