Detská laboratórna diagnostika

Detská laboratórna diagnostika T. Tulassay

Obsah 1. Všeobecné poznámky 2. Prenatálna diagnostika 3. Laboratórna diagnostika v postnatálnom adaptačnom období. Novorodenci 4. Diagnostika CNS a infekcií 5. Hepatológia 6. Nefrológia 7. Hematológia 8. Gastrointestinálne ochorenia 9. Nádorové markery 10. Genetické diagnostické možnosti

Krvné sérum, plazmatické krvinky látky na laboratórnu diagnostiku erytrocyty, (Hb) leukocyty a iné jadrové bunky (membránové markery, DNA) retikulocyty kostná dreň moč stolica alkohol plodová voda tkanivo (biopsiou atď. (Odber choriových klkov))

Klinicko-chemická analýza rôznymi metódami (fotometria, enzymatické stanovenie, chromatografia, hmotnostná spektrometria atď.) Mikrobiologické vyšetrenia, klasická metóda, hmotnostná spektrometria, molekulárno-biologické metódy

Prenatálna diagnostika a prevencia Všeobecné stavy, pri ktorých je nevyhnutný skríning. Genetické choroby, získané enzymopatie Metabolické choroby Chromozomálne abnormality Choroby matky ovplyvňujúce plod (cukrovka, hypertenzia atď.)

Prenatálna diagnostika a prevencia Lekárske prostriedky Ultrasonografia (anatomické anomálie). Invazívne vyšetrenia prenatálnej diagnostiky zahŕňajú: amniocentézu, odber choriových klkov a chordocentézu (punkciu pupočníka), abnormality chromozómov, biochemické choroby, DNA, z ktorej sú izolované materské krvné bunky fetálneho proteínu. Krv (voľná fetálna DNA). Matky môžu mať cudzie bunky z predchádzajúceho tehotenstva)

α-fetoproteín, nekonjugovaný estriol, celkový ľudský choriový gonadotropín (HCG), voľná p podjednotka HCG, inhibín A a plazmatický proteín súvisiaci s tehotenstvom A. AFP, nekonjugovaný estriol, HCG, bez podjednotky beta HCG, PAPP -A, HCG, meranie hustoty krku Tr. + Inhibítor A AFP, nekonjugovaný estriol, HCG

Praktické informácie Skríning v prvom trimestri sa vykonáva na konci prvej tretiny (prvého trimestra) tehotenstva, v období medzi 11 týždňami +0 dní až do 13 týždňov +6 dní vrátane. PAPP-A je oveľa informatívnejší, najmä v 10. týždni a skôr (8-9 týždňov) ako v 13. týždni. Naopak, voľný β-hcg v 11. týždni má nižšiu výpovednú hodnotu, ktorá sa zvyšuje iba v nasledujúcich týždňoch tehotenstva, s optimom v 2. trimestri (od 14 týždňov).

Dôvody použitia invazívnych metód prenatálnej diagnostiky sú: abnormálne nálezy z merania hustoty krku a/alebo kombinované testy abnormálnych nálezov pri poruchách rastu ultrazvukom (najmä v druhom trimestri tehotenstva), zmeny chromozómov v rodine alebo v predchádzajúcom tehotenstve genetické choroby alebo predispozície u pokrvných príbuzných. vysoké hladiny protilátok v krvi u tehotnej ženy negatívnej na rhesus

Dôležitým proteínom - AFP alfa-1-fetoproteín (AFP), tiež alfafaetoetoproteín alebo α 1 - foetoproteín, je glykoproteín u cicavcov, ktorý sa počas embryonálneho vývoja človeka v priebehu gravidity z endodermálneho tkaniva a plodovej pečene alebo u dospelých, najmä u dospelých Tvoria sa pečeňové nádorové bunky. Fyziologicky má alfa-1 fetoproteín funkciu fetálneho transportného proteínu, ktorý transportuje najmä meď, nikel, mastné kyseliny a bilirubín v krvnej plazme plodu.

Veľmi vysoké koncentrácie AFP v krvi matky alebo v plodovej vode naznačujú okluzívne poruchy nenarodeného dieťaťa. Patria sem defekty brušnej steny, ako sú omfalokéla a gastroschíza, a defekty neurálnej trubice, ako je rázštep chrbtice a anencefália. U mužov a netehotných žien môžu vysoké koncentrácie AFP naznačovať aktívnu hepatitídu, cirhózu pečene a karcinóm pečeňových buniek. Nízke hodnoty AFP medzi 14. a 20. týždňom tehotenstva sú známkou Downovho syndrómu (trizómia-21) u nenarodeného dieťaťa.

Trisomia 18, Edwardsov syndróm Prevalenze: 1/6 000 Nízka pôrodná hmotnosť Uzavretá päsť Malý bedrový kĺb, s obmedzeným bruchom Krátka hrudná kosť Mikrocefália Prominentný Occiput Micrognatia Srdce, malformácia obličiek Mentálna retardácia Kolenná podrážka chodidla 95%, smrť 20%, pľúcna hypertenzia. Circulus vitiosus. Paulev-Zubieta: Nová ľudská fyziológia

Pomer alveolárnej ventilácie (VA) a perfúzie (Q) fyziologický = 1,0 Paulev-Zubieta: nová ľudská fyziológia

Acidobázická rovnováha (SBH) ph: 7,35 - 7,40 Pri ph = 7,40 H + koncentrácia, 40 nmol/l Na + = 140 mmol/l (1,0 milión x vyššia koncentrácia) ph = 6, 1 + log HCO 3/CO 2 Henderson-Hasselbalch

Rovnováha prostredníctvom troch obranných mechanizmov Prvá línia: Chemické tlmivé systémy Druhá línia: Dýchací mechanizmus (zmeny v odbore CO 2) Tretí riadok: Renálna kompenzácia (zmeny HCO 3 - vylučovanie)

Rozpis celkového pufrového systému Non-bikarbonátový pufrový systém 47% Bikarbonátový pufer 53% Hb a OxyHb 35% Plazmatický bikarbonát 35% Organické fosfáty 3% Erytrocytový bikarbonát 18% Anorganické fosfáty 2% Plazmatické bielkoviny 7%

Katióny Anióny 160 140 120 100 80 60 Sodík Draslík Vápnik Horčík 120 100 80 60 Chlorid Bikarbonát Fosforečnan fosforečný 40 20 0 Plazmová intersticiálna tekutina Intracelulárna tekutina 40 20 0 Plazmová intersticiálna tekutina Intracelulárna tekutina Organické kyseliny Proteín 100% 80% 60% 40% 20% 0 % Aniónov katiónov

Regulácia objemu kvapalného priestoru ICV ECV PV ISV

Regulácia objemu buniek iónovým transportom ECF osm H 2 O Na K H 2 O ECF osm NaCl H 2 O KCl H 2 O

Možnosti kompenzácie pri rôznych acidobázických zmenách Zmena Očakávaná kompenzácia Metabolická acidóza Pco 2 = 1,5 [HCO 3] + 8 ± 2 Metabolická alkalóza Respiračná acidóza Akútna chronická Respiračná alkalóza Akútna chronická Pco 2 sa zvyšuje o 7 mm Hg na každých 10 meq/l Zvýšenie séra [HCO 3] [HCO 3] sa zvyšuje o 1 na každých 10 mmHg zvýšenie Pco 2 [HCO 3] sa zvyšuje o 3,5 na každých 10 mmHg zvýšenie Pco 2 [HCO 3] klesá o 2 me/l za každých 10 mmHg pokles Pco 2 [HCO 3] klesá o 4 za každých 10 mmHg pokles Pco 2

Ďalšie laboratórne parametre v postnatálnom adaptačnom čase Ht: 0,60-0,65 polyglobulia (syndrómy hyperviskozity) HbF vs HbA hyperbilirubinémia glukóza - hypoglykémia

Intenzitná hmotnostná spektrometria Čo je to? Ionizačné molekuly v kondenzovanej fáze + + hmota náboja + + + + + + hromadná analýza + + + + + + + + ióny v plynnej fáze + + + + + + + + ióny hmotnosť/náboj v plynnej fáze

Intenzita Hmotnostné spektrum Molekulárny ión s jedným nábojom + Molekulárny ión s dvoma nábojmi Addukcia s jedným nábojom Koncentrácia! ++ + + molekulová hmotnosť! Omša/náboj

Galaktozémia, hypotyreóza, nedostatok biotinidázy, fenylketonúria, + 22 zriedkavých chorôb z metabolizmu aminokyselín, oxidácia mastných kyselín a organická acidúria (MS-MS)

PKU. Vrodené chyby enzýmov

Základné vyšetrenia v prípade podozrenia na neurometabolické ochorenie 1. Materiál Vyšetrenie/parametre Zistená porucha v prípade abnormálneho nálezu Krvná glukóza, elektrolyty Hypoglykémia, poruchy elektrolytov Laktát, BGA AST, ALT, gamagáza, amoniak, kreatinín, močovina, aminokyseliny kyseliny močovej, homocysteín, acylkarnitín, krvný náter, kreatínkináza (vákuované lymfocyty, akantocyty) Poruchy energie, acidóza, alkalóza, hepatopatia, porucha cyklu močoviny, nefropatia, porucha metabolizmu purínov, poruchy metabolizmu bielkovín, napr. Organoacidopatie Poruchy oxidácie mastných kyselín Poruchy svalov po záchvate Poruchy glykozylácie Skladovacia erózia,

Základné vyšetrenia pri podozrení na neurometabolické ochorenie 2. Materiál Vyšetrenie/parametre Zistená porucha v prípade abnormálnych nálezov Moč Ketónové telieska Zvýšená oxidácia mastných kyselín (napr. Nalačno), narušenie odbúravania ketónových teliesok Organické kyseliny Mukopolysacharidy, oligosacharidy, kyselina sialová, sulfatidy (kvartérne kyseliny, kyselina L, kyselina sulfo Likér/plazma) Aminokyseliny (kvocient Likér/plazma) Neurotransmiter Metytetrahydrofolát Porucha transportu glukózy (GLUT1) Špecifikované aminokyseliny Poruchy neurotransmisie Nedostatok mozgových folátov

Hemoxigenáza 1. Zvýšená tvorba Hb Lem Biliverdin Bilirubín-albumín Voľný bilirubín Glukuronyl transferáz Biliverdin reduktáza Nekonjugovaný bilirubín + ligand BDG Novorodenci: 104-136 µmol/kg/24 hodín Dospelí 51-68 µmol/kg/24 hodín 2. Nedostatočný príjem BMG 3. Znížené vylučovanie BMG BDG Nekonjugovaný bilirubín 4. Zvýšená entero-hepatálna cirkulácia

Cholestáza u novorodencov Intrahepatálne ochorenie Poškodenie hepatocytov Poškodenie žlčových ciest Extrahepatálne ochorenie: poškodenie alebo obštrukcia žlčových ciest Biliárna atrézia Metabolické ochorenie Vírusová infekcia Intrahepatálne poškodenie žlčových ciest. Prekážka.

Mekónium Dočasné pohyby čriev

Defekácia materského mlieka Acholická stolica

Obsah 1. Všeobecné poznámky 2. Prenatálna diagnostika 3. Laboratórna diagnostika v postnatálnom adaptačnom období. Novorodenci 4. Diagnostika CNS a infekcií (je nutný klinický obraz + diagnostické vybavenie) 5. Hepatológia 6. Nefrológia 7. Hematológia 8. Gastrointestinálne ochorenia 9. Nádorové markery 10. Genetické diagnostické možnosti

Podozrenie na infekciu. Klinické príznaky Horúčka Zmeny krvného obehu Tachypnoe, apnoe Cyanóza CNS Príznaky Letargia Apatia Bezvedomie Kóma Záchvat Žltačka anémia Krvácanie Trombocytopénia Oligúria, anúria

Diagnostika infekcie Stav moču Krvný obraz s diferenciálnym krvným obrazom CRP, prokalcitonín Krk z krku Krvné kultúry Lumbálna punkcia Vzorka acetónu v moči UTI, leukocytóza, leukopénia, posun vľavo,> 15 000/ul, 13> 13> 13