Mykologické vyšetrovacie metódy - Altmeyersova encyklopédia - Dermatologická klinika
Autor: Prof. Dr. med. Peter Altmeyer

Posledná aktualizácia: 24. 10. 2017
Synonymá
všeobecné informácie
Extrakcia materiálu (líši sa podľa Maysera)
Postup extrakcie materiálu závisí od postihnutých štruktúr (pozri a. Mykózy).
Čistenie: Prebieha so 70 percentami etylalkoholu alebo izopropylalkoholu. Eliminácia prístupovej flóry a možných sprievodných zárodkov. Žiadne komerčne dostupné dezinfekčné spreje, pretože to nepriaznivo ovplyvní rast húb! Odber vzorky v okrajovej oblasti pokožky sa zmení (tu najsilnejšie škálovanie s najvyššou koncentráciou plesní) Poznámka: Predpokladom je použitie sterilných nástrojov (skalpel, ostré lyžice, nožnice)!
Odstránenie z okrajovej oblasti tupou stranou skalpela. Povrchové a hrubé váhy sú vyhodené (často iba mŕtve huby a veľa nečistôt). Skúmajú sa nižšie jemné šupiny. Jemné vločky sa zbierajú do plastovej nádoby alebo na list papiera na preskúmanie.
Materiál kože medzi prstami sa dajú na vyšetrenia ľahko odstrániť pinzetou a potom ďalej mykologicky spracovať. Na uľahčenie práce je možné použiť rozmetač na prsty na nohe (pozri nižšie). Tinea pedum).
Ak je množstvo materiálu nedostatočné intenzívny náter povrchu štýlovým tampónom navlhčeným v kuchynskej soli. Ten sa natrie priamo na kultivačnú dosku.
exekúcia
Aplikácia na snímku: Niekoľko častíc testovaného materiálu sa umiestni na podložné sklíčko. Pridajte 1 - 2 kvapky 20 - 30% roztoku hydroxidu draselného (KOH; roztok hydroxidu draselného). Potašový lúh maceruje pokožku, vlasy a nechty, čím sa stáva priehľadným. Priložené hubové prvky sú mikroskopicky viditeľné kvôli ich silnejšiemu lomu svetla. Šmykľavka je pokrytá krycím sklíčkom. Zabráňte vzniku vzduchových bublín! Pripravené prípravky sa skladujú vo vlhkej komore (napr. V uzavretej Petriho miske s vlhkou celulózou), kým ich nie je možné vidieť. Trvá rôzne dlho, kým častice pokožky dosiahnu požadovanú priehľadnosť, priemerne okolo 20 minút. Materiál na nechty trvá asi 1 hodinu. Po pridaní roztoku hydroxidu draselného musia byť vlasy rýchlo mikroskopické (vlasy sa rozpadajú veľmi rýchlo; potom už nie je možné priradiť patogén k rastovej forme - ektotrixovej/endotrixovej).
Skrátenie času macerácie: Dá sa dosiahnuť opatrným zahriatím prípravku. Nezahrievajte do varu, aby sa vytvorili kryštály KOH! Kryštály draselného lúhu môžu spôsobiť falošne pozitívne výsledky. Ak sa namiesto hydroxidu draselného použije TEAH (tetraetylamóniumhydroxid - Merck), je možné materiál okamžite preskúmať pod mikroskopom.
Mikroskopia: Na mikroskopické vyšetrenie sa testovací materiál rozotrie vo veľmi tenkej vrstve rovnomerným tlakom na krycí list. Hodnotenie sa vykonáva pomocou svetelného mikroskopu. Znížte kondenzor mikroskopu. Výsledkom je ostrejší obraz. Prípadne: vyšetrenie fázovým kontrastom. Alternatívne: farbenie (konžská červená, Metylénová modrá, Chlorazol Black) z plesňových buniek.
Natívne prípravky pre pityriasis versicolor (Pozri nižšie. Pityriasis versicolor)
Mikroskopické vyšetrenie na identifikáciu na úrovni druhov: Na to sú vhodné trhané prípravky (na sklíčko dajte 1 kvapku laktofenolu, odtrhnite hubové prvky z kultúry, umiestnite na podložné sklíčko a skontrolujte pod mikroskopom), odtrhávací prípravok lepiaceho prúžku (na podložnú sklíčko dajte 1 kvapku laktofenolu, hubové prvky z kultúry odstráňte pomocou lepiacich prúžkov - mierne stlačte), Na podložné sklíčko nalepte lepiace prúžky a skontrolujte ich mikroskopom) alebo kultúru krycieho skla (vyrežte z Petriho misky agarovú kocku 1,0 x 1,0 x 0,5 cm, položte ju na podložné sklíčko, naočkujte bočné okraje, nasaďte krycie sklo, inkubujte niekoľko dní, potom použite mikroskop).
Fluorescenčné vyšetrenie: Farbenie vzoriek akridínovou oranžovou alebo bielou Calcofluor. Farbivá sa viažu na určité polysacharidy alebo na chitín húb (ľudský keratín je iba mierne sfarbený). Hubové prvky vo fluorescenčnom mikroskope svietia nazeleno. Jaskyňa: celulóza (bavlnené vlákna) tiež fluoreskuje.
Rady)
Diferenciácia kvasiniek sa uskutočňuje pomocou kultúry Ryžový agar.
Materiál kože medzi prstami sa dajú na vyšetrenia ľahko odstrániť pinzetou a potom ďalej mykologicky spracovať. Na uľahčenie práce je možné použiť rozmetač prstov (pozri nižšie). Tinea pedum).
Histologické vyšetrenie: V prípade potreby sa môžu na histologickú diagnostiku použiť aj väčšie kúsky nechtov. Patogén sa histologicky detekuje pomocou Odozva PAS.