Spoločná obchodná spoločnosť (s vhodným antibiogramom) - Synevo
Informovanýii všeobecné
Hnačkový syndróm je často tretím syndrómom, s ktorým sa v lekárskej praxi stretávame.
Aj keď väčšina pacientov má samolimitujúcu infekciu, existujú aj ťažké formy, ktoré sa vyznačujú častou stolicou (3 - 40 denne), nízkou konzistenciou (niekedy vodnatou) a vysokou stratou tekutín, čo môže viesť k hydroelektrolytickej nerovnováhe sprevádzanej závažnými hemodynamickými poruchami ( kardiovaskulárny kolaps) spôsobujúci smrť.
Giardia lamblia, Cryptosporidium parvum, Entamoeba histolytica 1; 3
- Patogenic enterobateriaceae: Salmonella spp., Shigella spp., Escherichia coli enteropathogen, enterotoxigen, enterohemorrhagic, enteroinvasive, enteroaderent, enteroaggregative, Yersinia enterocolitica 1; 3
- Patogénne podmienené enterobaktérie: Klebsiella spp. (Hnačkový syndróm novorodenca), Serratia marcescens („syndróm červenej plienky“ - abnormálna kolonizácia touto baktériou u novorodencov)
- Vibrio cholerae, Vibrio parahaemoliticus
- Vysoko gramnegatívne bacily: Aeromonas, Alcaligenes, Plesiomonas
- grampozitívne koky: Staphylococcus aureus 1; 3
Anaeróbne baktérie
Bacillus cereus, Clostridium difficile (pseudomembranózna enterokolitída po antibiotickej liečbe), Clostridium perfringens, Clostridium botulinum 1; 3
mikroaerofil
Vírus Norwalk, rotavírus, adenovírus 1; 3
Odber a preprava vzoriek
Odber vzoriek by sa mal robiť čo najbližšie k nástupu choroby a pred začatím akejkoľvek antimikrobiálnej liečby.
• Odstúpenie od spontánne emitovanej stolice - je vhodnejšie a indikuje sa pri všetkých formách akútnej hnačky, keď je častá tvorba výkalov.
• Pri bakteriálnych a parazitárnych vyšetreniach sa odber vzoriek vykonáva pomocou „čajovej lyžičky“ kombajnu, ktorá sa zameriava na tekuté časti a najmä na sliznice a/alebo krvavé vzorky, ak existujú. Objem plodiny musí byť minimálne 5 ml alebo 3 - 5 cm 3, ak sa vytvorí stolica 3 .
• Pri izoláciách alebo virologických vyšetreniach sa odoberá 5 - 10 cm 3 výkaly alebo najmenej 5 ml, ak sa netvorí stolica 3 .
• Rektálny odber vzoriek - odporúča sa v:
- chronická shigelóza, pri ktorej škrabanie sliznice konečníka sondou alebo tampónom ponúka väčšie šance na izoláciu;
- vyšetrovanie nosičov Shigella a Salmonella, s výnimkou nosičov S. Typhi.
Na tento typ vzorkovania sa používajú sondy Nelaton (č. 14-16) alebo vhodné tampóny nasledovne: s tampónom navlhčeným v izotonickom soľnom roztoku (nepoužívajte lubrikačné gély), preniknite do análneho zvierača pomalou rotáciou, zavedením intrarektálne asi 15 cm. To isté sa urobí so sondou Nelaton, ktorej je prispôsobená injekčná striekačka (10 ml), pomocou ktorej sa urobí 1 - 2 odsávanie. Po odbere vzoriek sa sondy a tampóny umiestnia do sterilných nádob obsahujúcich konzervačné látky, zodpovedajúcim spôsobom označia a odošlú do laboratória. .
Doprava vzorky a ich spracovanie sa vykonáva maximálne do 1 hodiny, ak sa odobrali do nádob bez transportného média (s prepravou pri izbovej teplote), alebo je možné ich uchovávať až 24 hodín pri izbovej teplote, ak sa odobrali do nádob obsahujúcich Cary-Blair transportné médium, ktoré zaisťuje dobrú životaschopnosť bakteriálnych črevných patogénov. Výnimkou z týchto pravidiel sú vzorky odobraté pre podozrenie na infekciu veľmi citlivou baktériou Shigella spp, ktorá si vyžaduje očkovanie na kultivačné médium ihneď po odbere 3; 4 .
Z dôvodu vírusovej etiológie by sa vzorky, ktoré sa nespracovávajú okamžite, skladovali pri - 70 ° C 3 .
Izolácia aeróbnych baktérií
• Vysejte vzorku na dve kultivačné médiá, jedno slabo selektívne (Mac Conkey) a druhé mierne selektívne (Hektoen), a inkubujte 24 hodín pri 35 - 37 ° C, sledujte kultivácie 24 a 48 hodín kvôli vzhľadu charakteristických kolónií. Pre rod Vibrio sa odporúča selektívne médium BSA (agar so žlčovou soľou) a pre kvasinky - médium Sabouraud s chloramfenikol.
• Aby sa zvýšili šance na izoláciu, vzorka sa subkultivuje na obohacovacom médiu, ktoré podporuje množenie patogénov (napr. Bujón so seleničitanom sodným pre Salmonella spp., Alkalická peptónová voda alebo bujón s taurokolátom a peptónom pri pH = 8,0-9, 0 pre Vibrio, odkiaľ je možné po inkubácii vykonať stery a kultúry v hornej časti média). Inkubujte 24 hodín pri teplote 35 - 37 ° C, potom prechádzajte kultivačným médiom.
• Kolónie charakteristické pre každý rod budú transplantované na identifikáciu druhov a aglutináciu špecifickými sérami.
Kvásková izolácia
• na náteroch zafarbených Gramom sa sleduje prítomnosť kvasiniek vo veľkom a prevažnom množstve v porovnaní so zníženou fekálnou bakteriálnou flórou 2 .
• je rozhodujúci pre kultiváciu výkalov s cieľom izolovať a kvantifikovať kvasinky.
Kultivácia na médiu Sabouraud s chloramfenikolom s následným sledovaním o 48–72 h 3 .
Na stanovenie hubovej etiológie hnačkového syndrómu sa uskutoční kvantitatívne vyšetrenie kvasiniek, respektíve stanovenie počtu jednotiek tvoriacich kolónie húb na g alebo ml stolice, pričom významne je kvantitatívne množstvo> 10 9 CFU/g alebo ml stolice 3. .
Komunikácia a interpretácia výsledkov
V prípade žiadosti o laboratórnu službu v laboratóriu sa analyzujú hlavné baktérie podieľajúce sa na hnačkových ochoreniach: Shigella spp., Salmonella spp. A u detí vo veku 0-3 rokov a hnačkový patotyp enteropatogénu Escherichia coli - EPEC 5 .
Aplikácia Escherichia coli pre deti staršie ako 3 roky a dospelých, EHEC (Escherichia coli enterohemoragická) a EIEC (Escherichia coli enteroinvazívna) sa podáva iba s odporúčaním lekára, u ktorého je zaznamenané klinické podozrenie.
V situáciách, keď je potrebné vyšetrenie výkalov pre druhy Candida, musí byť požadovaná služba „Kultúra a identifikácia húb z výkalov“.
Tiež spomenieme, že v našich laboratóriách sa nevykonávajú žiadne vírusové kultúry 2 .
Bibliografia
1. Betty A. Forbes, Daniel F. Sahm, Alice S. Weissfeld. Infekcie gastrointestinálneho traktu. In Bailey and Scott’s Diagnostic Microbiology. Mosby, USA, 11. vydanie. 2002; 62, 965-969.
2. Laboratórium Synevo. Konkrétne odkazy na použitú technológiu práce 2010. Ref. Typový katalóg.
3. Marian Negut. Laboratórna diagnostika pri syndróme infekčnej hnačky. V pojednaní o klinickej mikrobiológii. Dumitru Buiuc, Marian Neguţ, rumunské lekárske vydavateľstvo, 1. vyd. 1999, 349-386.
4. Richard B. Thomson J, J. Michael Miller. Odber, preprava a spracovanie vzoriek: Bakteriológia. In Manuál klinickej mikrobiológie. Patrick R. Murray a kol., ASM PRESS, USA, 8. vydanie. 2003; 20, 312 - 313.
5. Nancy A. Strockbine et. všetko. Escherichia, Shigella a Salmonella. V príručke klinickej mikrobiológie. ASM PRESS, USA, 11. vydanie, 2015; 37: 685-713.