Význam nádorových antigénov u pacientov s rakovinou kože - PDF na stiahnutie zadarmo

Význam nádorových antigénov u pacientov s kožným nádorom Dizertačná práca na získanie doktorátu prírodných vied (Dr. rer. Nat.) Fakulta prírodných vied Univerzita v Hohenheime Inštitút výživy, Katedra fyziológie výživy a Oddelenie klinickej spolupráce v oblasti výskumu pohlavia, Nemecké centrum pre výskum rakoviny, ktorú prezentovala Nicole Wiedemann rodená Gottstein z Pforzheimu 28

pacientov

Dekan: Prof. Dr. rer. nat. Heinz Breer 1. spravodajská osoba: Prof. Dr. rer. nat. Stefan Eichmüller 2. spravodajca: Prof. Dr. rer. nat. Christiane Bode Vložené dňa: 25.06.28 Ústna skúška dňa: 27.11.28 Táto práca bola prijatá 23.9.28 na Fakulte prírodných vied Univerzity v Hohenheime ako dizertačná práca na získanie doktorátu prírodných vied.

Na čo sa oplatí čakať

Predmetná práca bola vykonaná v Nemeckom výskumnom centre pre rakovinu (DKFZ) Heidelberg na Oddelení klinickej spolupráce pre dermatologicko-onkologické prof. Dr. med. Dirk Schadendorf v pracovnej skupine pre nádorové antigény pod vedením Prof. Dr. rer. nat. Stefan Eichmüller vyrobené.

RIADITEĽ i OBSAH OBSAH. ZOZNAM OBRÁZKOV. VI ZOZNAM TABULIEK. VIII ZOZNAM SKRATIEK. IX 1 ÚVOD. 1 1.1 IMUNITNÉ MONITOROVANIE V KOŽE. 1 1.2 IMUNITNÉ MONITOROVANIE TUMOROV. 2 1.3 KUTANÁLNY T-BUNKOVÝ LYMFÓM. 4 1.3.1 Klasifikácia. 5 Mycosis fungoides. 5 Sézaryho syndróm. 6 1.3.2 Príprava. 6 1.3.3 Patogenéza. 7 1.3.4 Epidermotropizmus. 8 1.3.5 Diagnóza a prognóza. 9 1.3.6 Formy liečby. 1 1.4 MALIGNÝ MELANÓM. 12 1.4.1 Príprava. 13 1.4.2 Patogenéza. 14 1.4.3 Diagnóza a prognóza. 16 1.4.4 Terapia. 18 1.5 ANTIGÉNY TUMOROV. 19 1.5.1 Triedy nádorových antigénov. 2 1.5.2 Identifikácia nádorových antigénov. 24 1.6 CIEĽ TEJTO PRÁCE. 26 2 MATERIÁL A METÓDY. 27 MATERIÁL. 27 2.1 CHEMIKÁLIE. 27 2.2 ZARIADENIA, SPOTREBNÝ MATERIÁL A SÚPRAVY PRIPRAVENÉ NA POUŽITIE. 3 2.3 Pufre a riešenia. 33 2.3.1 Bakteriálne kmene. 35 2.3.2 Agar a médiá. 35

RIADITEĽSTVO ii 2.3.3 Vektory. 36 2.3.4 Plazmidy. 36 2.3.5 Séra. 2.3.6 Protilátky. 37 2.3.7 Bunkové línie. 38 2.4 SOFTVÉR. 38 METÓD. 39 2,5 SADA. 39 2.5.1 Výber antigénov. 39 2.5.2 Preabsorpcia séra pacientov. 4 2.5.3 Transdukcia. 43 2.5.4 Blotovanie a imunologický skríning. 2.5.5 Excízia in vivo. 2.5.6 Izolácia plazmidovej DNA. 47 2.5.7 Rozdelenie fagemidov. 47 2.5.8 Elektroforéza na agarózovom géli. 47 2.6 ELISA A MULTIPLEXOVÁ SEROLÓGIA. 48 2.6.1 Klonovanie DNA. 2.6.2.2 Proteínová expresia antigénov v E. coli. 53 2.6.3 SDS-PAGE a Western Blot. 54 2.6.4 Titrácia antigénu v teste GST-X-tag ELISA. 56 2.6.5 Metodológia multiplexnej sérológie. 57 2.7 ANALÝZA EXPRESIE GAGE-7B NA ÚROVNI RNA A PROTEÍNOV. 6 2.7.1 Izolácia RNA. 6 2.7.2 elektroforéza na géli RNA. 6 2.7.3 Výroba CDNA. 61 2.7.4 RT-PCR. 62 2.7.5 vzoriek RNA. 63 2.7.6 Výroba dialyzačných skúmaviek. 2.7.7 Rekombinantná expresia GAGE-7b ako GST fúzneho proteínu. 63 2.7.8 Trávenie baktérií. 63 2.7.9 Čistenie fúzneho proteínu GST na guľkách glutatiónseparózy. 64 2.7.1 Štiepenie GST z fúzneho proteínu. 2.7.11.11 Iónomeničová chromatografia. 65 2.7.12 Pufrovanie z proteínových roztokov. 66

DIRECTORIES v 4.3.2 Humorálne imunitné odpovede u pacientov s MM. 164 4.3.3 Humorálne imunitné odpovede u pacientov s CTCL. 4.3.4 Humorálne imunitné odpovede u pacientov s CTCL liečených imunitným systémom. 172 4.3.5 Porovnanie multiplexnej sérológie a SADA/SEREX. 174 4.3.6 Multiplexná sérológia v porovnaní s ELISA v diagnostike rakoviny. 178 4.3.7 Záver a perspektíva multiplexnej sérológie. 18 4.4 TEST RAKOVINY ANTIGÉNOVÝ GAGE-7B. 181 4.4.1 Špecifickosť protilátky. 182 4.4.2 Expresná analýza GAGE-7b. 183 4.4.3 Sérologické vyšetrenie GAGE-7b. 187 4.4.4 GAGE-7b ako cieľ imunoterapie. 188 4.4.5 GAGE-7b Záver a výhľad. 189 4,5 CTA A TAA V RACNEJ LIEČBE. 19 4.6 CTA a TAA V RAKOVINE DIAGNOSTIKA A PROGNOSTIKA. 192 5 ZHRNUTIE. 195 6 ZHRNUTIE. 196 7 ZOZNAM LITERATÚRY. 197 8 PRÍLOHA. 229 životopisov. 232 PRÁVNE VYHLÁSENIE. 233

ADRESÁRE xiii ctage-1 Kožný antigén lymfómu T-buniek 1 (antigén kožného lymfómu T-buniek 1) Strep-PE Streptavidín-R-fykoerytrín TAA Antigén spojený s nádorom TBS-T TBS-Tween TCR T-bunkový receptor (T-bunkový receptor ) TEMED N, N, N`, N`-tetrametyletyléndiamín TH bunky T-pomocné bunky TIL lymfocyty infiltrujúce nádor TMB tetrametylbenzidín TNF-α tumor nekrotizujúci faktor-α TRP-1 tyrozín príbuzný proteín 1 TRIP4 proteín interagujúci s hormónom štítnej žľazy 4 celkovo TSEB žiarenie kožného elektrónového lúča U Jednotka Všadeprítomné UACA UVEAL Autoantigén UBE3A Ubikvitín Proteín Ligáza E3A ÜN Prenocovanie UICC Medzinárodná únia proti rakovine (Unio internationalis contra cancrum) RPM otáčky za minútu UTR Neprekladané oblasti UVA Ultrafialové svetlo A WHO Svetová zdravotnícka organizácia w Ženy druhý týždeň X-Gal 5-bróm-4-chlór-3-indolyl-β-D-galaktopyranozid ZNF proteín so zinkovým prstom CNS centrálny nervový systém