Kultúra faryngálneho exsudátu (s vhodným antibiogramom); Vojenská pohotovostná fakultná nemocnica

Kultúra faryngálneho exsudátu (s vhodným antibiogramom)

Všeobecné informácie

exsudátu

Medzi horné dýchacie cesty patria nozdry, nosohltan (so spojenými dutinami: paranazálne dutiny a stredné ucho), orofaryng a laryngofarynx. Kvôli nedostatku zreteľných anatomických bariér medzi segmentmi horných dýchacích ciest sa infekcia môže šíriť nepretržite s častými komplikáciami postihujúcimi stredné ucho, hrtan a dokonca aj dolné dýchacie cesty.

Faryngitída a tonzilitída sú najbežnejšie choroby horných dýchacích ciest, pre ktoré pacient oslovuje lekára a implicitne laboratórium.

Pri mikrobiologickej diagnostike musí laboratórium brať do úvahy bakteriálnu flóru, ktorá sa bežne vyskytuje na určitých anatomických miestach. Táto normálna flóra, ktorá je v symbiotickom vzťahu s hostiteľom, hrá dôležitú úlohu pri ochrane pred patogénnymi mikroorganizmami a je schopná rôznymi mechanizmami zabrániť ich množeniu a invázii.

Supraglotická vrstva dýchacieho traktu je hostiteľom bakteriálnej flóry pozostávajúcej z viac ako 200 druhov distribuovaných v ďasnových štrbinách, zubnom plaku, slizniciach jugu a jazyka, orofaryngu, krčných mandlí a nosohltanu, anaeróbne baktérie dominujú nad aeróbnymi v pomere 5 až 5. 10: 1.

Etiológia faryngitídy

Vírusové infekcie

• Približne 70% faryngitídy je vírusovej etiológie: rhinovírusy, adenovírusy, vírusy chrípky, parainfluenza, Coxsackie A, vírus Epstein-Barr, ktorý spôsobuje infekčnú mononukleózu charakterizovanú silnou angínou, často ulcerovanou, cervikálnou adenitídou a známkami systémového poškodenia.

• Majú samolimitujúci vývoj, ale poškodením dýchacieho epitelu a prekrvením sínusových otvorov alebo Eustachovej trubice uprednostňujú superinfekciu baktériami z pôvodnej mikrobioty..

Bakteriálne infekcie

• Najčastejšie sa jedná o Streptococcus pyogenes (Hemolytický β skupina A streptokok, PYR pozitívny). Streptococcus pyogenes je jedným z dôležitých ľudských patogénov, jediný známy prírodný rezervoár predstavuje ľudská pokožka a sliznice; potlačuje závažnosť faryngitídy infekčnými komplikáciami (sinusitída, zápal stredného ucha, mastoiditída, hnisavá cervikálna adenitída, tonzilárny absces, amygdala flegmón, difúzna celulitída ústnej dutiny - Ludwigova angína) a postinfekčné (akútna reumatoidná artritída, akútna glomerulonefritída, reumatická karditída).

Prítomnosť antigénov skupiny Lancefield skupiny A nie je špecifická pre Streptococcus pyogenes, môžu byť tiež prítomné v skupine anginosus, ktorá zahŕňa Streptococcus anginosus, Streptococcus constellatus a Streptococcus intermedius. Test PYR odlišuje Streptococcus pyogenes, ktorý je zodpovedný za väčšinu bakteriálnych faryngitíd, od skupiny anginosus, ktorá je súčasťou normálnej mikroflóry hltana.

Faryngitídu s erytrotoxigénnymi kmeňmi Streptococcus pyogenes sprevádza šarlach.

• Periamygdalský absces sa vyskytuje častejšie u detí nad 5 rokov a mladých dospelých a môže sa stať vážnou infekciou ovplyvnením susedných tkanív, ako aj eróziou krčnej tepny. Zúčastnené organizmy sú hlavne: Streptococcus pyogenes, Arcanobacterium haemolyticum, Staphylococcus aureus, anaeróby (napr. Fusobacterium spp.si Bacteroides).

• Hemolytické β streptokoky skupiny C a G môžu spôsobiť faryngitídu, ktorej vývoj môže byť závažný.

• Arcanobacterium haemolyticum - môže spôsobiť častejšie u mladých dospelých faryngitídu a periamygdalský absces. Faryngitída, podobne ako streptokoková, je sprevádzaná šarlami a/alebo cervikálnou adenitídou asi u 50% pacientov. Pretože je súčasťou komenzálnej flóry, klinický význam má iba prevažujúci rast v izolačnej platničke.

• Chlamydia pneumoniae - častá príčina faryngitídy.

• Mycoplasma pneumoniae - spôsobuje až 10% zápalov hltanu školákov.

• Neisseria gonorrhoeae - gonokoková faryngitída sa vyskytuje po aberantnom pohlavnom styku a vyvíja sa benígne. Laboratórne vyšetrenie sa vykonáva iba na výslovnú žiadosť. Mikroskopia nemá žiadnu hodnotu kvôli početnému nenáročnému rastu orofaryngeálnej mikrobioty.

• Corynebacterium diphteriae - spôsobuje faryngitídu alebo silnú pseudomembranóznu angínu sprevádzanú toxémiou. Najobávanejšími komplikáciami sú komplikácie postihujúce centrálny nervový systém (slepota, kóma).

• Fuso-spirochetotická asociácia - zmiešaná infekcia s anaeróbnymi baktériami (Fusobacterium spp) a spirochetami, spôsobuje stomatitídu a angínu pectoris. Infekcia, dnes pomerne zriedkavá, je charakterizovaná vredovo-nekrotickými léziami, ktoré môžu byť pokryté falošnými membránami. Postihuje dospelých častejšie ako deti, najmä tých, ktorí majú nesprávnu ústnu hygienu a majú lokálne alebo systémové nedostatky v ochrane pred infekciou.

• Haemophilus influenzae (iba patológia sérotypu b má dôsledky na patológiu), Streptococcus pneumoniae a Staphylococcus aureus sú mikroorganizmy, ktoré, hoci sú často izolované z exsudátu hltanu a sekrécie z nosa, nepotvrdili, že sa podieľajú na etiológii faryngitídy. Stav nositeľa pre jeden z týchto mikroorganizmov, ako aj pre Neisseria meningitidis, môže mať pre určitých pacientov alebo ich kontakty klinický význam.

• Prevažujúce a veľké zvyšovanie kultúry gramnegatívnych bacilov, pseudomonád a kvasiniek (Candida albicans - kvasinky z orofaryngeálnej mikrobioty) môže mať klinický význam u novorodencov, v prípade predčasne narodených detí, pacientov hospitalizovaných pre vážne choroby, imunokompromitovaných alebo tí, ktorí podstúpili antimikrobiálnu liečbu, ktorá vyvolala významnú dysbiózu. Preto je dôležité nadviazať dobrú komunikáciu medzi klinickým lekárom a laboratórnym lekárom, aby bolo možné poznať klinický kontext pacienta.

Konkrétny prípad infekcie hltana sa vyskytuje u detí s cystickou fibrózou, čo je stav, ktorý musí byť uvedený v žiadosti zaslanej do laboratória lekárom. Jedným z patologických produktov akceptovaných v tomto prípade je hlboký faryngálny exsudát, laboratórium komunikujúce s prítomnosťou v akomkoľvek množstve nasledujúcich zárodkov: Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa a Burkholderia cepacia.

Odber a preprava vzoriek

Faryngálny exsudát sa užíva pred alebo po 4 hodinách od toalety ústnej dutiny alebo po požití potravy alebo tekutín.

- Pacient je položený na stoličke otočenej k svetelnému zdroju, krk je mierne predĺžený a zátylok je podopretý operadlom alebo stenou.

- Stlačte základňu jazyka pomocou depresora a zatiaľ čo pacient vysloví samohlásku „a“, pevne ju utrite tampónom, mandľami a zadnou stenou hltana, pričom trvajte na zapálených, ulcerovaných miestach alebo na hnisavých usadeninách; ak existujú falošné membrány, ľahko sa oddelia, tamponujú podkladovú sliznicu; pri vkladaní a vyberaní tampónu sa nedotýkajte spodnej časti jazyka a mäkkého podnebia.

- Vložte tampón do ochrannej trubice jednoduchej alebo opatrenej transportným médiom (Amies alebo Stuart), ktoré je zodpovedajúcim spôsobom označené.

  • jednoduchý pufor bez transportného média, z ktorého sa uskutoční rýchly test na streptokokový antigén skupiny A;
  • jednoduchý tampón z ulcerovanej oblasti, z ktorého sa pre mikroskopické vyšetrenie vykonajú okamžité dva nátery, aby sa diagnostikovala angina pectoris;
  • pufor vybavený transportným médiom na uskutočnenie kultivácie.

Preprava vzoriek do laboratória sa vykonáva maximálne do 2 hodín od odberu vzoriek. Aj keď sa vzorky odobraté z tampónov v skúmavkách obsahujúcich transportné médium môžu skladovať až 24 hodín, pre bezpečnejšiu regeneráciu sledovaných mikroorganizmov sa odporúča vykonať očkovanie na kultivačné médium hneď, ako sa vzorky dostanú do laboratória.

Laboratórna diagnostika a interpretácia výsledkov

Laboratórna diagnostika

• Vzorku odoberte na agare Columbia s 5% baranovej krvi a na požiadanie, keď lekár požaduje flóru, na agare Chocolate.

• Inkubuje sa aeróbne v atmosfére s 5% CO2, 24 hodín pri 37 ° C, s predĺžením až 48 hodín, ak pri prvom odčítaní platní nie sú pozorované kolónie charakteristické pre sledovaný zárodok.

• Charakteristické kolónie sa transplantujú, aby sa získala čistá kultúra na identifikáciu.

Po získaní pozitívneho výsledku latexaglutinácie pre Lancefieldovu skupinu A sa uskutoční PYR imunochromatografický test, ktorý umožňuje diferenciáciu medzi Streptococcus pyogenes (pozitívny PYR) a ostatnými beta hemolytickými streptokokmi (negatívny PYR).

• Priama, rýchla metóda na detekciu beta-hemolytického streptokokového antigénu skupiny A je latexaglutinácia s citlivosťou v rozmedzí od 80 do 95% do špecificity 98%. Získanie pozitívneho výsledku umožňuje rýchle zahájenie terapie; negatívny výsledok si však vyžaduje výkon kultúry.

• Neodporúča sa mikroskopické vyšetrenie vzoriek exsudátu hltana zafarbené gramom, pretože na tejto úrovni nie je možné rozlišovať medzi podozrivými patogénmi a normálnou flórou. Výnimkou sú nasledujúce situácie:

  • korelácia výsledkov mikroskopie s prevládajúcou izoláciou veľkého množstva v kultúre druhov Candida (albicans alebo tropicalis);
  • diagnóza fuso-spirochetotickej angíny - mikroskopické vyšetrenie náteru zafarbeného podľa Grama po prítomnosti fusiformných gramnegatívnych bacilov a spirochét v kontexte zápalovej reakcie;
  • diagnóza záškrtu - okamžitý ster, ktorý sa pošle do laboratória spolu s výtermi a poznámkou o odporúčaní, ktorá musí obsahovať klinické podozrenie.

Kritériá na vykonanie antibiogramu

Pretože si hemolytický β Streptokok zachováva svoju prirodzenú citlivosť na penicilín, antibiogram sa vykonáva iba na žiadosť lekára alebo v prípade alergie na penicilín.

Ak je v kultúre hemolytický β Streptococcus spojený so Staphylococcus aureus, bude táto asociácia uvedená v bulletine s výsledkami a liečbe Streptococcus nie sa uskutoční s penicilínom, pretože väčšina stafylokokových kmeňov je sekretorom penicilinázy.

Interpretácia výsledkov

–Staphylococcus aureus iba v spojení s hemolytickým β streptokokom;