Faktor nekrózy nádorov (tnf alfa) Synevo Moldavsko

Informovaťtii Všeobecné a odporúčania pre stanovenie TNF-α

faktor

TNF (tumor necrosis factor) je prozápalový cytokín, ktorého názov je odvodený od schopnosti ničiť nádorové bunky a indukovať hemoragickú nekrózu u nádorov transplantovaných myšiam 5. .

TNF-a (kasektín) a TNF-p (lymfotoxín) boli pôvodne opísané ako cytotoxické faktory produkované makrofágmi, respektíve lymfocytmi; Následne sa zistilo, že TNF-a a TNF-p sú dva proteíny, ktoré vykazujú homológiu s 34% aminokyselinových sekvencií 3; 5. Oba mediátory pôsobia na cieľové bunky prostredníctvom rovnakých receptorov, a preto majú podobné, ale nie identické biologické účinky.

Gén pre TNF-a je lokalizovaný na chromozóme 6. V podmienkach denaturácie je TNF-a neglykozylovaný 17 kDa proteín. Biologicky aktívna forma TNF-a je trimér. Okrem tejto rozpustnej formy existuje aj forma viazaná na membránu (28 kDa), ktorá sa nachádza na povrchu buniek produkujúcich TNF-a a ktorá slúži ako zásoba rozpustnej formy generovanej proteolytickým štiepením 3. .

TNF-a nie je produkovaný iba makrofágmi a monocytmi, ale aj lymfocytmi, žírnymi bunkami, neutrofilmi, keratinocytmi, astrocytmi, mikrogliami, bunkami hladkého svalstva a niektorými líniami nádorových buniek 5. Veľké množstvo TNF sa uvoľňuje pri kontakte makrofágov, CD4 + T lymfocytov a prirodzených zabíjačských (NK) buniek s lipopolysacharidmi, bakteriálnymi produktmi a interleukínom 1 3 .

TNF-a účinkuje priamo cez dva odlišné povrchové receptory, nazývané TNFR I a TNFR II, ktoré majú rôzne molekulové hmotnosti 3, 4, 5. Tieto receptory možno identifikovať na všetkých bunkových typoch okrem erytrocytov. Časti týchto receptorov sú štiepené proteázami a dostávajú sa do extracelulárneho prostredia tvoriaceho rozpustné receptory; pôsobia ako endogénne inhibítory TNF-a a tak regulujú hladinu extracelulárneho TNF-a4 .

Väzba TNF-a na receptor spôsobuje konformačné zmeny v štruktúre receptora, čo vedie ku kaskádovej aktivácii transkripcie ďalších proteínov podieľajúcich sa na bunkovej proliferácii, zápalovej reakcii a bunkovej apoptóze. TNF-α môže pôsobiť lokálne parakrinne (lokálne zvýšenie koncentrácie TNF môže spôsobiť hlavné príznaky zápalu: začervenanie, bolesť, teplo a opuchy) alebo môže pôsobiť na diaľku, podobne ako endokrinné hormóny 5. Vďaka prítomnosti svojich receptorov vo väčšine tkanív má TNF-α širokú škálu biologických účinkov:

  • cytolytické a cytostatické účinky na nádorové bunky;
  • chemotaktický účinok na neutrofily 3;
  • zvyšuje permeabilitu endotelových buniek v oblasti so zápalom; spôsobujú nielen akumuláciu imunitných buniek, ale majú tiež vplyv na proces zrážania;
  • aktivuje rôzne metabolické procesy vo svalových bunkách a adipocytoch na zabezpečenie energie potrebnej na zápalovú reakciu 1;
  • na úrovni makrofágov stimuluje fagocytózu a produkciu prostaglandínu E2;
  • zvyšuje sa inzulínová rezistencia v iných tkanivách;
  • aktivuje osteoklasty, takže stimuluje resorpciu kostí;
  • je rastový faktor pre fibroblasty a stimuluje syntézu kolagenázy;
  • zosilňuje proliferáciu T lymfocytov po stimulácii interleukínom 2 3;
  • spôsobuje anorexiu a horúčku, pôsobí ako endogénny pyrogén 1;
  • je zodpovedný za syndróm kachexie spojený s malígnymi procesmi a väčšinou parazitárnych infestácií 5 .

Stanovenie TNF-a v sére je markerom systémovej zápalovej reakcie (SIRS) spojenej so sepsou, traumou a srdcovým zlyhaním. Niektoré štúdie preukázali súvislosť koncentrácie TNF-a v mozgovomiechovom moku so stupňom aktivity pri roztrúsenej skleróze; na druhej strane by stanovenie TNF-α mohlo byť užitočné pri odlíšení bakteriálnej meningitídy od iných príčin meningitídy 1 .

Štúdie na zvieratách preukázali, že TNF-a sa podieľa na patogenéze reumatoidnej artritídy a zápalových ochorení čriev vďaka svojmu prozápalovému účinku aktiváciou endotelových buniek a indukciou chemotaxie neutrofilov. Z tohto dôvodu zahŕňa liečba týchto stavov aj inhibítory TNF-a: buď anti-TNF-a monoklonálne protilátky (infliximab, adalimubab), alebo fúzne proteíny protilátka-receptor, TNFRII-IgG1 (etanercept) 5 .

Hladinu TNF-α možno použiť pri diagnostike porúch imunity a pri monitorovaní liečby iba v korelácii s doplňujúcimi klinickými a paraklinickými údajmi 2. .

Výcvik pacientov - nalačno (nalačno) alebo po jedle 2 .

Odobratý exemplár - príde krv 2 .

Zberová nádoba - vacutainer bez antikoagulancia, s/bez separačného gélu 2 .

Zozbierané množstvo - minimálne 0,5 ml ser 2 .

Príčiny odmietnutia dôkazov - vzorka s vysokou hemolyzáciou, žltačkou, lipemickým alebo bakteriálnym znečistením; vzorky, ktoré nedorazili do laboratória, zmrazené 2 .

Po zbere potrebné spracovanie - sérum sa oddelí centrifugáciou čo najskôr po úplnom vytvorení tvarohu a vzorka sa okamžite zmrazí na -20 ° C; vzorky odobraté mimo laboratórnych miest budú prepravené do nádoby určenej na zmrazené vzorky 2 .

Vyskúšajte stabilitu - sérum je stabilné 1 mesiac pri -20 ° C; nerozmrazujte/nezmrazujte 2 .

Metóda - enzýmová imunotest EIA 2 .

Referenčné hodnoty 1 - 2 .

Interpretácia výsledkov

Zvýšené hladiny TNF-α sa zaznamenávajú pri sepse, traume, autoimunitných a chronických zápalových ochoreniach (reumatoidná artritída, ankylozujúca spondylitída, Crohnova choroba, psoriáza), infekčných chorobách a odmietnutí štepu 2. .

1. Hans D. Volk, Gernot Keyser, Gerd R. Burmester. Cytokíny a receptory cytokínov. In Clinical Laboratory Diagnostics-Use and Assessment of Clinical Laboratory Results. Lothar Thomas. TH-Books Verlagsgesellschaft mbH, Frankfurt/Main, Nemecko, 1. vyd. 1998, 764-772.

2. Laboratórium Synevo. Konkrétne odkazy na použitú technológiu spracovania 2010. Typ odkazu: Katalóg

3. Laboratory Corporation of America. Sprievodca adresárom služieb a výkladom. Faktor nekrózy nádorov-α. www.labcorp.com 2010. Typ odkazu: Internetová komunikácia.

4. Magda Black. Zápal. In Základy reumatológie. Vydavateľstvo Amaltea, 2007, 56.

5. Richard A. McPetersen, Matthew R. Pincus. Imunológia a imunopatológia. In Henry’s Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods - Sauders Elsevier 21. vydanie 2007, 867.