Genetická predispozícia na celiakiu (HLA-DQ2, HLA-DQ8, HLA-DQ7); Fakultná pohotovostná nemocnica

Genetická predispozícia na celiakiu (HLA-DQ2, HLA-DQ8, HLA-DQ7)

Informácie veľkorysý

Celiakia (nazývaná aj celiakia, intolerancia lepku, gluténová enteropatia, celiakálne alebo netropické sprue) je chronická zápalová porucha trávenia spôsobená požitím lepku, ktorá bráni vstrebávaniu živín, vitamínov a minerálov črevom. Vyznačuje sa citlivosťou udržiavanou po celý život na frakcie gluténu rozpustné v alkohole: pšeničný gliadín a prolamíny z jačmeňa, raže a ovsa, citlivosť zistená u ľudí geneticky náchylných. Z lepkových frakcií je najtoxickejšou zložkou gliadín. Nejde o alergiu, ale o autoimunitné ochorenie sprostredkované T lymfocytmi, pri ktorom sa tkanivová transglutamináza z tenkého čreva vytvára spolu s potravou gliadínom samotným autoantigénom. Pretože iba určité antigény HLA viažu gliadín a prezentujú ho imunitnému systému, choroba sa vyskytuje u nosičov týchto antigénov. To vysvetľuje familiárny charakter tohto ochorenia, pričom sa zaznamenáva prevalencia 10% u príbuzných prvého stupňa postihnutých osôb a zhoda choroby až 70% u monozygotných dvojčiat.

Celiakia je v populácii pomerne častá, v Európe s prevalenciou 1: 200 - 1: 500. Ženy sú postihnuté 2-3 krát viac ako muži.

Rovnako ako v prípade iných autoimunitných zápalových chorôb v patogenéze celiakie sú inkriminované genetické faktory (prítomnosť určitých antigénov HLA), zaťaženie tela lepkom, ako aj ďalšie nedostatočne charakterizované faktory, ktoré uprednostňujú výskyt prejavov u niektorých ľudí s genetickou predispozíciou.

Náchylnosť na celiakiu spôsobujú určité alely HLA triedy 2 v oblasti HLA-DQ. Väčšina pacientov (90-95%) má teda heterodimér HLA-DQ2 kódovaný alelami DQA1 * 05 a DQB1 * 02, zatiaľ čo

5% ukazuje HLA-DQ8 heterodimér kódovaný alelami DQA1 * 03 a DQB1 * 0302. Väčšina pacientov má haplotyp DR3-DQ2 (DRB1 * 0301-DQA1 * 0501-DQB1 * 0201) alebo je heterozygotná pre DR5-DQ7/DR7-DQ2 (DRB1 * 11/12-DQA1 * 0505-DQB1 * 0301/DRB1 * 07- DQA1 * 0201-DQB1 * 0202). To znamená, že dimérna molekula DQ2 pozostávajúca z a reťazca a p reťazca môže byť kódovaná alelami DQA1 * 0501 a DQB1 * 0201 umiestnenými na rovnakom chromozóme (konfigurácia cis - obr. 1A) alebo alelami DQA1 * 0505 a DQB1 *. 0202 umiestnená na rôznych chromozómoch (konfigurácia trans - obr. 1A). Pacienti negatívni na DQA1 * 05 a DQB1 * 02 sú často pozitívni na haplotyp DRB1 * 04-DQA1 * 03-DQB1 * 0302 (haplotyp DR4-DQ8). Molekula DQ8 tiež pozostáva z a reťazca a p reťazec je kódovaný alelami umiestnenými na rovnakom chromozóme (cis konfigurácia - obr. 1C). Veľmi zriedka majú pacienti na sebe iba α reťazec (* 0501 alebo * 0505) alebo iba β reťazec (* 0201 alebo * 0202) heterodiméru DQ2 (polovica heterodiméru DQ2).

genetická

Obr. 1 Tvorba molekúl DQ2 a DQ8

Náchylnosť na ochorenie genotypu HLA-DQ2 sa prenáša autozomálne dominantne alebo autozomálne recesívne v závislosti od predisponujúcich HLA genotypov rodičov (pozri obr. 2A). Náchylnosť na ochorenie genotypu HLA-DQ8 sa prenáša autozomálne dominantne.

predispozícia

Obr. 2 Spôsob prenosu citlivosti súvisiaci s DQ2 (A) a DQ8 (B) v rodinách, v ktorých jeden z rodičov predstavuje príslušný predisponujúci HLA haplotyp a druhý tento haplotyp nepredstavuje. Variant HLA-DQB1 * 0302 sa vždy dedí spolu so sekvenciou HLA-DQA1 * 03 kvôli nevyváženosti väzby.

(Upravené z celiakie, recenzie génov)

Pretože 30% bežnej populácie má jednu z HLA alel spojených s celiakiou (kódujúcich heterodiméry DQ2 a/alebo DQ8) a iba u 3% tých s jedným alebo s dvoma heterodimérmi sa ochorenie rozvinie, identifikácia týchto alel nestanovuje diagnózu, ale naznačuje iba zvýšené riziko. Na druhej strane absencia akejkoľvek alely HLA spojenej s celiakiou túto diagnózu prakticky vylučuje.

Diagnóza celiakie sa potvrdzuje vykonaním biopsie črevnej sliznice, ktorá vykazuje charakteristické zmeny (lézie s rôznou závažnosťou, od atrofie po zmiznutie črevných klkov).

Určité choroby, najmä autoimunitné, sa vyskytujú u pacientov s celiakiou 10-krát častejšie ako v bežnej populácii. Pri ich súčasnom nástupe je celiakia často asymptomatická: Duhringova herpetiformná dermatitída, selektívny nedostatok Ig A, primárna biliárna cirhóza, Sjögrenov syndróm, cukrovka typu I, Downov alebo Turnerov syndróm, Crohnova choroba, ulcerózna kolitída, osteoporóza, autoimunitná tyroiditída.

Vystavenie gluténu je pri celiakii povinné u ľudí s genetickou citlivosťou. Svedčí o tom absencia lézií a symptómov u ľudí s celiakiou, ktorí držali bezlepkovú diétu.

Proteíny v štruktúre lepku sa vyznačujú zvýšeným obsahom prolínu a glutamínu, čo im dáva relatívnu odolnosť voči enzymatickej degradácii a umožňuje im tak udržiavať veľkosť potrebnú na naviazanie na molekuly DQ2 alebo DQ8 na povrchu makrofágov a na stimuluje CD4 + T bunky. V skutočnosti boli T bunky, ktoré reagujú s gluténovými peptidmi v prítomnosti molekúl DQ2 alebo DQ8, izolované zo sliznice pacientov s celiakiou. Na druhej strane T bunky izolované z normálnej sliznice nereagujú na lepok ani u ľudí s DQ2.+.

celiakiu

Obr. 2 Patogenéza celiakie

Tkanivová transglutamináza (tTG) bola identifikovaná ako hlavný autoantigén pri celiakii. Za patologických podmienok môže extracelulárne uvoľnená transglutamináza (tTG) vytvárať komplexy s proteínmi (alebo peptidmi, ktoré vznikajú pri ich hydrolýze) s vysokým obsahom glutamínu, napríklad v pšenici. Tieto komplexy predstavujú neonatigény, ktoré môžu tiež stimulovať produkciu špecifických protilátok; Z diagnostického hľadiska majú protilátky proti tTG pre celiakiu senzitivitu a špecificitu viac ako 95%.

Odporúčania pre stanovenie alel predispozície HLA
• symptomatickí pacienti s nejednoznačnými hladinami anti-tTG protilátok alebo s nepresvedčivým výsledkom biopsie črevnej sliznice;
• predtým symptomatickí pacienti, ktorí sa stali bezpríznakovými po bezlepkovej diéte a ktorí si neželajú podstúpiť provokačný test na lepok;
• symptomatických pacientov, ktorí nereagujú na bezlepkovú diétu;
• diferenciálna diagnostika u pacienta, ktorý má príznaky podobné celiakii;
• príbuzní prvého a druhého stupňa u pacientov s celiakiou;
• hodnotenie pacientov z rizikových skupín uvedených vyššie.

Záverom je možné uviesť, že test je užitočný na vylúčenie celiakie a na identifikáciu rizikových pacientov.

Odporúčania pre stanovenie alel predispozície HLA

nepresvedčivé pri biopsii črevnej sliznice;
• predtým symptomatickí pacienti, ktorí sa stali bezpríznakovými po bezlepkovej diéte a ktorí si neželajú podstúpiť provokačný test na lepok;
• symptomatických pacientov, ktorí nereagujú na bezlepkovú diétu;
• diferenciálna diagnostika u pacienta, ktorý má príznaky podobné celiakii;
• príbuzní prvého a druhého stupňa u pacientov s celiakiou;
• hodnotenie pacientov z rizikových skupín uvedených vyššie.

Záverom je možné uviesť, že test je užitočný na vylúčenie celiakie a na identifikáciu rizikových pacientov.

Odobratý exemplár - príde krv.

Zberová nádoba - vacutainer obsahujúci EDTA ako antikoagulant.

Zozbierané množstvo - toľko, koľko umožňuje vákuum.

Príčiny odmietnutia dôkazov - použitie heparínu ako antikoagulancia; zrážané alebo hemolyzované vzorky; chladené alebo mrazené vzorky.

Vyskúšajte stabilitu - 7 dní pri 2 - 8 ° C.

Metóda a interpretácia výsledkov

Metóda - reťazová polymerizačná reakcia (PCR) s detekciou elektroforézou na agarózovom géle/technikou Dynal SSP (priméry so špecifickou sekvenciou); Genotypy HLA-DQA1 a HLA-DQB1 sa určujú na detekciu prítomnosti alebo neprítomnosti alel spojených s celiakiou HLA-DQA1 * 0501, HLA-DQA1 * 0505, HLA-DQB1 * 0201, HLA-DQB1 * 0202 a HLA-DQB1 * 0202.

Interpretácia výsledkov
Negatívny výsledok pre alely HLA s predispozíciou DQ2 a DQ8 prakticky vylučuje diagnózu celiakie a naznačuje extrémne nízke riziko (
Identifikácia predisponovanej alely HLA u človeka predstavuje kumulatívne 3% riziko vzniku celiakie.

Príbuzný prvého stupňa u osoby s celiakiou, ktorá nesie rovnakú predisponujúcu alelu, má riziko vzniku ochorenia až 40%.

Ľudia s iba genotypom HLA DQ8 majú oveľa nižšie riziko ako ľudia s iba genotypom HLA DQ2.

Medzi pacientmi s iba genotypom HLA DQ8 a tými, ktorí majú iba genotyp HLA DQ2, nie je rozdiel v závažnosti ochorenia.

Ľudia s genotypmi HLA-DQ2 a HLA-DQ8 nemajú vyššie riziko ochorenia v porovnaní s ľuďmi s iba genotypom HLA DQ2; na druhej strane je pravdepodobnejšie, že u týchto ľudí sa ochorenie rozvinie ako u ľudí, ktorí majú iba genotyp HLA DQ8.

Homozygotnosť proti alele DQB1 * 02 u osoby s DQ2 + predstavuje päťkrát vyššie riziko celiakie v porovnaní s inými ľuďmi s DQ2 +. Homozygotnosť proti alele DQB1 * 02 je tiež hlásená častejšie u ľudí s klasickou celiakiou ako u osôb s atypickými prejavmi, ako aj v prípadoch refraktérneho sprue alebo T-bunkového lymfómu spojeného s enteropatiou. bunkový lymfóm = EATL).

U ľudí, ktorí majú iba polovicu heterodiméru DQ2 - iba jeden variant HLA-DQA1 (* 0501 alebo * 0505) ALEBO HLA-DQB1 (* 0201 alebo * 0202), ale nie oboje, sa môže vyvinúť celiakia, ale riziko je v porovnaní s ukazujúci kompletný heterodimér.

Ľudia, u ktorých bola diagnostikovaná predisponujúca alela HLA, budú sérologicky sledovaní každé 3 - 5 rokov.

Limity a interferencie

Identifikácia predisponujúcej alely HLA nedokazuje existenciu celiakie.