Klinická chémia kriticky hodnotí laboratórne výsledky PZ - Pharmazeutische Zeitung
Falko Strotmann/Máloktorá lekárska diagnóza sa zaobíde bez laboratórnych testov. Samotný laboratórny nález však nedokáže odlíšiť chorého od zdravého človeka. Spoľahlivú diagnózu umožňuje iba kombinácia laboratórnych hodnôt, klinického vyšetrenia a anamnézy. V lekárni majú stále miesto aj klinické chemicko-analytické analýzy.
Klinicko-chemické analýzy môžu poskytnúť obrovský informačný obsah aj z najmenšieho množstva materiálu vzorky, ak sú vykonané a interpretované správne. Každá laboratórna hodnota je uvedená s príslušným odkazom. Referenčné rozsahy platia pre veľkú väčšinu parametrov, napríklad pre hladinu cukru v krvi nalačno, pečeňové enzýmy alebo elektrolyty. Na druhej strane, napríklad pre nádorové markery je určená horná hranica - medzná hodnota - ktorej prekročenie je potrebné hodnotiť ako podozrivé. Platí nasledujúce: Ak je limit klinického rozhodnutia nastavený na príliš nízku hodnotu, väčší počet vyšetrených bude nesprávne klasifikovaný ako chorý. Naopak, príliš vysoká limitná hodnota ukrýva riziko prehliadania chorôb.
Štatistické stanovenie referenčných hodnôt
Referenčné rozpätie sa zvyčajne volí tak, aby sa všetky výsledky považovali za normálne a boli v rozmedzí dvoch štandardných odchýlok pod a nad priemernou hodnotou reprezentatívneho kolektívu. Ak nemožno predpokladať normálne rozdelenie, 2,5 percenta testovaných osôb sa namiesto toho neberie do úvahy pri dolnej a hornej hranici, takže spodná hranica zodpovedá 2,5 percentilu a horná hranica 97,5 percentilu (95 percent - Interval). Výsledkom je, že nameraná hodnota je mimo referenčného rozsahu u každého 20. zdravého človeka, bez toho, aby sa to považovalo za patologické.
Referenčné rozsahy sa stanovujú štatisticky zo skupiny porovnateľných zdravých jedincov (rámček). Výber kolektívu je veľmi dôležitý. Napríklad v USA a Kanade zákon vyžaduje obohatenie múky kyselinou listovou, aby sa zabránilo chybám neurálnej trubice (1). Severoameričania majú preto v priemere podstatne vyššie hladiny kyseliny listovej ako Európania, čo treba brať do úvahy pri stanovovaní referenčných rozsahov pre príslušné krajiny.
"width =" 220 "height =" 317 "/>
Krv je nielen špeciálny džús, ale aj obzvlášť zmysluplný. Odrážajú sa tu fyziologické a patofyziologické procesy.
„Hemoglobín od včera klesol z 15,3 na 15,0 g/dl!“ Toto tvrdenie môže byť obsahovo správne, ale ukazuje, že klinicko-chemická analýza je málo pochopená. Výsledky merania a referenčné rozsahy sa líšia v závislosti od analytickej metódy a výrobcu skúšky a často sa vzťahujú iba na presne opísanú metódu. Analýzy pre následné kontroly a kontroly terapie by sa preto mali vždy robiť rovnakou metódou. Výkyvy súvisiace s metódou až do 5 percent medzi opakovanými meraniami a 10 percentami zo dňa na deň sú tolerovateľné a je ťažké sa im vyhnúť, v neposlednom rade preto, že biologická variabilita je niekedy ešte väčšia (2).
Až na niekoľko výnimiek (markery zápalu, elektrolyty) parametre merania nevykazujú žiadne náhle zmeny. Ak je to možné, mal by sa preto výsledok merania hodnotiť aj na základe predchádzajúcich výsledkov pacienta - trendu. Je potrebné poznamenať, že niektoré nádorové markery môžu v závislosti od ich polčasu rozpadu klesnúť na normálne hodnoty v priebehu niekoľkých hodín po chirurgickej resekcii nádoru.
Vzorka krvi v správnej skúmavke
Pre správnu analýzu krvných parametrov má, okrem iného, veľký význam výber správnej odberovej trubice. Rúrky obsahujú rôzne prísady a dajú sa rozlíšiť podľa farebného viečka (obrázok 1). Význam rôznych prísad pre plánovanú analýzu je vysvetlený nižšie.
"width =" 260 "height =" 187 "/>
Obrázok 1: Skúmavky na odber vzoriek s rôznymi prísadami sa dajú rozlíšiť podľa farebného označenia (zľava). Biela: neutrálna tuba bez prísady; hnedá: gélová skúmavka na oddeľovanie séra; ružová: skúmavka EDTA na krvný obraz; žltá: NaF skúmavky na stanovenie glukózy; zelená: citrátové skúmavky na diagnostiku koagulácie; modrá: skúmavka s heparínom NH4; oranžová: skúmavka s lítnym heparínom; žltá: skúmavky na moč (všetky skúmavky Monovette® od spoločnosti Sarstedt)
Fotografie: Labor Volkmann
Koagulácia začína prakticky okamžite po odbere krvi. Ak je celá krv centrifugovaná po ukončení zrážania (asi 20 až 60 minút), je možné oddeliť bunkovú časť (hematokrit) od séra. Na odber séra sa ustálilo používanie separačných gélových skúmaviek. Vďaka svojej hustote leží gél, ktorý obsahuje, na vrchu krvného koláča ako separačná vrstva počas centrifugácie a vytvára stabilnú difúznu bariéru, ktorá zabraňuje opätovnému zmiešaniu.
Krv antikoagulovaná K2-EDTA sa používa na vytvorenie krvného obrazu. EDTA (etyléndiamíntetraacetát) zabraňuje koagulačnej kaskáde komplexovaním vápniku bez toho, aby príliš ovplyvňoval morfológiu krvných buniek. Krv EDTA je však nevhodná na diagnostiku koagulácie, pretože koagulačné faktory sú nenávratne inaktivované. Citrátová krv je na to vhodná. Antikoagulácia s citrátom tiež prebieha prostredníctvom väzby vápnika. Krátko pred analýzou sa koagulačné faktory znovu aktivujú pridaním definovaného množstva vápnika (3).
Ak je celá krv zrážaná antikoagulanciami, ako je heparín, EDTA alebo citrát, a potom je odstredená, získaným supernatantom je plazma, ktorá na rozdiel od séra stále obsahuje koagulačné faktory. Okrem vápnika EDTA komplexuje aj katióny kovov, ako sú Zn 2+ a Mg 2+, z aktívnych centier degradujúcich enzýmov a umožňuje tak stanovenie proteínov a nestabilných analytov, ako je ACTH (adrenokortikotropný hormón), histamín, kalcitonín alebo paratyroidný hormón. Je zrejmé, že z plazmy EDTA už nie je možné určiť veľa enzýmov. Citrát Na3, K2 EDTA, Li a NH4 heparín navyše kontaminujú plazmu katiónmi, a tým falšujú hodnoty elektrolytov a stopových prvkov. Heparín vytláča niektoré analyty z ich väzobných proteínov, takže v sére by sa mali merať hormóny a najmä ich voľné zložky.
Jeden z najbežnejších laboratórnych testov je tiež jedným z najviac podceňovaných preanalyticky: stanovenie hladiny cukru v krvi (2). Pretože erytrocyty v celej krvi naďalej spotrebúvajú glukózu, koncentrácia glukózy klesá každú hodinu až o 10 percent. Okrem rýchleho oddelenia krvných buniek od séra sa osvedčilo pridanie inhibítorov glykolýzy, ako je fluorid sodný (NaF). Okrem séra je preto krv NaF vzorkovým materiálom vybraným na stanovenie hladiny cukru v krvi a ďalších rýchlo odbúravaných metabolitov, ako je laktát a pyruvát.
Ostatné materiály: moč a alkohol
Ľahko získateľným testovacím materiálom je spontánny moč. Mnoho analytov sa vylučuje v koncentrovanej forme močom a dá sa tu ľahšie zistiť ako v krvi, napríklad lieky a dopingové látky, hormonálne metabolity, katecholamíny alebo mikróby (3). Koncentrácia analytov však značne kolíše v závislosti od objemu vylúčeného moču. Zber moču v priebehu 24 hodín (24-hodinový moč) je preto užitočnejší, aj keď zložitejší.
Mnoho fyziologických a patologických procesov v centrálnom nervovom systéme (CNS) nie je možné zaznamenať v krvi, pretože výmena látok medzi krvou a CNS je výrazne obmedzená hematoencefalickou bariérou. Priama analýza nervovej vody, mozgovomiechového moku, predchádza tomuto problému. Odber CSF pomocou lumbálnej punkcie je zložitý, ale nevyhnutný pre diagnostiku demyelinizačných a demenčných chorôb, ako aj infekcií centrálneho nervového systému.
Výsledok analýzy môže ovplyvniť aj materiál vzorkovacej nádoby. To platí napríklad pre markery demencie v CSF, ako sú p-amyloid, tau proteín a fosfo-tau. V mozgovomiechovom moku pacientov s Alzheimerovou chorobou sú hodnoty p-amyloidu znížené a hodnoty tau proteínu a fosfo-tau zvýšené. Vysoko sfalšované nízke výsledky sa dosahujú zo sklenených a polystyrénových trubíc v dôsledku výrazných adhéznych účinkov na stenu cievy (6). Pre rúrky vyrobené z polypropylénu nie sú opísané žiadne procesy adhézie. Pretože adhézia začína okamžite, musí sa výluh už odobrať do vhodnej skúmavky.