Na hematologické účinky majú vplyv biochemické príznaky zhoršenej funkcie kobalamínu

hematologické

  • predmetov
  • abstraktné
  • Pozadie:
  • Metódy:
  • Výsledky:
  • Záver:
  • Hlavná
  • Výsledky
  • Demografické údaje a výživa
  • Dojčenský stav kobalamínu a folátu
  • Hematologické parametre u dojčiat
  • diskusia
  • Záver
  • Metódy
  • Populácia a dizajn štúdie
  • Odber krvi a biochemická analýza
  • Štatistická analýza
  • Vyhlásenie o finančnej podpore
  • Zverejnenie

predmetov

abstraktné

Pozadie:

Zatiaľ čo nedostatok železa je najčastejšou príčinou anémie u dojčiat, nedostatok kobalamínu je primárne charakterizovaný oneskorením vo vývoji a typická makrocytová anémia sa v tejto vekovej skupine obmedzuje na závažný a dlhotrvajúci nedostatok kobalamínu. Hematologické parametre sa hodnotili u 4-mesačných dojčiat s biochemickým dôkazom poškodenia funkcie kobalamínu, ktorí sa zúčastnili randomizovanej kontrolovanej intervenčnej štúdie s kobalamínom po 6 týždňoch.

Metódy:

Náhodne bolo vybraných stodeväťdesiatsedem dojčiat, ktoré dostali buď 400 ul intramuskulárnej injekcie. g kobalamínu alebo nebol prijatý žiadny zásah po 6 týždňoch. Hematologické parametre a stav kobalamínu a folátu sa stanovili pri zaradení a 4 mesiacoch.

Výsledky:

Suplementácia kobalamínom zlepšila všetky markery zhoršenej funkcie kobalamínu, ale nemala vplyv na počet hematologických buniek po 4 mesiacoch (P> 0,18). Známky erytropoézy s obmedzeným obsahom železa sa pozorovali po 6 týždňoch a 4 mesiacoch. Najsilnejším prediktorom nízkeho stavu železa bolo mužské pohlavie po 4 mesiacoch a vysoké percentuálne zvýšenie hmotnosti od narodenia.

Záver:

U dojčiat s biochemickými známkami zhoršenej funkcie kobalamínu suplementácia nezlepšuje počet hematologických buniek. Zdá sa, že variácie parametrov červených krviniek súvisia predovšetkým so stavom železa v tejto vekovej skupine.

Kojenecké obdobie je obdobie poznamenané rýchlym rastom so zvýšenou potrebou niekoľkých mikroživín a následným rizikom nedostatku živín (1). Nedostatok železa aj kobalamínu sa nachádza u prevažne dojčených detí (1, 2). Zatiaľ čo nedostatok železa je najčastejšou príčinou anémie u dojčiat (3), nedostatok kobalamínu je charakterizovaný hlavne oneskorením vývoja v tejto vekovej skupine (2, 4). U dojčiat s marginálnym nedostatkom kobalamínu sa uvádza, že majú normálne hematologické hodnoty (5, 6) a pancytopénia a makrocytická anémia sa vyskytujú hlavne pri ťažkom a dlhodobom deficite kobalamínu (2).

Vyhodnotenie výživy u dojčiat môže byť náročné z dôvodu rozsiahlych fyziologických zmien v prvých mesiacoch života, čo sťažuje interpretáciu obvyklých laboratórnych parametrov (2, 7). Kobalamín v sére významne klesá v prvých týždňoch a zostáva nízky počas prvých 6 mesiacov, zatiaľ čo sérový folát sa zvyšuje a zostáva vysoký v prvom roku života (8). Tieto zmeny sú sprevádzané zvýšením metabolických markerov homocysteínu (tHcy) a kyseliny metylmalonovej (8). Suplementácia kobalamínu mení všetky markery zhoršeného stavu kobalamínu oproti profilu pozorovanému u starších detí a dospelých bohatých na kobalamíny, čo naznačuje, že vysoké hladiny THC a kyseliny metylmalonovej hlásené u veľkej časti primárne dojčených detí neodrážajú nezrelý metabolizmus ale príliš málo kobalamínu závislých od kobalamínu je plne udržiavaných reakcií (9).

Rýchlosť syntézy hemoglobínu a produkcie erytrocytov dramaticky klesá v prvých dňoch po narodení a dosahuje minimum v druhom týždni života. V dôsledku potlačenej erytropoézy a skrátenej životnosti erytrocytov plodu (60 - 70 dní) dosahuje hladina hemoglobínu (Hb) a počet erytrocytov po narodení najnižšie hodnoty.

2 mesiace po narodení (10, 11). Veľkosť erytrocytov, určená stredným objemom buniek (MCV), klesá a je najmenšia po 6 mesiacoch, potom sa postupne zväčšuje (10). Zatiaľ čo normálne parametre erytrocytov, ako sú hladiny Hb a MCV, odrážajú priemerné hodnoty populácie erytrocytov s priemernou dĺžkou života 120 dní, obsah hemoglobínu (CHr) v retikulocytoch poskytuje hodnotenie erytropoézy v reálnom čase za posledných 24 až 48 rokov (12). Táto výhoda robí CHr užitočným v čase rýchlych fyziologických zmien a predpokladá sa, že CHr je najlepším prediktorom nedostatku železa u dojčiat a je lepší ako tradičné parametre železa, ako je sérový feritín a saturácia transferínu (7).

Predtým sme uskutočnili randomizovanú kontrolovanú intervenčnú štúdiu s kobalamínom u hlavne dojčených detí vo veku 6 týždňov s biochemickými dôkazmi o poškodení funkcie kobalamínu (9). V tomto článku uvádzame vplyv doplnku kobalamínu na hematologické parametre u dojčiat vo veku 4 mesiacov. Cieľom tejto štúdie bolo zistiť, či metabolický profil, ktorý naznačuje poškodenie funkcie kobalamínu, súvisí s produkciou hematologickej bunkovej línie v prvých mesiacoch života.

Výsledky

Demografické údaje a výživa

Študovaná skupina zahŕňala 107 zdravých dojčiat vo veku 6 týždňov, 56 chlapcov (52%), ktorí sa narodili v čase narodenia (priemerný gestačný vek 39, 9 (SD 1, 3) týždne) a mali váhu primeranú veku (priemerný gestačný vek) 3, 578). SD 506) g). Pri zaradení a následnom sledovaní (p> 0,05) medzi kobalamínovou a kontrolnou skupinou na základe demografických údajov o dojčatách a matkách neboli významné rozdiely (P> 0,05) a údaje za Tabuľka 1 uvedená . Použili sa dva rôzne typy receptúry, obe obohatené o železo (0,7 - 0,8 mg na 100 ml pripravenej receptúry) a kobalamín (0,13 - 0,2 μg na 100 ml pripravenej receptúry). Použili sa rôzne druhy kaše, všetky boli obohatené železom (4, 8 - 11, 1 mg na 100 mg prášku). Žiadne dieťa nedostalo doplatok železa.

Priemerný percentuálny prírastok hmotnosti od narodenia bol 39% (SD 14%) po 6 týždňoch a 95% (SD 26%) po 4 mesiacoch. Spearmanova korelácia korelovala percentuálny prírastok hmotnosti po 6 týždňoch (r = -0, 44, P 0, 06).

Priemerný vek matky bol 31,5 (SD 4,8) rokov a 63 zo 104 matiek bolo viacpočetných s priemerným počtom 1,4 (rozmedzie, 1-4) starších detí. 38 zo 104 matiek uviedlo, že počas tehotenstva užívali doplnky železa denne kratšie alebo dlhšie obdobie. Dve z matiek boli vegetariánky a ďalšie hlásili všežravú stravu, hoci deväť matiek uviedlo, že zriedka alebo nikdy nejedli mäso (n = 6) alebo ryby (n = 3).

Dojčenský stav kobalamínu a folátu

Bol zverejnený podrobný opis stavu kobalamínu a kyseliny listovej (9). Priemerná hladina kobalamínu v sére po 6 týždňoch bola 170 (134–255) pmol/l a priemerná plazmatická tHcy bola 7,59 (6, 21–9, 28) μmol/l; Medzi kobalamínom a kontrolnou skupinou sa nepozorovali významné rozdiely v hladinách vitamínov a metabolitov. Po 4 mesiacoch mala kobalamínová skupina o 75% vyššiu priemernú hladinu kobalamínu v sére ako kontrolná skupina a ich priemerná hladina tHcy bola znížená o 39%, ale v kontrolných skupinách zostala nezmenená, čo naznačuje metabolickú odpoveď na kobalamín. Doplnok označuje.

Hematologické parametre u dojčiat

majú

Vzťah dávka-efekt medzi percentuálnym prírastkom hmotnosti od narodenia do 4 mesiacov s ( a ) obsah hemoglobínu retikulocytov (CHr) a ( ) priemerný objem buniek (MCV) po 4 mesiacoch podľa generalizovaných aditívnych modelov. Krivky dávka-odozva sú zobrazené ako plné čiary s 95% intervalmi spoľahlivosti ako bodkované čiary.

  • Stiahnite si snímku PowerPoint

Po 6 týždňoch bola retikulocytóza pozorovaná nepriamo s hladinami Hb (r = -0,62, P0,06)).

hematologické

Vzťah dávka-účinok medzi ( a ) Hladina hemoglobínu (Hb), ( ) stredný objem buniek (MCV) a ( c ) Obsah hemoglobínu retikulocytov (CHr) pre počet retikulocytov 6 týždňov podľa zovšeobecnených aditívnych modelov. Krivky dávka-odozva sú zobrazené ako plné čiary s 95% intervalmi spoľahlivosti ako bodkované čiary.

  • Stiahnite si snímku PowerPoint

diskusia

U prevažne dojčených detí s biochemickým profilom, ktorý naznačuje poškodenie funkcie kobalamínu, mala suplementácia kobalamínu silný vplyv na metabolické markery stavu kobalamínu po 6 týždňoch (9), ale žiadny vplyv na hematologické parametre po 4 mesiace. Vysoké percento prírastku hmotnosti po pôrode a mužské pohlavie boli hlavnými determinantmi hematologických parametrov a súviseli s nižším stavom železa. Retikulocytóza bola spojená s nízkou hladinou MCV a CHr v 6. týždni aj 4. mesiaci, čo naznačuje existenciu erytropoézy s obmedzeným obsahom železa počas prvých niekoľkých mesiacov života u hlavne dojčených detí.

Formálne obmedzenia koncepcie štúdie zahŕňali nedostatok oslepenia vyšetrovateľov a matiek injekciou kobalamínu a nedostatok injekcie placeba v kontrolnej skupine. Tieto faktory však nepovažujeme za dôležité pre hematologický výsledok u dojčiat po 4 mesiacoch.

Na stanovenie sérovej kyseliny listovej a kobalamínu sa použili mikrobiologické testy. V posledných niekoľkých rokoch sú čoraz populárnejšie konkurenčné väzobné luminiscenčné testy, ale mikrobiologický test sa stále považuje za zlatý štandard pre folát v sére (13). Zatiaľ čo mikrobiologický test určuje biologicky aktívny kobalamín, testy kompetitívnej luminiscencie zahŕňajú aj funkčne neaktívne analógy kobalamínu. Posledné štúdie naznačujú, že luminiscenčné testy kompetitívnej väzby môžu preukázať rozsiahlu dysfunkciu, najmä keď sú zaznamenané falošné normálne hodnoty deficitu kobalamínu (14).

U týchto mladých dojčiat počty retikulocytov nepriamo korelovali s hladinami Hb a súviseli s nízkymi MCV a CHr indikátormi erytropoézy s obmedzeným obsahom železa (26). Na rozdiel od dospelých, u ktorých sú nízke hladiny Hb v dôsledku nedostatku železa zvyčajne spojené s normálnym alebo zníženým počtom červených krviniek (27), bol vysoký počet červených krviniek pozorovaný u dojčiat vo veku 6 až 48 mesiacov s anémiou z nedostatku železa (28). Retikulocytóza pozorovaná v tejto vekovej skupine bola výraznejšia u ľahkej vs. ťažkej anémie, čo je spôsobené tým, že závažný nedostatok železa je spojený s dyserytropoézou, ktorá môže znížiť počet prežívajúcich erytrocytov (28).

Záver

U dojčiat s biochemickými dôkazmi zhoršenej funkcie kobalamínu mala suplementácia kobalamínu výrazný účinok na intracelulárne metabolické markery stavu kobalamínu po 6 týždňoch, ale nemala žiadny vplyv na hematologické parametre po 4 mesiacoch. U týchto primárne kojených detí bolo hlavným percentom hematologických parametrov vysoké percento prírastku hmotnosti a mužské pohlavie, ktoré súviseli s nižším stavom železa po 4 mesiacoch. Ďalšie štúdie o stave mikroživín u mladých, hlavne dojčených detí sú oprávnené.

Metódy

Populácia a dizajn štúdie

V období od decembra 2004 do apríla 2006 bolo 107 zdravých 6-týždňových detí, vrátane troch párov dvojčiat, a ich 104 matiek prijatých miestnou zdravotnou službou v nórskom Bergene a bolo zaradených do intervenčnej štúdie kobalamínu. Podrobný opis študijných metód a výsledkov bol uverejnený (9). Hematologické údaje boli k dispozícii pre 107 kojencov v 6. týždni a 102 kojencov v 4. mesiaci a tieto deti boli zahrnuté do tejto analýzy.

Dotazník o výžive kojencov a matiek, doplnkoch vitamínov, rastových parametroch, parite a konzumácii tabaku matiek bol vyplnený po 6 týždňoch a 4 mesiacoch. Pretože všetky rôzne typy umelej výživy a kaše obsahovali železo, počiatočná dojčenská výživa bola definovaná ako výlučne dojčené a nie výlučne dojčené, čo zahŕňalo kombinované dojčenie a kŕmenie umelou výživou, iba kŕmenie umelou výživou a obe boli kombinované s pevnou stravou.

Dojčatá boli blokované randomizovane na 400 ul intramuskulárnej injekcie. g Hydroxykobalamín (vitamín B12 Depot; Nycomed Pharma, Asker, Nórsko) (n = 54, kobalamínová skupina) alebo bez liečby (n = 53, kontrolná skupina). Pracovníci laboratória zodpovední za odber a analýzu krvi boli slepí voči skupinovým úlohám.

Etický súhlas s protokolom udelil regionálny výbor pre etiku lekárskeho výskumu a matky dali informovaný informovaný súhlas. Táto štúdia je zaregistrovaná na ClinicalTrials.gov pod číslom NCT00479479.

Odber krvi a biochemická analýza

Vzorky krvi boli získané v 6. týždni a 4. mesiaci anteubitálnou venepunkciou a odobraté do skúmaviek s vakuovým filtrom EDTA (Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ). Hematologické parametre (Hb, MCV, erytrocyty, šírka distribúcie červených krviniek, CHr, leukocytov a krvných doštičiek) sa analyzovali do 4 hodín pomocou automatizovaného hematologického analyzátora (ADVIA 120; Bayer Diagnostics, Tarrytown, NY). Indexy retikulocytov (retikulocyty a CHr) boli k dispozícii pre subpopuláciu študovanej skupiny (n = 62 zo 107 počas 6 týždňov, n = 72 zo 102 počas 4 mesiacov an = 58 zo 102 spárovaných údajov za 6 týždňov a 4 mesiace). .

Krvné vzorky použité na výrobu EDTA plazmy sa vložili do ľadovej vody a plazma sa oddelila do 4 hodín. Plazmatické hladiny tHcy a kyseliny metylmalonovej sa skúmali pomocou metódy plynovej chromatografie a hmotnostnej spektrometrie založenej na derivatizácii metylchlórformiátu (29). Sérum sa získalo odberom krvi do skúmaviek vacutainer bez prísady (Becton Dickinson). Sérový kobalamín bol stanovený pomocou mikrobiologického testu Lactobacillus leichmannii (30) a sérového folátu pomocou mikrobiologického testu Lactobacillus casei (31).

Štatistická analýza

Výsledky sú uvedené ako medián a medzikvartilový rozsah, ako aj priemer a SD. Mediány sa porovnali s Wilcoxonovým znamienkovým testom a Mann-Whitneyovým U testom a stredné hodnoty so Studentovým T testom. Rozdiely v kategorických premenných sa testovali testom 2 testu.

Spearmanova korelácia sa použila na hodnotenie vzťahu medzi percentuálnym prírastkom hmotnosti a pôrodnou hmotnosťou a vzťahom medzi hematologickými parametrami po 6 týždňoch a 4 mesiacoch. Na vyhodnotenie vzťahu hematologických parametrov dieťaťa (Hb, MCV a CHr) vo veku 4 mesiacov s kobalamínovou intervenciou, pohlavím, percentuálnym prírastkom hmotnosti od narodenia do 4 mesiacov, dojčenskou výživou a použitím doplnkov železa matkou od 6 týždňov do 4 sa použilo niekoľko lineárnych regresných modelov. Mesiace

Vzťah medzi dávkou a odpoveďou na hladiny Hb, MCV a CHr pri počte retikulocytov 6 týždňov a percentuálny prírastok hmotnosti CHr a MCV po 4 mesiacoch boli graficky znázornené pomocou generalizovaných aditívnych modelov.

Zovšeobecnené modely aditív boli vypočítané pomocou softvérového balíka mgcv (verzia 1.4-1) v R (Die R-Stiftung für Statistisches Rechnen, verzia 2.8.1; Viedeň, Rakúsko) a štatistického balíka SPSS (verzia 18) bol vyvinutý pre ktorý využíva zostávajúce štatistické vyhodnotenia. Hodnoty P na oboch stranách