Protilátky proti Klebsiella pneumoniae-IgG, IgM, IgA - Synevo
Všeobecné informácie
Klebsiella pneumoniae (Friedlander bacillus) je gramnegatívny, nepohyblivý, zapuzdrený, laktóza-pozitívny bacil, ktorý sa nachádza v normálnej flóre ústnej dutiny, kože a gastrointestinálneho traktu. Členovia rodu Klebsiella exprimujú na povrchu 2 typy antigénov: antigén O, ktorý je lipopolysacharidom, a antigén K, kapsulárny polysacharid, oba prispievajú k patogenite.
Sú to oportúnne patogény, ktorých hlavným zdrojom infekcie je gastrointestinálny trakt pacientov a ruky zdravotníckeho personálu v nemocniciach 3 .
Tieto baktérie zvyčajne spôsobujú zápal pľúc získaný v komunite, ale môžu sa často rýchlo šíriť a často viesť k nozokomiálnym epidémiám. Spektrum klinických syndrómov spôsobených týmto patogénom zahŕňa zápal pľúc, bakteriémiu, tromboflebitídu, infekcie močových ciest (UTI), horné dýchacie cesty, rany, cholecystitídu, cholangitídu, hnačky, endokarditídu, osteomyelitídu, endoftalmitídu a meningitídu. Prítomnosť invazívnych zariadení, kontaminácia prostriedkov na podporu dýchania, používanie močových katétrov, zlý zdravotný stav a liečba na jednotke intenzívnej starostlivosti sú faktory, ktoré zvyšujú riziko nozokomiálnej infekcie druhmi Klebsiella. Široké používanie širokospektrálnych antibiotík u hospitalizovaných pacientov viedlo k zvýšeniu prenosu Klebsiella a následne k vývoju kmeňov rezistentných na viac liekov, ktoré produkujú širokospektrálne β-laktamázy. Tieto kmene sú mimoriadne virulentné, majú kapsulárny antigén K55 a majú mimoriadnu schopnosť šírenia. Infekcie spôsobené týmito druhmi sa stali hlavným problémom vo väčšine nemocníc v dôsledku viacnásobnej rezistencie na antibiotiká 1; 3 .
Okrem toho jedným z najzaujímavejších aspektov patogenity Klebsiella pneumoniae je úloha tohto mikroorganizmu v etiopatológii reumatických chorôb spojených s HLA-B27 (ankylozujúca spondylitída-AS). Spojenie medzi Klebsiellou, HLA-B27 a AS je nejasné.
Prvé správy sa objavili na konci 70. rokov 20. storočia a naznačovali možnú súvislosť medzi Klebsiella a AS, ale len nedávno sa preukázala súvislosť medzi určitými Enterobacteriaceae a reumatoidnými chorobami. Dobre zdokumentované štúdie, ktoré skúmali súvislosť medzi reaktívnou artritídou a akútnymi enterobakteriálnymi infekciami (Yersinia enterocolitica, Shigella, Salmonella, Klebsiella), viedli k hypotéze, že AS môže byť následkom infekcie enterickými mikroorganizmami 1 .
V roku 1978 Ebringer a kol. a neskôr ďalší vedci uvádzali zvýšenie kolonizácie čreva Klebsiellou počas aktívnej fázy ochorenia u pacientov s AS.
V štúdii zameranej na detekciu antibakteriálnych protilátok v sére pacientov s AS Trull et al. (v roku 1983) ukázali, že titre protilátok proti Klebsiella IgA boli významne zvýšené v sére pacientov s aktívnymi formami ochorenia v porovnaní so sérom pacientov s neaktívnou formou alebo so zdravými kontrolami.
Boli vyvinuté rôzne teórie na vysvetlenie súvislosti medzi HLA-B27, Klebsiellou a etiopatogenézou AS.
Teória molekulárnej mimikry, ktorú prvýkrát navrhli Ebringer a kol., Zahŕňa skríženú reaktivitu medzi Klebsiellovými antigénmi a určitými epitopmi v molekule HLA-B27. Túto teóriu podporujú pozorovania, že anti-Klebsiella protilátky sa viažu na HLA-B27 pozitívne bunky a anti-HLA-B27 protilátky na Klebsiella antigény. Ďalej bola v Klebsielle aj v štruktúre HLA-B * 2705 detegovaná šesť aminokyselinová sekvencia (QTDRED) a v sére pacientov s AS boli detekované protilátky špecifické pre tento hexapeptid.
Teória receptorov vyvinutá Zinkernagelom a Dohertym je založená na hypotéze, že hlavný histokompatibilný komplex triedy I má vírusové a bakteriálne antigény. Bolo navrhnuté, že HLA-B27 sa chová ako receptor pre artriticky spracované polypeptidy, pravdepodobne odvodené od Klebsiella. Výsledkom je, že cytotoxické T bunky namierené proti týmto peptidom tiež napádajú štruktúrne podobné proteíny v kĺboch prezentované molekulami HLA-B27 1 .
Napriek intenzívnemu výskumu v tejto oblasti zostáva spojenie medzi Klebsiellou a reumatoidnými chorobami neznáme, pretože vyššie uvedené teórie boli čiastočne vyvrátené protichodnými výsledkami rôznych skupín výskumníkov.
Posledné štúdie týkajúce sa odpovede protilátok na kapsulárne polysacharidy z Klebsielly v sére pacientov s AS alebo inými reumatickými stavmi analyzovali po prvýkrát všetkých 77 sérotypov. Sérum pacientov s AS a HLA-B27-pozitívnym vykazovalo vysoké titre IgG v reakcii na kapsulárne polysacharidy sérotypov K26, K36, K50 v porovnaní s hladinou IgG u HLA-B27-negatívnych jedincov.
Je potrebné poznamenať, že všetky tri typy kapsulárnych antigénov (typy K26, K36 a K50) obsahujú polysacharidy rozpoznávané makrofágmi prostredníctvom lektínového mechanizmu. Tento typ väzby by mohol hrať počiatočnú úlohu v patogenéze AS. Zo 77 známych sérotypov Klebsielly iba 16 kapsulárnych typov obsahuje sekvencie, ktoré umožňujú špecifickú interakciu s manózovým receptorom makrofágov. Nie je vylúčené, že vyššie uvedené sérotypy obsahujú špecifické antigény, pravdepodobne peptidy, ktoré indukujú artritogénnu aktivitu po požití a deštrukcii baktérie makrofágmi. Spracovanie a prezentácia tohto antigénu by mohla aktivovať špecifickú, ale stále neznámu imunologickú kaskádu, ktorá spôsobuje výskyt reaktívnej artritídy. Sú však potrebné ďalšie štúdie na objasnenie interakcie medzi týmito sérotypmi a príslušnými bunkami pacientov s AS a HLA-B27-pozitívnym 1. .
Odporúčania pre stanovenie protilátok proti Klebsiella pneumoniae - užitočnosť v diagnostika reaktívnej artritídy, ankylozujúca spondylitída 1; 2; 3 .
Výcvik pacientov - najlepšie na prázdny žalúdok (na prázdny žalúdok) 2 .
Odobratý exemplár - príde krv 2 .
Zberová nádoba - vacutainer bez antikoagulancia s/bez separačného gélu 2 .
Po zbere potrebné spracovanie - oddeľte sérum odstredením 2 .
Skúšobný objem - minimálne 2 ml ser 2 .
Príčiny odmietnutia dôkazov - intenzívne hemolyzovaný, hemolytický alebo bakteriálne kontaminovaný exemplár 2 .
Vyskúšajte stabilitu - 2 týždne pri 2 - 8 ° C; dlhá doba pri -20 ° C; zabráňte opakovanému rozmrazovaniu/opätovnému zmrazovaniu 2 .
Metóda - nepriama imunofluorescencia 2 .
Referenčné hodnoty
Výsledky sú vyjadrené kvalitatívne negatívne/pozitívne/nejednoznačné 2 .