Profil odhadu rizika rakoviny vaječníkov (HE4, CA 125, skóre ROMA) - Synevo

Test obsahuje CA 125.

odhadu

Všeobecné informácie a odporúčania

Ľudský nadsemenný proteín 4 (HE4) je súčasťou rodiny proteínov srvátkovej kyseliny, ktorej jadro obsahuje 4 disulfidové väzby (WFDC = srvátkové kyslé štvordisulfidové jadro) a ktoré majú inhibičné vlastnosti na trypsín. Substrát aj funkcia HE4 nie sú známe; proteín je pravdepodobne antimikrobiálny a protizápalový prostriedok.

Zodpovedajúci gén HE4 je lokalizovaný na chromozóme 20q12-13.1 a kóduje proteín 13 kD; vo svojej zrelej glykozylovanej forme má proteín molekulovú hmotnosť asi 20 - 25 kD a je zložený z jediného peptidového reťazca obsahujúceho dve domény WFDC (z tohto dôvodu sa mu hovorí aj WFDC2).

Proteín bol pôvodne identifikovaný v epitelových bunkách ľudského distálneho nadsemenníka a považoval sa za jeho špecifický druh, ktorý súvisí s plodnosťou (HE4 = špecifický druh Homo sapiens epididymis). Neskôr sa zistilo, že HE4 je v malom množstve exprimovaný v normálnom epiteli určitých tkanív: reprodukčného traktu (vrátane vaječníkov), horných dýchacích ciest a pankreasu. Jeho expresia sa však významne zvyšuje na úrovni bunkových línií nádorov vaječníkov, pľúc, hrubého čreva a prsníka. Mnoho nezávislých molekulárnych štúdií preukázalo, že gén WFDC2 je nadmerne exprimovaný u pacientov s rakovinou vaječníkov v porovnaní so zdravými ľuďmi 1, 2, 3. Prostredníctvom imunohistochemických štúdií Drapkin a kolegovia preukázali, že expresia HE4 je obmedzená na určité histologické podtypy epiteliálneho karcinómu vaječníkov. HE4 bol teda identifikovaný v 93% seróznych nádorov, vo všetkých prípadoch endometrioidného adenokarcinómu, iba v 50% adenokarcinómov jasných buniek a už vôbec nie v mucinóznych nádoroch 4 .

V roku 2003 Hellström a kolegovia preukázali, že proteín HE4 je detekovaný vo veľkom množstve v sére pacientok s rakovinou vaječníkov. Z tohto dôvodu sa predpokladalo, že HE4 by mohol byť užitočným biomarkerom na odhad rizika rakoviny vaječníkov 1 .

Existuje niekoľko faktorov, ktoré prispievajú k rozšírenej diagnostike rakoviny vaječníkov. Po prvé, nedostatok špecifickosti príznakov (bolesť alebo tlak v panve, pretrvávajúce zažívacie ťažkosti a nadúvanie brucha, močenie) oneskoruje prezentáciu pacientov u lekára a keď navštívia lekára, často nerozpozná dôsledky týchto príznakov. Na druhej strane neexistuje neinvazívne vyšetrenie, ktoré by bolo dostatočne presné na rozlíšenie medzi benígnou a malígnou panvovou hmotou. Pacienti sú zvyčajne vyšetrení panvovým vyšetrením a transvaginálnym ultrazvukom (primárna zobrazovacia metóda na potvrdenie ovariálneho pôvodu hmoty), potom podstúpia prieskumnú operáciu a histopatologické vyšetrenie. Štandardná liečba epiteliálneho karcinómu vaječníkov spočíva vo fáze a primárnej chirurgickej cytoredukácii, po ktorej vo väčšine prípadov nasleduje chemoterapia.

Okrem uvedených vyšetrení a postupov sa osobitný záujem venoval identifikácii biomarkerov, ktoré by boli užitočné pri liečbe pacientok s rakovinou vaječníkov. V súčasnosti najpoužívanejším biomarkerom je nádorový antigén CA 125. Ženy s panvovým nádorom sú teda často testované na CA 125 spolu s transvaginálnym ultrazvukom. Aj keď zvýšené sérové ​​hladiny markera úzko korelujú s epiteliálnym karcinómom vaječníkov (nárast je zaznamenaný v 80% prípadov), vysoké hodnoty možno nájsť aj pri benígnych stavoch, ako je endometrióza, kongestívne zlyhanie srdca, cirhóza pečene, ktoré ich obmedzujú. teda konkrétnosť. Okrem toho sú hladiny CA 125 vyššie u žien pred menopauzou, čo zvyšuje výskyt falošne pozitívnych výsledkov v tejto kategórii pacientov. Na druhej strane má antigén CA 125 citlivosť iba 50% na ochorenie štádia I, čo má nízku užitočnosť na včasné zistenie rakoviny vaječníkov. Po podaní možno použiť sériové stanovenie CA 125 na detekciu recidív choroby 3; 5; 6 .

Ďalším sérovým markerom, ktorý nedávno schválil FDA (jún 2008) na sledovanie pacientok s epiteliálnym karcinómom vaječníkov v kombinácii s inými klinickými metódami, je HE4. Účinnosť tohto markera ako nástroja na sledovanie vývoja ochorenia bola demonštrovaná vyhodnotením zmien v hladinách HE4 v sére v sériových vzorkách od 80 pacientok s rakovinou vaječníkov v porovnaní so zmenami v stave ochorenia. Táto štúdia ukázala, že sériové hladiny HE4 korelovali s klinickým stavom (progresia vs. žiadna progresia) v 70% analyzovaných vzoriek. Ďalej sa zistilo, že HE4 je z hľadiska detekcie recidív choroby prakticky ekvivalentný antigénu CA 125, ale má výhodu v tom, že jeho sérové ​​hladiny sú oveľa menej ovplyvňované benígnymi stavmi. .

Možnosť použitia HE4 ako diagnostického nástroja podporujú nedávne štúdie, ktoré hodnotili niekoľko biomarkerov rakoviny vaječníkov. Huhtinen a jeho pracovná skupina teda uvádzali pre HE4 citlivosť 78,6% na špecificitu 95% pri diferenciácii malígnych nádorov vaječníkov od endometriotických ovariálnych cýst 8. Moore a kolegovia zistili, že z 9 biomarkerov analyzovaných v štúdii mal HE4 najvyššiu účinnosť pri detekcii epiteliálneho karcinómu vaječníkov a mal lepšiu citlivosť ako CA 125 - „zlatý štandard“ pre tento stav (72,9% vs. 43,3% na špecifickosť 95%). To, čo títo vedci chceli zdôrazniť, je to, že citlivosť na HE4 je zreteľne vyššia v štádiu I ochorenia (45,9% so špecifickosťou 95%), čo je situácia, v ktorej izolované stanovenie CA125 nie je dôležité. HE4 má tiež vyššiu citlivosť ako CA 125 u žien pred menopauzou. Ak sa vezmú do úvahy všetky štádiá ochorenia, kombinované použitie antigénu Ca 125 s HE4 poskytuje najvyššiu citlivosť pri identifikácii malignity (špecifickosť 76,4% až 95%) 3 .

Bol vyvinutý algoritmus na odhadnutie rizika epiteliálneho karcinómu vaječníkov - ROMA (Algoritmus rizika malignity vaječníkov) - ktorý zohľadňuje predoperačné hodnoty HE4 a CA 125, ako aj stav pred alebo po menopauze. Algoritmus počíta s pravdepodobnosťou detekcie malígneho procesu vaječníkov pri operácii panvovej masy. V štúdii Moore a kolegovia zistili, že pri špecificite 75% má algoritmus ROMA senzitivitu 94,3% pri rozlišovaní benígneho stavu od epiteliálneho karcinómu vaječníkov vo všetkých štádiách ochorenia; pre štádiá I a II choroby ROMA preukázala senzitivitu 85,3%. Ukázalo sa, že algoritmus ROMA je citlivejší ako index rizika malignity (RMI), ktorý zohľadňuje výsledky transvaginálneho ultrazvuku, stav pred alebo po menopauze a hladiny CA 125 v sére. .

Podľa údajov zverejnených v apríli 2011 boli test HE4 a algoritmus ROMA validované na rozlíšenie benígnych a malígnych hmotností panvy aj v talianskej populácii. .

V septembri 2011 FDA schválila kombinované použitie 2 markerov a algoritmu ROMA pri určovaní rizika rakoviny vaječníkov u žien pred a po menopauze s hmotou panvy 11 .

Záverom možno povedať, že stanovenie HE4 má nasledujúce klinické indikácie:

  • sledovanie vývoja ochorenia a recidív u pacientok s epiteliálnym karcinómom vaječníkov;
  • spolu s CA 125 odhad rizika epiteliálneho karcinómu vaječníkov u žien pred menopauzou a po menopauze s panvovou hmotou.

HE 4 by mohol byť tiež biomarkerom pre rakovinu endometria, sú však potrebné ďalšie štúdie 5 .

Výcvik pacientov - nie je potrebné žiadne špeciálne školenie; stav pred alebo po menopauze musí byť uvedený v poznámke o odporúčaní 5 .

Odobratý exemplár - venózna krv 5 .

Zberová nádoba Vacutainer bez antikoagulancia, s/bez separačného gélu 5 .

Po zbere potrebné spracovanie - sérum sa oddelí odstredením; čerstvé sérum spracujte maximálne 5 hodín; ak to nie je možné, sérum sa skladuje po dobu 48 hodín pri teplote 2 - 8 ° C a potom sa zmrazí na teplotu -20 ° C 5 .

Objem vzorky - minimálne 0,5 ml ser 5 .

Dôvody zamietnutia skúsiť

Stabilita vzorky - sérum je stabilné 2 dni pri 2-8 ° C; 3 mesiace pri -20 ° C; vzorky je možné zmraziť dvakrát 5 .

Metóda - elektrochemilumescenčná (ECLIA) imunochémia 3. Test je štandardizovaný podľa prvého testu HE4 dostupného od spoločnosti Fujirebio Diagnostics, Inc. 5 .

Detekčný limit - 15 pmol/l; kvantifikačný limit 20 pmol/l pri celkovej chybe 30% 5 .

Referenčné hodnoty a interpretácia výsledkov

U žien s panvovou hmotou, u ktorých boli stanovené predoperačné hladiny HE a CA 125, možno skóre ROMA vypočítať takto:

- najskôr vypočítajte prediktívny index (PI) osobitne pre pacientov v pre- a postmenopauzálnom období pomocou rovníc:

premenopauzálne:

PI = -12,0 + 2,38 * LN [HE4] +0,0626 x LN [CA125]

postmenopauzálne

PI = - 8,09 + 1,04 x LN [HE4] + 0,732 x LN [CA125]

- skóre ROMA sa počíta z IP pomocou rovnice:

RÍM (%) = exp (PI)/[1 + exp (PI)] x 100

Po štúdii boli stanovené nasledujúce hraničné hodnoty so špecificitou 75% pre kombináciu testov HE4 a CA 125 vykonaných metódou ECLIA na stratifikáciu pacientov do skupín s vysokým alebo nízkym rizikom na základe skóre ROMA.:

Predmenopauzálne ženy:

Ženy po menopauze:

Podľa štúdie bolo 84,3% pacientok s epiteliálnym karcinómom vaječníkov štádia I-IV správne zaradených do skupiny s vysokým rizikom na základe skóre ROMA a 75,6% žien s benígnou hmotou panvy bolo zaradených do skupiny s nízkym rizikom.

Ak sa HE4 používa v dynamike u pacientok s epiteliálnym karcinómom vaječníkov, zmeny v sérových hladinách ≥ 20% sa považujú za klinicky významné ako z hľadiska rastu (recidívy, progresie ochorenia), tak z hľadiska jeho zníženia (terapeutická odpoveď) 5 .

obmedzenie a rušenie

Hodnoty HE4 by sa mali vždy interpretovať v klinickom kontexte pacientov; HE4 nie je skríningový test na rakovinu.

HE4 môže byť niekedy zvýšený v benígnych podmienkach.

HE4 sa nemá používať na sledovanie pacientov s adenokarcinómom slizníc alebo zárodočných buniek.

Algoritmus ROMA nebol validovaný pre nasledujúce skupiny pacientov:

ROMA nie je diagnostický test, ale nástroj na stratifikáciu pacientok s panvovou hmotou v skupine s nízkym alebo vysokým rizikom pre epiteliálny karcinóm vaječníkov pri operácii 5 .

Aj keď sa v porovnaní s CA125 považuje za oveľa špecifickejší marker pre epiteliálny karcinóm vaječníkov, pre HE4 boli nedávno identifikované niektoré variačné faktory, ktoré je potrebné zohľadniť pri interpretácii získaných výsledkov:

  • vek: medzi HE4 v sére a vekom je zložitý nelineárny vzťah; s každou dekádou života bola teda hlásená tendencia zvyšovať hodnoty HE4 (napríklad pri 60 rokoch sú hodnoty HE4 u zdravých ľudí o 37% vyššie v porovnaní s hodnotami vo veku 20 - 30 rokov);
  • fajčenie: významne ovplyvňuje hladinu HE4 (nadmernou expresiou v bronchiálnom epiteli) 12;
  • ochorenie obličiek: je najčastejšou príčinou falošne zvýšených hodnôt HE4; bol hlásený lineárny vzťah medzi hladinami HE4 v sére a odhadovanou rýchlosťou glomerulárnej filtrácie (eGFR); Na rozdiel od CA125, ktorý má zvýšené hodnoty v pokročilom štádiu chronického ochorenia obličiek, vykazuje HE4 nárast od raných štádií ochorenia; teda ak sú hodnoty HE4 nad hornou hranicou referenčného rozsahu spojené s eGFR 2, na stanovenie rizika rakoviny vaječníkov sa budú brať do úvahy sérové ​​koncentrácie CA125 12; 13 .

Pretože u pacientov liečených chemoterapiou je stupeň poškodenia obličiek pomerne častý, je potrebné tento vplyv zohľadniť aj v prípadoch monitorovania progresie ochorenia a terapeutickej odpovede HE4. .

Môže interferovať s niektorými súčasťami súpravy a viesť k nasledujúcim nepresvedčivým výsledkom: