Lupus antikoagulant - Synevo
Všeobecné informácie a odporúčania na stanovenie lupusového antikoagulancia
Antikoagulanciá typu lupus sú protilátky namierené proti komplexom fosfolipid-proteín. Interferujú in vitro s fosfolipid-dependentnými koagulačnými testami, čo vedie k ich predĺženiu (najbežnejšie používaná časť aktivovaného tromboplastínového času aPTT) 1; 2 .
In vivo je prítomnosť antikoagulancií typu lupus spojená so zvýšeným rizikom trombotických príhod (trombofília) 3. Prevalencia trombózy u pacientov s lupusovými antikoagulanciami je 24-36%; prevažuje hlboká trombóza končatín a pľúcna embólia. Pacienti s opakovanými potratmi majú lupusové antikoagulanciá v asi 10% prípadov.
Kvôli vnútornej heterogenite lupusových antikoagulancií je laboratórna diagnostika často zložitá. Použité testy musia byť schopné odlíšiť protilátky s antikoagulačnou aktivitou lupusu od protilátok proti koagulačnému faktoru, deficitu faktora a heparínu, pretože všetky tieto štyri stavy môžu spôsobiť predĺženie testu aPTT. V praxi sú plazmy s nedostatkom koagulačných faktorov ľahko identifikovateľné, pretože pridanie normálnej plazmy normalizuje koagulačný čas in vitro. Izolovaný test aPTT však nemôže jasne rozlíšiť medzi plazmou obsahujúcou antikoagulanciá lupus a plazmou obsahujúcou antikoagulačný faktor a/alebo heparínové protilátky. .
V roku 2009 Medzinárodná spoločnosť pre hemostázu a trombózu zrevidovala a zmenila a doplnila odporúčania týkajúce sa detekcie lupus antikoagulantu (LA). Preto sa zlepšili výberové kritériá pacientov indikovaných v tomto výskume a bol tiež vyvinutý algoritmus laboratórneho testovania.
Testovanie na LA by sa malo obmedziť na pacientov, u ktorých je značná pravdepodobnosť výskytu antifosfolipidového syndrómu (APS) alebo ktorí majú pri rutinnej kontrole nevysvetliteľné predĺženie aPTT.
Nevyprovokovaná hlboká žilová trombóza alebo nevysvetliteľná arteriálna trombóza u mladých pacientov (4 .
Výcvik pacientov - v ideálnom prípade by sa vzorka mala odobrať pred začatím antikoagulačnej liečby .
Odobratý exemplár - venózna krv 3 .
Zberová nádoba - vacutainer s 0,105 M citrátom Na (1/9), modro/zeleným vekom 3 .
Zozbierané množstvo - pokiaľ to umožňuje podtlak 3 .
Príčiny odmietnutia dôkazov - nedostatočná vzorka (pod úrovňou vyznačenou na vakuovom zásobníku); hemolyzovaný exemplár; prítomnosť zrazenín vo vzorke 3 .
Po zbere potrebné spracovanie - centrifugácia 15 minút pri 2 500 g, aby sa získala plazma (plazma musí byť v krvných doštičkách veľmi nízka, T 1; 3 .
Stabilita vzorky - oddelená plazma je stabilná 4 hodiny pri izbovej teplote, 1 mesiac pri -20 ° C 3 .
Laboratórium Snevo prijalo odporúčanie CLSI 2014 na vykonanie detekčných testov LA v poradí skríningu, potvrdenia, „zmiešavacieho testu“, ktorý sa vykonáva voliteľne, v závislosti od osobitosti analyzovaného prípadu.
skríning: obrazovka dRVVT + aPTT-LA (aPTT citlivá na LA); ak je výsledok v obidvoch testoch negatívny, LA sa zaznamená negatívne; ak sa v jednom alebo v obidvoch testoch dosiahne pozitívny výsledok, použijú sa potvrdzujúce testy.
Potvrdenie: ak je aPTT-LA pozitívny, vykoná sa test neutralizácie fosfolipidov v hexagonálnej fáze; ak je dRVVT obrazovka pozitívna, vykoná sa potvrdenie dRVVT 3 .
Referenčné hodnoty - negatívny lupusový antikoagulant 3 .
Poznámka: Na diagnostiku antifosfolipidového syndrómu sú významné 2 pozitívne výsledky dosiahnuté v intervaloch 12 týždňov 3; 4 .
Limity a rušenie
Výsledky získané na vzorkách odobratých počas akútnej trombotickej epizódy by sa mali interpretovať opatrne, pretože pacienti podstupujú antikoagulačnú liečbu a reaktanti v akútnej fáze (napr. FVIII) môžu mať zvýšené hodnoty 4. U pacientov liečených nízkomolekulárnym heparínom (LMWH) sa test môže vykonať iba na vzorkách odobratých 12 hodín po poslednej dávke. Ak sa má test vykonať u pacientov užívajúcich perorálne antikoagulanciá, odporúča sa ich prerušenie a podávanie LMWH 4; 5, pretože antagonisty vitamínu K môžu vyvolať falošne pozitívne výsledky. .
Hladiny heparínu> 1 IU/ml môžu spôsobiť interferenciu (falošne pozitívne hodnoty), na nižšie hladiny pôsobia neutralizujúce látky obsiahnuté v reagentoch 3 .
Tiež, dabigatran (inhibítor trombínu), ako aj priame inhibítory faktora Xa (rivaroxaban alebo apixaban) môžu spôsobiť falošne pozitívne hodnoty lupusového antikoagulancia, preto sa testovanie u pacientov užívajúcich tieto antikoagulanciá neodporúča. .