Úprava metódy MEKC - PDF na stiahnutie zadarmo

Katedra poľnohospodárskej ekonomiky a potravinárskych vied Titul v odbore Technológia bioproduktov Úprava metódy MEKC na stanovenie mykotoxínu patulínu v jablkovej šťave Bakalársku prácu predložila: Anne Weber Získanie akademického titulu Bakalár (B.Sc.) Prvý recenzent: Druhý recenzent: Prof. rer. nat. Christine Wittmann Dr. rer. nat. Bettina Albrecht Doba spracovania: 18. januára 2010 2. marca 2010 URN: urn: nbn: de: gbv: 519 -esis2010-0114-9 Neubrandenburg, 2. marca 2010

mekc

Obsah II Obsah Zoznam skratiek. IV Zoznam jednotiek. VI 1 Úvod. 1 1.1 Patulin. 2 1.1.1 Štruktúra a výskyt. 2 1.1.2 Biosyntéza. 3 1.1.3 Toxikologické hodnotenie. 5 1.2 Právny základ. 7 1.2.1 Nariadenie o maximálnom množstve mykotoxínov. 7 1.2.2 Nariadenie (ES) č. 1425/2003. 7 1.2.3 Smernica 2003/598/ES. 8 1.3 Postup overovania. 9 1.3.1 Vysokoúčinná kvapalinová chromatografia. 9 1.3.2 Plynová chromatografia. 1.3.3.3 Chromatografia na tenkej vrstve. 10 1.3.4 Imunochemické metódy. 10 1.3.5 Stanovenie patulínu pomocou MEKC-DAD. 11 1.4 Cieľ. 17 2 Materiál a metódy. 18 2.1 Materiál. 18 2.1.1 Chemikálie a látky. 18 2.1.2 Požadované základné a tlmivé roztoky. 19 2.1.3 Zariadenia. 23 2.1.4 Preskúmaná vzorka. 23 2.2 Metódy. 24 2.2.1 Fotometrické stanovenie koncentrácie PAT/5-HMF. 24 2.2.2 Optimalizácia separačného efektu. 26 2.2.3 Príprava vzorky. 26 2.2.4 Nárast vzorky jablkového džúsu. 29 2.2.5 Meranie. 31

Obsah III 3 Výsledky. 32 3.1 Stabilita zásobných riešení. 32 3.2 Optimalizácia separačného efektu. 33 3.2.1 Výskumy zloženia elektrolytov. 33 3.2.2 Príprava vzorky. 35 4 Diskusia. 39 5 Zhrnutie. 48 Glosár. VII Bibliografia. XI Zoznam obrázkov. XVI Zoznam tabuliek. XVII čestné vyhlásenie. XVIII príloha. XIX

Zoznam skratiek IV Zoznam skratiek Numerická kyselina 5-HMF 6-MSA 5- (Hydroxymetyl) furfural 6-metylsalicylová kyselina; Kapilárna elektroforéza 6-metylsalicylová kyselina B BSTFA N, O-bis-trimetylsilyl-trifluóracetamid C CE CMC; Kritická micelárna koncentrácia kapilárnej elektroforézy; kritická micelárna koncentrácia D DAD DC DIN detekcia diódového poľa; Diode Array Detection Thin Layer Chromatography Nemecký ústav pre štandardizáciu E ECD EI EOF detektor elektrónového záchytu; Elektrónová detekcia elektrónovej ionizácie; Ionizácia nárazom elektrónov Elektroosmotický tok F FAO Organizácia pre výživu a poľnohospodárstvo G GC plynová chromatografia; Plynová chromatografia H HFBI HPCE HPLC vysoko účinná kapilárna elektroforéza s heptafluórbutyrylimidazolom; Vysokoúčinná kvapalinová chromatografia; Vysokoúčinná kvapalinová chromatografia

Zoznam skratiek V L LFGB LMBG Zákon o potravinách, komoditách a krmivách Zákon o potravinách a komoditách M MEKC MG MS Micelárna elektrokinetická kapilárna chromatografia Molekulová hmotnosť Hmotnostný spektrometer N NCI negatívna chemická ionizácia; negatívna chemická ionizácia P p.a. PAT PMDI pro analýza Patulin dočasný maximálny denný príjem R RT retenčný čas S SDS SPE dodecylsulfát sodný; Extrakcia pevnou fázou dodecylsulfát sodný/laurylsulfát sodný; Extrakcia na pevnej fáze W WHO Svetová zdravotnícka organizácia

Zoznam jednotiek VI Zoznam jednotiek tlak mbar plocha milibar integrálna mau. s milli absorpčnými jednotkami. sekundy hmotnosť μg, mg mikrogramu, molárna molárna mol/l mol na liter molekulová hmotnosť g/mol gram na mol intenzita signálu mau milli absorpčné jednotky napätie kv kilovolt teplota C stupne Celzia objem μl, ml, l mikroliter, mililiter, liter vlnová dĺžka nm nanometr čas s, min, h sekunda, minúta, hodina

1 Úvod 2 1.1 Patulín 1.1.1 Štruktúra a výskyt Patulín (4-hydroxy-4H-furo [3,2-c] pyrán-2 (6H) -ón, pozri obrázok 1) je nenasýtený heterocyklický polyketid laktón produkovaný rôznymi druhmi môžu byť syntetizované formami rodov Penicillium, Aspergillus a Byssochlamys v poľnohospodárskych výrobkoch (LAWLEY, 2008; MILIOTIS, 2003; WEIDENBÖRNER, 1998). Najdôležitejší zástupcovia sú zhrnutí v tabuľke 1, v ktorej má Penicillium expansum najväčší význam (LAWLEY, 2008; MILIOTIS, 2003). Samotná syntéza mykotoxínov je podporovaná určitými podmienkami okolitého prostredia a líši sa od druhu k druhu. Optimálne rozmedzie tvorby mykotoxínov P. expansum je pri teplote medzi 20 ° C a 25 ° C, rozmedzie pH Obr. 1: Chemikálie od pH 3 do pH 6,5 (KRÄMER, 2007) a hodnota W 0,99 Štruktúra patulínu (WEIDENBÖRNER, 1998). Niektoré formátory patulínu sú dokonca schopné odstrániť mykotoxín pri teplotách