História a výskyt plesňovej huby
História a výskyt plesňovej huby Fomes fomentarius vo Švajčiarsku a pokus o jej využitie v kultúre Semestrálna práca Lisa Zimmermann Nature Management Bakalárske štúdium 2008 Dátum predloženia 27.01.2011 Korektori predmetov: Kunz, Guido Ambühl, Daniel ZHAW Grüental Villa Asaad 8820 Wädenswil 8882 Unterterzen
Obsah 1 Úvod. 2 2 Základy. 3 2.1 Nomenklatúra a systematické umiestnenie. 3 2.2 Morfológia. 3 2.2.1 Makroskopicky vnímateľné vlastnosti. 3 2.2.2 Možná zámena. 5 2.3 Biológia a distribúcia. 6 2.3.1 Životný štýl. 6 2.3.2 Výskyt. 7 2.3.3 Hostiteľské stromy. 8 2.4 História škvrnitej špongie vo Švajčiarsku. 9 2.4.1 Stupnica. 11 2.4.2 Lekársky význam. 12 2.4.3 Materiály. 13 3 Materiál a metódy. 14 3.1 Materiál. 14 3.2 Bunkový materiál špongiovej huby. 15 3.3 Skúšobný postup. 16 3.3.1 Príprava kultivačného média. 17 3.3.2 Prenos z huby plexus do škrupiny Pertri. 18 3.3.3 Rozmnožovanie mycélia na živnom médiu. 19 4 výsledky. 20 4.1 Nájdenie špongiovej špongie. 20 4.2 Výsledky prijatia kultúry. 21 4.3 Budúce použitie. 22 4.4 Hasenie požiaru. 24 5 Diskusia. 26 5.1 Dôležitosť výsledkov literárneho výskumu. 26 5.2 Dôležitosť výsledkov adopcie kultúry. 27 Bibliografia. 28 Zoznam obrázkov. 30 Príloha. 34
Tiráž Kľúčové slová AgarAgar kultivačné médium, stromová huba, bukové lesy, štrajk, Fomes fomentarius, huby, pestovanie húb, Porlinge, trama, účinná látka CGM, tinder, tinder huba, tinder huba Navrhovaná citácia Zimmermann, L. (2011): Termín: História a výskyt huby tinder Fomes fomentarius vo Švajčiarsku a pokus o prevzatie kultúry Adresa Lisa Zimmermann Grüental ZHAW 8820 Wädenswil 1
2.3.2 Výskyt Obrázok 7: Mapa Švajčiarska s výskytom tinderovej huby Tinderová huba Fomes fomentarius (L.Fr.) Fr. sa považuje za holarktickú, t. J. S rozšírením v miernom a chladnom pásme severnej pologule až po severnú obratnú oblasť (kruhový objazd). 1961). Aktuálny výskyt skutočnej plesňovej huby Fomes fomentarius (L.:Fr) Fr. v strednej Európe je takmer výlučne určovaný človekom alebo typom lesného hospodárstva. Vzácnosťou sa stala výmena bukových lesov za veľkoplošné zalesňovanie smrekom a predovšetkým čistá údržba lesov, pri ktorej sa okamžite odstraňujú infikované stromy. Zdá sa, že je potrebné, aby huba zostala v jednej oblasti (relatívne veľký počet sporulujúcich plodníc) (Jahn, 1963). Ani situácia nie je iná. Plesnivá huba môže prežiť iba v oblastiach, kde nie je les alebo je obhospodarovaný ťažko. Tieto lesy nájdeme vo Švajčiarsku napríklad v lesných rezerváciách, prírodných rezerváciách alebo v ťažko prístupných oblastiach. 7.
2.3.3 Hostiteľské stromy V závislosti od regiónu má plesňová huba Fomes fomentarius (L.:Fr.) Fr. v Európe rôznych hlavných hostiteľov. V strednej Európe má najradšej buk lesný (Fagus sylvatica). Severne od bukovej hranice je to väčšinou na breze (Betula) a v oblasti Stredozemného mora na rôznych druhoch dubov (Quercus). Tam, kde môže hromadne plodiť na starých kmeňoch bukov, napríklad v prírodných rezerváciách, sa môže rozšíriť aj na ďalšie listnaté stromy. Za týchto okolností sa dokonca našiel na umierajúcom smreku (Picea abies) (Jahn, 1990). Kreisel (1961) uvádza aj jelšu (Alnus), habr (Carpinus betulus), lipu (Tilia), pagaštan konský (Aesculus), gaštan sladký (Castanea), topoľ (Populus), vŕbu (Salix) a brest (Ulmus). Obrázok 8: Bukový les s množstvom odumretého dreva Obrázok 9: Skutočná tinderová špongia na brezách Obrázok 11: Skutočná tinderová huba na gaštane konského Obrázok 10: Spadnutý buk so skutočnými tinderovými hubami a geotropizmom 8
3 Materiál a metódy 3.1 Materiál V nasledujúcej tabuľke je uvedený prehľad materiálov potrebných pri vykonaní tejto práce, ich popis a použitie. Tabuľka 2: Potrebné materiály Počet predmetov Popis Použitie Rôzny alkohol 70% na dezinfekciu pracovných plôch 1 autokláv Dostatok veľkého autoklávu Sterilizácia živného roztoku a všetkého náradia 1 horák plynový horák sterilizačné nástroje s plameňom 1 inkubátorový rast húb v Petriho miskách 1 dezinfekcia rúk Sterilium (BODE Chemie Hamburg) Dezinfekcia rúk pred prácou Rôzne ručné náradie Pinzeta, skalpel Pomôcky na prenos mycélia Rôzne žiaruvzdorné nádoby Plniaci lievik, Erlenmeyerova banka, odmerná banka Pripravte si výživný roztok 1 chladnička Neustále 2–3 skladovanie nepoužitých Petriho misiek Rôzne laboratórne fólie Parafilm 4 IN.X 125FT. Zatváranie Petriho misiek 1 Laboratórne Farbené na bielo, jasne osvetlené Zvyšuje bezpečnosť práce, znižuje kontamináciu 14
Rôzne výživné roztoky slad, kvasnice, agar Potraviny pre plesne Rôzne plastové Petriho misky. Ø 9 cm, sterilná Rastová nádoba na hubu 1 sterilná lavica, značka nie je relevantná Sterilné pracovisko 1 stupnica 0,1 g až 15 g Váženie zložiek živného roztoku 1 ručná píla Silky Oyokoto 270 mm jemná zubná špongia - deliace plodnice 3.2 Bunkový materiál špongiovej špongie Súčasná práca prebiehala od jesene do zimy . Plesnivá huba Fomes fomentarius (L.:Fr.) Fr. sporuuluje iba na jar. Z tohto dôvodu sa skutočná plesňová huba Fomes fomentarius (L.:Fr.) Fr. v tejto práci nerozmnožovala a nekultivovala spórami, ale hubovou sieťou. Obrázok 19: Hubová sieť špongie 15
3.3 Experimentálny postup Na inkubáciu plesňovej huby Fomes fomentarius (L.:Fr.) Fr. je potrebná pravdepodobne nekontaminovaná sieťová huba z plodnice huby a dostatok Petriho misiek so živným médiom. Obrázok 20: Postup skúšky 16
3.3.1 Výroba kultivačného média Receptúra odporúčaná Danielom Ambühlom na výrobu kultivačného média je uvedená nižšie. Jedná sa o výživné médium slad-kvasnice-agar, ktoré je dostatočné na výrobu jedného litra výživného roztoku alebo 30 Petriho misiek. Tabuľka 3: Príprava živného média Množstvo (gramy) Prísady 15 agar agar 12 sladový extrakt 4-5 drevné pelety 0,5 pelety zo sena 0,5 kvasnicových vločiek 0,5 celozrnná špaldová múka 0,1 sójový peptón 1000 voda z vodovodu Postup: 1. Sterilizujte vodu z vodovodu a plniaci lievik 2. Množstvá uvedené v recepte opatrne vložte do sklenených limetkových baniek. Váženie 3. Do sklenenej Lenmeierovej banky pridajte sterilizovanú vodu a dobre ju premiešajte, kým sa agar-agar úplne nerozpustí. 4. Zatvorte otvor sklenenej Lenmeierovej banky vatou a hliníkovou fóliou, aby sa mohla Erlenmeierova banka sterilizovať v autokláve 5. Dezinfikujte celú pracovnú plochu 70% alkoholom a dezinfikujte si ruky. votrite do Sterilium 6. Pripravte sterilne zabalené Petriho misky 7. Opatrne naplňte horúcu živnú tekutinu do Petriho misky pred laminárnym prúdením alebo do sterilnej stolice 8. Keď tekutina vychladne, stuhne 17
3.3.2 Presun z huby plexus do misky Pertri Plodnica je v strede úhľadne rozrezaná ručnou pílkou. Aby sa zistilo, či existujú rozdiely v tom, ktorá časť plodnice sa odoberie, hríbová sieťka sa odstráni zo 4 rôznych miest a prenesie sa do Petriho misiek. Tieto Petriho misky sa umiestnia do inkubátora pri približne 20 - 25 ° C. 1. Vydezinfikujte celú pracovnú plochu na sterilnej lavici 70% alkoholom a ruky si pretrite Steriliom 2. Skalpel a pinzetu zahrejte nad plynovým plameňom 3. Nechajte obidve vychladnúť, aby bolo možné z plodnice odstrániť kúsok plesňového tkaniva a preniesť ho na Petriho misku 4. Vzduchotesnú Petriho misku s Parafilmom zavrieť 5. Skalpel a pinzetu vložte do alkoholu a potom znovu zohrejte Obrázok 21: FF1 Obrázok 22: FF2 Obrázok 23: FF3 18
3.3.3 Šírenie mycélia na živnom médiu S množením mycélia na živnom médiu je možné minimalizovať nečistoty, ktoré sa dostali z tkaniva plodnice do Petriho misky. Nečistoty tu znamenajú kontamináciu baktériami alebo inými spórami húb. Potom, čo je Petriho miska na povrchu dobre prerastená mycéliom, je možné mycélium preniesť do čistej kultúry. Na tento účel sa z Petriho misky vyreže asi 1 cm 2 kus nekontaminovaného mycélia, ktorý sa prenesie do novej Petriho misky a oddelí sa. Tento prenos do nového agarového kultivačného média sa uskutoční trikrát. 1. Skalpel opäť zahrejte nad plameňom 2. Otvorte už prerastené Petriho misky 3. Vystrihnite asi 1 cm 2 kúsok mycélia a preneste ho do prázdnej Petriho misky 4. Petriho misku vzduchotesne uzavrite Parafilmom Obrázok 24: Petriho miska, z ktorej bolo odstránené mycélium na presun na nový agar Kultúrne médiá 19
4 Výsledky 4.1 Nájdenie plesňovej huby Pomocou atlasu šírenia a ústnych odporúčaní niektorých odborníkov sa uskutočnil pokus o nájdenie skutočnej plesňovej huby Fomes fomentarius (L.:Fr.) Fr. Pátranie v kantóne Zürich v Baume, v Sihlwalde a v Rüti-Wald bolo neúspešné. Márne bolo aj pátranie v lese Bonaduz v Graubündene. Ale s pomocou bývalého učiteľa základnej školy v Malanse Andreasa Kesslera sa nakoniec našiel depozit v kantóne Graubünden, v klube Malanser Hochgrichtswald. Obrázok 25: Mapa s lokalitami Hochgrichtswald v Kuse je veľmi strmý a okrem cesty veľmi nepriechodný. Lokalita je bukom prevládajúcim, južne exponovaným lesom. Súradnice troch polôh sú nasledujúce: Poloha 1: 766234, 205375 Poloha 2: 766401, 205310 Poloha 3: 766477, 205296 20
Obrázok 31: Tinder nevyvíja plameň, ale intenzívnu žiaru. Pri opatrnom fúkaní môžete brať jemný materiál, ako napríklad brezovú kôru, seno, vŕbovú vetvu, bodliakovú vlnu, vatovú trávu, rákos a staršiu dreň, mach, zuhoľnatenú ovčiu vlnu alebo páperie zvyšuje. Zrazu je teplota taká vysoká, že sa rozsvieti plameň. Obrázok 33: Po zapálení plameňa je možné naniesť veľmi jemný materiál, ktorý bol pripravený vopred. Ak sa tým horí aj hrubší a na vrch je položený hrubší materiál Obrázok 34: Hneď ako všetko zhorí, dá sa to do krbu a nahromadí sa čoraz väčšími kusmi dreva. A čoskoro budete cítiť útulné teplo prehistorického ohňa, ktoré bolo obzvlášť dôležité v zime. 25
Senn, B., Bieri, G., Egli, S. (2007): Červený zoznam Červený zoznam ohrozených druhov vo Švajčiarsku: veľké huby. Vydanie 2007. 92 s. FOEN Flück, M. (2006): Pilzführer Schweiz, Haupt Verlag Internet Michael Finkeldey: http://dgfm-ev.de/index.php?id=pdj_1995 (22.10.10) Hartmut Albrecht: http: //www.feuer-steinzeit.de/ressourcen/zunder.php (22.10.2010) Rühle Wilfried http://www.aglycon-mycoton.net/7.html http: //www.cgm-medical-wellness. eu/epages/62455376.sf/de_de /? objectpath =/shopy/6245 5376/Categories/Die_Innovation (20. decembra 2010) http://www.landschaftsmuseum.de/seiten/material/zunder.htm (20. decembra 2010) http: //www.speerschleuder.de/peripherie/main4.html (30.11.2010) http://www.wsl.ch/dienstleistungen/inventare/pilze_flechten/swissfungi/verbreitungsatlas/ind ex_de (1.9.2010) http: // drakensang2.wikia.com/wiki/zunderschwamm (30. novembra 2010) 29
Obrázok 13: Hľuzy markazitu s nárazovou jamkou, možným netopierom z huby pazúrik a troud (Fomes fomentarius) Neskoré neolitické náleziská Portalban a Montilier FR. Zdroj: http://rumaenien-adventskalender.de/05/20051209.php. 9 Obrázok 14: Trama sa spracováva. Zdroj: http://www.norwegen-freunde.com/sopp/text/pdm_zunder.php. 10 Obrázok 15: Sponge man v Rumunsku. Zdroj: http://www.norwegen-freunde.com/sopp/text/pdm_zunder.php. 10 Obrázok 16: Klobúk Tinder huba. Zdroj: http://www.feuer-steinzeit.de/ressourcen/zunder.php. 13 Obrázok 17: Tinder huba klobúk z Rumunska. Zdroj: http://www.norwegen-freunde.com/sopp/text/pdm_zunder.php. 13 Obrázok 18: Vrecko na špongiu Tinder z Rumunska. Zdroj: http://www.norwegen-freunde.com/sopp/text/pdm_zunder.php. 13 Obrázok 19: Hubová sieť špongie. Zdroj: Lisa Zimmermann. 15 Obrázok 20: Skúšobný postup. Zdroj: Lisa Zimmermann. 16 Obrázok 21: FF1. Zdroj: Lisa Zimmermann. 18 Obrázok 22: FF2. Zdroj: Lisa Zimmermann. 18 Obrázok 23: FF3. Zdroj: Lisa Zimmermann. 18 Obrázok 24: Petriho miska, z ktorej bolo odstránené mycélium. Zdroj: Lisa Zimmermann. 19 Obrázok 25: Mapa s lokalitami. Zdroj: www.map.geo.admin.ch. 20 Obrázok 26: Petriho miska úplne zarastená mycéliom. Zdroj: Lisa Zimmermann. 21 31
Zoznam tabuliek Tabuľka 1: Systematické umiestnenie špongie. Zdroj: Lisa Zimmermann. 3 Tabuľka 2: požadované materiály. Zdroj: Lisa Zimmermann. 14 Tabuľka 3: Príprava živného média. Zdroj: Lisa Zimmermann. 17 Tabuľka 4: Výsledok množenia na Petriho miskách. Zdroj: Lisa Zimmermann. 21 33