Laktátdehydrogenéza (LDH) - izoenzýmy (analýza) - Synevo
Všeobecné informácie
LDH je oxidoreduktáza, ktorá sa zúčastňuje anaeróbnej glykolýzy a katalyzuje reverzibilnú reakciu premeny kyseliny mliečnej na kyselinu pyrohroznovú. Je to tetramérny cytoplazmatický enzým, ktorý sa skladá z podjednotiek H (srdce) a M (sval), ktoré sú v tele široko rozšírené a nachádzajú sa hlavne v obličkách, myokarde, kostrových svaloch, mozgu, erytrocytoch, pečeni a pľúcach.
LDH je nešpecifický indikátor poškodenia tkaniva. Na identifikáciu zdroja zvýšenia enzymatickej hladiny je potrebné izolovať a kvantifikovať 5 rôznych frakcií LDH, ktoré sú výsledkom kombinácie dvoch typov monomérov H a M v rôznych pomeroch: LDH-1 (H4), LDH-2 (H3M), LDH-3 (H2M2), LDH-4 (HM3) a LDH-5 (M4).
Tkanivová špecifickosť sa odvíja od skutočnosti, že v určitých tkanivách existuje špecifická syntéza rôznych podjednotiek v presne stanovených pomeroch. Srdcové bunky, erytrocyty a obličky teda prednostne syntetizujú podjednotky H. (LDH-1-H4), zatiaľ čo hepatocyty syntetizujú takmer výlučne podjednotky M. Skeletálne pruhované svalstvo tiež vo veľkej miere produkuje podjednotky M., takže sa zvyšuje LDH-5. pri poruchách pečene aj svalov. Na označenie srdcovej alebo pečeňovej patológie sa najčastejšie používajú LDH-1 a LDH-5. LDH-2 sa nachádza v erytrocytoch, srdci, obličkách, retikuloendoteliálnom systéme, LDH-3 sa nachádza prednostne v pľúcach, lymfocytoch a pankrease a LDH-4 v priečne pruhovaných svaloch, pečeni, obličkách alebo pankrease 2; 3 .
Odporúčania pre stanovenie izoenzýmov LDH
- Diagnóza srdcových, pečeňových, svalových, obličkových, pľúcnych alebo hematologických ochorení;
- Diferenciálna diagnostika chorôb srdca, pečene, svalov, obličiek, pľúc alebo hematologických chorôb;
- Diagnóza AMI v kombinácii s celkovou kreatínkinázou (CK) a CK-MB;
- Skúmanie nevysvetlených príčin LDH sa zvyšuje;
- Zistenie foriem makro-LDH 3 .
Výcvik pacientov - nalačno (nalačno) alebo po jedle 1 .
Odobratý exemplár - venózna krv 1 .
Zberová nádoba Vacutainer bez antikoagulancia s/bez separačného gélu 1 .
Po zbere potrebné spracovanie - oddeľte sérum odstredením 4 .
Objem vzorky - 2 ml ser 4 .
Dôvody zamietnutia skúsiť - hemolyzovaný exemplár 4 .
Stabilita vzorky - 1 týždeň pri 15-28 ° C. Vzorky by sa NEMALI odosielať chladené alebo zmrazené 4 .
Metóda - elektroforéza 1 .
Referenčné hodnoty 1:
Interpretácia výsledkov
Výrazné zvýšenie aktivity celkovej laktátdehydrogenázy (LDH) alebo izomorfné vzorce (signifikantne vyššie celkové LDH bez percentuálneho zvýšenia frakcie) možno pozorovať pri megaloblastickej anémii, neliečenej pernicióznej anémii, Hodgkinovej chorobe, novotvaroch, kardiorespiračných ochoreniach, hypotyreóze, infekčná mononukleóza alebo iné zápalové stavy, urémia, hypoxia alebo silný šok.
Pri akútnom infarkte myokardu sa zdá, že LDH-1 je zvýšený v sére asi za 10-12 hodín, maximálnych hodnôt dosahuje za 48-72 hodín, potom sa vráti do normálu za 10-14 dní. Pretože tento test nie je špecifický, môže byť nahradený stanovením troponínu T alebo kreatínkinázy-MB (CK-MB), pokiaľ k IMA nedošlo najmenej 24 hodín pred testovaním.
Normálne je pomer LDH-1/LDH-2 podjednotka (1 (alebo aspoň> 0,9) je diagnostický pre AMI, ak sú splnené aj klinické kritériá. Nestabilná angína je spojená so zvýšením LDH-1/LDH-2, ale pri normálnych celkových hodnotách LDH je však pre diagnostiku AMI dôležitý progresívny nárast LDH-1/LDH-2 bez úplnej inverzie.
Pretrvávanie reverzie pomeru LDH-1/LDH-2 v dňoch po akútnom infarkte myokardu môže byť markerom pre opätovný infarkt. Ak je AMI komplikovaná šokom, izomorfný model predchádza zmene pomeru LDH-1/LDH-2.
Ukázalo sa, že zvýšenia pomeru LDH-1/LDH-4 sú lepším indikátorom IMA.
Zvýšené hodnoty LDH-1 spojené so zvrátením pomeru LDH-1/LDH-2 charakterizujú megaloblastickú anémiu (nedostatok kyseliny listovej, perniciózna anémia), hemolytické ochorenie alebo iné formy hemolýzy in vivo, rabdomyolýzy, nadmernej a občasnej fyzickej námahy, infarktu obličiek.
Zvýšené plazmatické koncentrácie LDH-1 možno pozorovať u pacientov s semenníkovým seminómom, neseminomatóznymi nádormi semenníkov alebo dysgerminómom.
Zvýšený pomer LDH-5/LDH-1 môže naznačovať rakovinu prostaty alebo iné nádory.
Nárasty LDH-2, LDH-3, LDH-4 sú nešpecifické a sú spojené so septickým šokom, pľúcnym tromboembolizmom, rozsiahlou pneumóniou, akútnou leukémiou, lymfocytózou, akútnou pankreatitídou, novotvarmi.
Zvýšené hladiny LDH-5 v sére sú spôsobené poškodením priečne pruhovaným svalom (trauma), ochorením pečene (prekrvenie pečene, kongestívne zlyhanie srdca, hepatitída, cirhóza, alkoholizmus, hepatitída vyvolaná chlórpromazínom, otrava tetrachlórmetánom). kožné ochorenia (popáleniny). Niektoré štúdie preukázali pomer LDH-4/LDH-5 v 90% prípadov.
Zvýšenie LDH-5 je významnejšie, ak je spojené aj so zvýšením pomeru LDH-5/LDH-4. Pri stanovení konečnej diagnózy však môžu byť užitočné ďalšie testy, ako sú ALT, GGT, elektroforéza sérových bielkovín a protrombínový čas.
Makroenzýmy sú komplexy enzýmu a imunoglobulínov A alebo G s vysokou molekulovou hmotnosťou, ktoré sa dajú zistiť v sére. Tieto komplexy sú charakterizované abnormálnou migráciou izoenzýmových elektroforetických pásov alebo abnormálnym predĺžením pásma. Aj keď sa nezdá, že by spôsoboval alebo súvisel s akýmikoľvek príznakmi alebo chorobami, prítomnosť makro-LDH môže spôsobiť zvýšenie celkového LDH.
Nedávno bol objavený šiesty izoenzým, ktorý sa nachádza v blízkosti katódy a nazýva sa LDH-6. Nejde o komplex imunoglobulínov a bol opísaný u pacientov s ochorením pečene a má nepriaznivú prognózu. .
Limity a rušenie
pribúdajúce : acebutolol, kyselina valproová, amiodarón, anestetiká, aspirín, azitromycín, azlocilín, kaptopril, cefalosporíny, cimetidín, chlórpromazín, dikumarol, etanol, etretinát, flufenazín, foscarnet, furosemid, heparín, labipurol, nitripol, imipril, nesteroidné protizápalové lieky (napr. diflunisal, ketoprofén, piroxikam), penicilamín, piperacilín, plicamycín, propoxifén, simvastatín, sulfónamidy, tikarcyklín.
klesá : kyselina askorbová, amikacín, antikonvulzíva, klofibrát, enalapril, hydroxymočovina, metronidazol.