Abstraktný text 10. sympózium DGfZ 1997

10. Heidelbergské sympózium
23. - 25. októbra 1997

DGfZ abstrakty

Abstrakty sú vytlačené v zborníku: Proceedings of the DGZ Heidelberg Meetings, DKFZ, Heidelberg 1997, ISSN 0949 - 5347

abstraktný

=== ÚSTNE PREZENTÁCIE ===

=== APOPTÓZA ===

=== ANALÝZA OBRAZU ===

7. SPEKTRÁLNA PRESNÁ DIAĽKOVÁ MIKROSKOPIA VO VÝSKUME GENÓMU
C. Cremer * (1,2), H. Bornfleth (1), J. Bradl (1), P. Edelmann (1), A. Esa (1), H. Münch (1), J. Rauch (1) ), B. Rinke (1), L. Trakhtenbrot (3), M. Hausmann (1), T. Cremer (4,2) (1) Ústav aplikovanej fyziky a (2) Interdisciplinárne stredisko pre vedecké výpočty (IWR), University of Heidelberg, D-69120 Heidelberg; (3) Hematologický ústav, Tel. Hashomer/Izrael; (4) Ústav pre genetiku človeka na Mníchovskej univerzite, D-80333 Mníchov.
* Prezentujúci autor
Načrtnuté sú nové metodologické prístupy pomocou kombinácie multispektrálnych techník molekulárneho biologického značenia s novými optoelektronickými procesmi, ako je napríklad konfokálna laserová skenovacia fluorescenčná mikroskopia alebo kvantitatívna laserom stimulovaná fluorescenčná mikroskopia vlnového poľa, „vysoko presná spektrálna mikroskopia“, „vysoko presná mikroskopia vo vysokom rozlíšení s veľkým rozlíšením“, ktorá presahuje hranice klasickej mikroskopie s vysokým rozlíšením. Realizovať objekty. Z dlhodobého hľadiska sa objavujú možnosti uskutočniť svetelné mikroskopické vyšetrenia priestorovej topológie genómu v trojrozmerne konzervovaných („neporušených“) bunkových jadrách s „ekvivalentným“ molekulárnym rozlíšením, a tak prispieť k hlbšiemu pochopeniu vzťahu štruktúry a funkcie ľudského genómu.

=== CENA KLAUS GOERTTLER ===

=== ŠTANDARDIZÁCIA A KONTROLA KVALITY ===

=== PERIFÉRNA KRV A KOSTNÁ MARÓNA ===

32. PRIETOKOVÁ CYTOMETRICKÁ ANALÝZA ANTIGÉNOVÝCH PEPTIDOV NA BUNKÁCH PREDSTAVUJÚCICH ANTIGÉN
D. Kunkel, A. Scheffold a A. Radbruch,
Nemecké výskumné stredisko pre reumatizmus v Berlíne
Na kontrolu imunitnej reakcie musia pomocné T-lymfocyty rozpoznať svoj špecifický antigén vo forme antigénnych peptidov, ktoré sú spracované bunkami prezentujúcimi antigén a prezentované na molekulách MHC triedy II.
Použitím haptenizovaného peptidu ovalbumínu sme skúmali prezentáciu tohto peptidu prietokovou cytometriou. Bola demonštrovaná špecifická väzba peptidu na molekulu MHCII. Ďalej sa stanovili podmienky potrebné na absorpciu a prezentáciu, ako aj vzťah medzi koncentráciou peptidu a počtom nanesených molekúl MHCII na bunku.
Naše výsledky ukazujú, že pomocou prietokovej cytometrie je možné detegovať a separovať bunky prezentujúce antigén na základe prezentácie špecifických peptidov.

Icymfocyty sú selektívne filtrované pomocou CPB. Dospeli sme k záveru, že počas chirurgického zákroku bunky s CD3 25 54

fenotyp migruje do samostatných častí organizmu (navádzanie). Vďaka svojej zvýšenej schopnosti produkovať a vylučovať cytokíny môžu byť tieto bunky čiastočne induktormi lokálnych zápalov a pooperačného CLS. (Podporované saským ministerstvom vedy a umenia).

=== ANALÝZA ŽIVOTNÉHO PROSTREDIA ===

=== NOVÉ METÓDY A APLIKÁCIE ===

=== PLAGÁTOVÉ ZASADNUTIE ===

53. AKO HUSTÁ JE VAŠA SEKCIA? - JEDNODUCHÁ METÓDA NA HODNOTENIE HRUŠKY SEKCIE PARAFÍNOVÝCH SEKCIÍ
Gschwendtner A., ​​Lorenz M., Mairinger T.
Dpt.Pathology, University of Innsbruck, Innsbruck, AUSTRIA
Presné meranie hrúbky parafínových rezov použitých pri akomkoľvek druhu kvantitatívnej analýzy (napr. DNA - cytometria, IHC farbenie - kvantifikácia, stereologické metódy) je dôležité pre získanie spoľahlivých výsledkov. Aj keď je možné hrúbku rezu merať s veľkou presnosťou a presnosťou pomocou konfokálnej laserovej mikroskopie, sú tieto prístroje drahé a pre mnohé laboratóriá nie sú ľahko dostupné. Tento príspevok popisuje jednoduchú metódu na kvantifikáciu hrúbky rezu skutočne spracovaného parafínového rezu, ktorý sa skutočne používa na analýzu obrazu.
Na dosiahnutie tohto cieľa je daná časť rozdelená na dve časti, väčšia sa používa na kvantifikáciu, zatiaľ čo tá menšia je znovu zaliata a resekovaná cez svoju hrúbku. Hrúbku znovu vloženého rezu je možné teraz ľahko merať pomocou ľubovoľného zariadenia na meranie dĺžky dostupného v svetelnej mikroskopii.

67. CHROMOZÓMOVÉ ÚZEMIA POČAS BUNKOVÉHO CYKLU SÚ PREMENNÉ
S. Monajembashi, H.Dittmar, C.Bock a K.O. Greulich
Inštitút pre molekulárnu biotechnológiu, Beutenbergstrasse 11, D-07745 Jena, Tel./Fax: ** 49-3641-656409/10
Priestorová korelácia a forma vybraných chromozómov (2, 7, 9, X) v interfázovom jadre boli skúmané metódou Fluorescence in Situ Hybridization (FISH). Na vizualizáciu celých chromozómových sond na maľovanie, ktoré boli zafarbené buď CY3 alebo CY5, sa použila konvenčná epifluorescenčná mikroskopia a spracovanie obrazu. Pretože lymfocyty nie sú synchronizované, na krycom sklíčku sa dajú nájsť medzifázové jadrá v rôznych fázach bunkového cyklu.
Možno pozorovať dva typy obrázkov: a) v niekoľkých prípadoch sú chromozómové domény veľmi kompaktné a zreteľne od seba oddelené a usporiadané do párov homológov. Chromozómy sa objavili na kruhu vo vonkajšom objeme jadra. Pravdepodobne tieto jadrá predstavujú situáciu blízku mitóze. b) vo väčšine prípadov sú domény väčšie a zabalené voľnejšie. Vyplňujú oveľa väčšie oblasti bunkového jadra. Tieto výsledky naznačujú značnú dynamiku území chromozómov počas bunkového cyklu.

71. PRIETOKOVÝ KARYOTYP INTERFÁZOVÝCH CHROMOZÓMOV ARABIDOPSIS THALIANA
Tatiana 1. Samoylova, Armin Meister a Simon Misera
Inštitút pre genetiku rastlín a výskum plodín, D-06466 Gatersleben
Obsah DNA v rôznych aneuploidných líniách Arabidopsis thaliana bol stanovený prietokovou cytometriou na DAPI zafarbených medzifázových jadrách v suspenzii a porovnaný s divokým typom. Odchýlky všetkých línií od divokého typu boli veľmi ľahko reprodukovateľné a umožňovali odhad relatívneho obsahu DNA každého chromozómu Arabidopsis alebo jednotlivých ramien chromozómu.
S výnimkou línie s najmenším telotrizómom (Tr 3A) vykazovali všetky vyšetrované trizómy významné rozdiely od divokého typu. Z toho možno vyvodiť, že za súčasných experimentálnych podmienok možno zistiť rozdiely, ktoré presahujú 3% genómu Arabidopsis.
Súčet všetkých rozdielov medzi jednotlivými trizómami a divokým typom sa dobre zhodoval s očakávaným obsahom DNA pre súbor haploidných chromozómov.

74. GALECTÍN -1 SPROSTREDKOVANÁ IMUNOSUPRESIA JE SPOJENÁ S INDUKCIOU APOPTÓZY
U. Schulz 1, str. Neels 2, J. Brock 2, H. Walzel 2
Imunologický ústav 1 Ústav lekárskej biochémie 2, Rostocká univerzita v Nemecku
Placentárny galektín -1, člen rodiny galektínov rozpustných proteínov viažucich 13-galaktozidy, inhibuje aloantigénom indukovanú a mitogénom indukovanú proliferáciu ľudských lymfocytov periférnej krvi. Zistilo sa, že inhibícia proliferácie sprostredkovaná galektínom -1 ľudskej leukemickej T-bunkovej línie Jurkat je spojená so zvýšením intracelulárnej koncentrácie vápnika ([Ca2+] i) a indukciou apoptózy.
Merania prietokovou cytometriou odhalili, že lektín indukuje časovo a koncentračne závislé zvýšenie expresie fosfatidylserínu, ako sa zistilo farbením anexínom-V FITC/PJ. Zistilo sa, že tieto účinky na expresiu fosfatidylserínu sú v prítomnosti laktózy výrazne znížené. Fragmentácia DNA sa objavila na agarózových géloch ako rebríkový obraz po inkubácii Jurkat T buniek s galektínom -1 počas 6 hodín. Tieto výsledky naznačujú, že galektín -1 moduluje imunitnú odpoveď indukciou apoptózy v aktivovaných T bunkách.