Protrombínový čas RÝCHLO - Synevo
Synonymné - Rýchly čas, vrátane INR
Všeobecné informácie
Protrombínový čas (PT) hodnotí aktivitu faktorov zapojených do „vonkajšej“ a „bežnej“ koagulačnej cesty: FVII-proconvertin, FX-Stuart-Prowerov faktor, FV-proaccelerin, FII-protrombín a FI-fibrinogén.
Koagulačné faktory II, VII, IX a X sa syntetizujú v pečeni v neaktívnej forme (PIVKA). Tieto proteíny (spolu s proteínmi C, S a Z) majú spoločné jedinečné zvyšky kyseliny y-glutamylkarboxylovej (Gla) na N-konci molekuly, ktoré vyžadujú pre syntézu prítomnosť vitamínu K a sú nevyhnutné pre väzbu vápnika a slúžia ako mostík pre väzbu proteínu na fosfolipidový povrch, respektíve aby bol funkčný.
Výsledkom je, že PT hodnotí tak aktivitu koagulačných faktorov závislých od vitamínu K (menej FIX), faktora V a fibrinogénu, ako aj funkciu syntézy pečeňových proteínov s diagnostickými a terapeutickými dôsledkami 2 .
In vivo je hlavnou cestou iniciácie koagulácie krvi vonkajší systém, ktorý zahrnuje zložky krvi a vaskulárne prvky, iniciácia koagulácie nastáva, keď tkanivový faktor (FT) súvisí s FVIIa. Komplex enzýmov FVIIa-FT aktivuje FIX aj FX, FX je účinnejším substrátom. FXa interaguje so svojím kofaktorom FVa za vzniku protrombinázového komplexu dostatočného na generovanie veľmi malého množstva trombínu v blízkosti buniek exprimujúcich FT.
In vitro, PT meria čas, ktorý uplynul medzi pridaním štandardizovanej zmesi tkanivového tromboplastínu a vápnika do antikoagulovanej plazmy s citrátom, chudobnej na krvné doštičky, a detekcie tvorby zrazeniny, čo predstavuje polymerizáciu fibrínu, ktorá je výsledkom pôsobenia trombínu 8 .
Tkanivový tromboplastín je zmesou fosfolipidových vezikúl a tkanivového faktora. Pretože tkanivový faktor chýba v normálnej plazme, musí sa dodávať z externého zdroja, a preto je kaskáda enzymatických reakcií vyvolaných v PT známa ako „vonkajšia cesta“. Tradične sa tkanivový tromboplastín získaval z extraktu živočíšneho tkaniva (mozog, placenta, pľúca), ale dnes sú k dispozícii zmesi rekombinantného ľudského tkanivového faktora a purifikovaných fosfolipidov, ktoré umožňujú prípravu dobre definovaných tromboplastínov s výhodou nedostatočnej kontaminácie koagulácia (ktorú možno nájsť v tkanivovom faktore extrahovanom z iných zdrojov), čo slúži na zvýšenie citlivosti PT na nedostatky koagulačného faktora. 6.8
Minimálne množstvo trombínu generovaného tkanivovou aktiváciou vonkajšej dráhy je dostatočné na rýchlu tvorbu detekovateľnej zrazeniny v teste PT. Na produkciu normálneho PT nie je potrebná tvorba zosilneného trombínu spojená s druhou fázou koagulácie. To vysvetľuje skutočnosť, že nedostatky faktorov vnútornej dráhy VIII, IX a XI (rovnako ako FXII a FXIII) nespôsobujú predĺženie PT. Fyziologická koagulácia vyžaduje druhú výbušnú fázu tvorby trombínu, ale tvorba zrazeniny v PT nie je 7.8 .
Predĺžená PT indikuje nedostatok jedného alebo viacerých koagulačných faktorov (I, II, V, VII, X) alebo prítomnosť inhibítora. 8
Odporúčania na vykonanie testu
• PT je najbežnejší test používaný na sledovanie perorálnej antikoagulačnej liečby (warfarín), ktorý je citlivý na tri zo štyroch koagulačných faktorov závislých od vitamínu K; 8.9
• skríning vrodených alebo získaných nedostatkov faktorov II, V, VII, X a fibrinogénu;
• prítomnosť inhibítorov proti koagulačným faktorom;
• sledovanie funkcie syntézy bielkovín v pečeni;
• predoperačný skríning hemostázy.
Výcvik pacientov - pôst (napr. pôst) 5 .
Odobratý exemplár - krv príde 5 .
Zberová nádoba - vacutainer s 0,105 M citrátom sodným (citrát sodný - krvný pomer = 1/9).
Tlak vyvíjaný turniketom musí byť medzi hodnotou systolického tlaku a hodnotou diastolického tlaku a nesmie presiahnuť 1 minútu. Ak zlyhala venózna punkcia, nový pokus o rovnakú žilu je možné vykonať až po 10 minútach 5 .
Zozbierané množstvo - toľko, koľko umožňuje vákuum; aby sa zabránilo čiastočnej koagulácii vzorky, bude zabezpečené správne zmiešanie krvi s antikoagulantom inverznými pohybmi trubice (5 - 6 jemných inverzií). 5.6
Príčiny odmietnutia dôkazov - vacutainer, ktorý nie je plný (najmenej 90%); hemolyzovaná alebo koagulovaná vzorka, vzorka odobratá v inej skúmavke ako citrát. 5.6
Po zbere potrebné spracovanie - vzorka sa centrifuguje 15 minút pri 2 500 g 5 .
Vyskúšajte stabilitu - vzorka je stabilná 8 hodín pri izbovej teplote (po 8 hodinách začína inaktivácia faktorov V a VIII); oddelená plazma je stabilná 3 týždne pri -20 ° C; > 1 rok pri –70 ° C 5. Pred analýzou musia byť zmrazené vzorky rýchlo rozmrazené za 3 - 5 minút pri teplote 37 ° C. Roztopenie pri nižších teplotách môže spôsobiť kryoprecipitáciu. 6
Metóda - koagulometria 5 .
Vyjadrenie výsledkov
- ako čas zrážania - v sekundách;
- ako percento (%) normálnej aktivity = aktivita protrombínu (PA); merateľný rozsah = 10 - 100%;
- ako pomer protrombínu (PR = PT pacient v suchu/PT normálna plazma v suchu);
- ako INR (medzinárodný normalizovaný pomer).
Početné medzinárodné štúdie preukázali, že v stabilnej fáze perorálnej antikoagulačnej liečby (ACO) sa výsledky môžu výrazne líšiť v závislosti od tkaniva pôvodu tromboplastínu a od použitého nástroja na ich stanovenie. Na riešenie tohto problému zaviedla Svetová zdravotnícka organizácia od roku 1982 medzinárodný štandardizovaný postup validácie tromboplastínu. Výsledky získané týmto postupom počas stabilizovaného antikoagulačného ošetrenia nezávisia od použitého činidla. Pomer protrombínu sa teda prevádza na INR (medzinárodný normalizovaný pomer) podľa vzorca:
INR = (PTpacient/PTplasma normal) ^ ISI
ISI = medzinárodný index citlivosti použitého tromboplastínu, vypočítaný vo vzťahu k referenčnému tromboplastínu, pre ktorý je ISI = 1. Hodnoty ISI tromboplastínov používaných vo svete sa pohybujú medzi 1 a 3 a sú stanovené výrobcami pre každú dávku reagencií. Čím bližšia je hodnota ISI k 1, tým vyššia je citlivosť činidla na terapiu ACO.
! INR je užitočný iba pre pacientov so stabilnou perorálnou antikoagulačnou liečbou a nemá žiadnu hodnotu pre diagnostiku alebo liečbu pacientov s predĺženou PT z iných dôvodov. .
INR má nižšiu presnosť, ak sa použije na začiatku liečby ACO. Je to však spoľahlivejšie ako nepremenený pomer PT a odporúča sa používať ho ako na začiatku, tak aj počas udržiavacej liečby ACO 1. .
Činidlo používané v laboratóriu Synevo obsahuje tromboplastín pochádzajúci z mozgu králika s ISI = 1,2–1,4.
Referenčné hodnoty
- normálna, aktivita protrombínu> 70%; hodnoty> 100% nemajú klinický význam.
INR = 2,0–3,0 (2,5): pre väčšinu klinických situácií: profylaxia a liečba venóznej trombózy; liečba pľúcnej embólie; profylaxia systémovej embólie u pacientov s fibriláciou predsiení, infarktom myokardu (ak je spojený s aspirínom), reumatickým ochorením mitrálnej chlopne, prolapsom mitrálnej chlopne, kalcifikáciou mitrálneho prstenca, trombom mobilného aortálneho oblúka, biologickými srdcovými chlopňami alebo mechanickými protézami aorty; operácia bedrového a kolenného kĺbu; venózna trombóza; antifosfolipidový syndróm.
INR = 2,5 - 3,5 (3,0): mechanické srdcové chlopne, opakované tromboembolické epizódy u antikoagulovaných pacientov s terapeutickým INR.
INR = 3,0-4,0 (3,5) infarkt myokardu, pacienti s trombózou remitovanou protézou aortálnej mechanickej chlopne.
INR = 3,5 - 4,5 (4,0): pacienti s trombózou remitovanou protézou mitrálnej mechanickej chlopne.
INR = 1,5 - 1,9: pacienti s prvou nevyprovokovanou epizódou hlbokej žilovej trombózy alebo pľúcnej embólie po prvých 3 mesiacoch liečby, ak nie je možné testovať INR v 4-týždňových intervaloch na sledovanie liečby; primárna prevencia infarktu myokardu u vysoko rizikových pacientov 1 .
Antikoagulačná liečba - laboratórna kontrola
Antikoagulačný účinok sa stabilizuje 4 - 5 dní po začiatku liečby. Podľa odporúčaní ACCP by sa malo sledovanie PT/INR začať po prvých 2-3 dávkach perorálneho antikoagulancia a PT by sa malo merať každý deň, kým sa výsledky PT/INR nestabilizujú v priebehu terapeutického intervalu. Ak je potrebný rýchly antikoagulačný účinok, má sa súčasne podať heparín alebo nízkomolekulárny heparín a prekrytie ACO trvá, kým INR nebude 2 po sebe nasledujúce dni v terapeutickom rozmedzí. Frekvencia následných stanovení je určená lekárom na základe súladu pacienta a odpovede na liečbu. Po získaní stabilnej dávky sa odporúča sledovanie v intervale najviac 4 týždňov. Frekvencia stanovenia by sa mala zvýšiť vždy, keď sa zavádzajú alebo prerušujú lieky, ktoré by mohli ovplyvniť účinnosť antikoagulácie 1 .
Na sledovanie liečby každého pacienta sa odporúča použiť iba jednu laboratórnu metódu. 6
Kritické hodnoty: INR> 6 - hemoragické riziko (najmä u pacientov s gastrointestinálnymi ochoreniami, hypertenziou, ochorením obličiek, cerebrovaskulárnymi ochoreniami, protidoštičkovou liečbou, inými potencujúcimi liekmi).
Interpretácia výsledkov
Predĺžený PT (nízky AP): liečba perorálnymi antikoagulanciami, vrodený alebo získaný nedostatok faktorov II, V, VII, X, nedostatok vitamínu K u novorodencov, hemoragická diatéza u novorodencov, ochorenie pečene, obštrukcia žlčníka, poruchy absorpcie v čreve. tukov (napr. vriedok, celiakia, chronické hnačky), podvýživa, CID, Zollinger-Ellisonov syndróm, hypofibrinogenémia (fibrinogén 6
Limity a interferencie
- Činidlo používané v laboratóriu nie je ovplyvnené hladinami fr1UI/ml nefrakcionovaného heparínu a hladinami ≤1,5 anti-Xa IU/ml nízkomolekulárneho heparínu. 5
- Kvalita venóznej punkcie: traumatické manévre, ktoré vedú k uvoľneniu tkanivového tromboplastínu a nedostatočne odobratých vakutainerov, zmenou pomeru krv-citrát vedú k skráteniu PT.
- Pri hodnotách hematokritu nad 55% je plazmatická koncentrácia citrátu abnormálne vysoká a objem antikoagulancia/krvi by sa mal upraviť s prihliadnutím na zmenu objemu plazmy. 6.9 Objem krvi, ktorá sa má pridať (do 0,5 ml citrátu 0,109 mol/l), sa dá vypočítať podľa vzorca: [60/(100 - hematokrit)] x 4,5.
- Dlhodobé udržiavanie plazmy pri teplote 4 - 8 ° C môže spôsobiť aktiváciu za studena so zvýšenou aktivitou faktora VII, čo skráti PT.
- Odber vzoriek na periférnom alebo centrálnom venóznom katétri, na ktorý bol podaný hypertonický roztok NaCl, predĺži PT a APTT (u dospelých by sa malo odobrať prvých 5-10 ml krvi, aby sa zabránilo kontaminácii alebo zriedeniu inými tekutinami). 6
- Prítomnosť degradačných produktov fibrínu vo vzorke vedie k predĺženiu PT.
- Zvýšené hladiny antitrombínu alebo prítomnosť antitrombínových antikoagulancií (hirudín, argatroban) môžu predĺžiť PT. Lupusové antikoagulanciá môžu tiež ovplyvňovať PT tým, že neodrážajú skutočnú hladinu antikoagulácie.
U týchto pacientov možno sledovať účinnosť warfarínu pomocou chromogénneho testu na FX, ktorý nie je ovplyvnený lupusovými antikoagulanciami alebo inhibítormi trombínu. 6
- PT sa líši v citlivosti na aktivitu koagulačných faktorov a je citlivejšia na nedostatky FVII a FX, ako na nedostatky FII a fibrinogénu. 8.9
- PT nemusí byť citlivý na mierne nedostatky koagulačných faktorov, zvyčajne sa predlžuje, ak je hladina tohto faktora 6,9
- Aktivita PV môže byť u vzoriek plazmy so zmrazeným rozmrazením o 10-20% nižšia ako u čerstvých, a to aj za optimálnych podmienok spracovania a transportu, takže PT je možné ľahko predĺžiť. 8
- Zmrazená plazma transportovaná na uhličitom ľade v uzavretých nádobách môže spôsobiť falošné predĺženie PT v dôsledku okyslenia plazmy absorpciou CO2; Vystavenie rozpustenej plazmy atmosférickému vzduchu niekoľko minút tento efekt obvykle eliminuje. 8
• Drogy a ďalšie ovplyvňujúce faktory:
V tabuľke sú uvedené lieky a potraviny, ktoré interferujú s warfarínom, klasifikované na základe podporných dôkazov a smeru interakcie (podľa Holbrook et al.). 1
Úroveň vplyv
Cardiovascvezikulárne
protizápalovýškodlivé,
Medicamysli SNC
Medicamysli GI a jedlo
Iný liekments
potentovať škodlivé