NOVÉ MODELY ZVIERAT PRE INDIKÁCIU CLAUDICATIO INTERMITTENS - PDF na stiahnutie zadarmo

1 NOVÉ MODELY ZVIERAT PRE INDIKÁCIU CLAUDICATIO INTERMITTENS SUSANNE VOGELSBERGER INAUGURAL DISSERTATION pre získanie titulu Dr. med. veterinár. na Katedre veterinárneho lekárstva Univerzity Justusa Liebiga Giessen édition scientifique VVB LAUFERSWEILER VERLAG

intermittens

2 Dielo je chránené autorskými právami vo všetkých jeho častiach. Akékoľvek použitie nie je povolené bez písomného súhlasu autora alebo vydavateľa. To platí najmä pre reprodukcie, preklady, mikrofilmovanie a ukladanie a spracovanie v elektronických systémoch. 1. vydanie 2006 Všetky práva vyhradené. Žiadna časť tejto publikácie sa nesmie reprodukovať, ukladať v systéme vyhľadávania alebo prenášať v akejkoľvek podobe alebo akýmikoľvek prostriedkami, elektronicky, mechanicky, fotokopírovaním, nahrávaním alebo inak, bez predchádzajúceho písomného súhlasu autora alebo vydavateľov. vydanie 1, VVB LAUFERSWEILER VERLAG, Wettenberg Vytlačené v Nemecku VVB LAUFERSWEILER VERLAG édition scientifique GLEIBERGER WEG 4, D WETTENBERG Tel: Fax:

3 Z Ústavu fyziológie živočíchov na Univerzite Justusa Liebiga v Giessene Školiteľ: Prof. Dr. W. Clauss a Katedra kardiovaskulárneho výskumu v Sanofi-Aventis Deutschland GmbH Vedúci: Prof. Dr. W. Linz NOVÉ ZVIERAČNÉ MODELY PRE INDIKÁCIU CLAUDICATIO INTERMITTENS INAUGURAL-DISSERTATION na získanie doktorandského titulu Dr.med.vet. predložila veterinárna lekárka Susanne Vogelsbergerová z Dernbachu/WW Giessen 2006 na oddelenie veterinárneho lekárstva Justus Liebig University Giessen

4 So súhlasom Veterinárneho lekárstva Univerzity Justusa Liebiga v Giessene Dekan: Expert: Prof. Dr. M. Reinacher prof. Dr. W. Clauss prof. Dr. Deň sporu W. Linca:

7 Obsah 1 ÚVOD LITERATÚRA PREHĽAD ischemickou chorobou dolných končatín (PAD) epidemiológie a rizikové faktory, epidemiológiu rizikových faktorov patofyziológii aterosklerózy Postupujte podľa aterosklerotické SÚVISIACE stenóza diagnóza a patológie TERAPIE Liečba zvýšeným kardiovaskulárnym rizikom liečbu rizikových faktorov antiagregačný liečbu príznakov Konzervatívna liečba chirurgická liečba predklinických modeloch pre indikáciu CIEĽY TOTOHO PRACOVNÉHO MATERIÁLU A METÓDY EXPERIMENTÁLNE ZVIERATÁ A ICH POLOHA OŠETRENIE CILOSTAZOL ŠTUDIJNÉ PROTOKOLY MODELOV ZVIERAT V RAT Invazívne meranie svalovej únavy Neinvazívne meranie svalovej únavy

8 Obsah ZVIERAČNÝ MODEL NA MYŠI Meranie bežeckého výkonu CVIČENIE ZVIERATEĽSKÉHO MODELA NA RATU Indukcia unilaterálnej ischémie zadnej končatiny Meranie perfúzneho tlaku Meranie svalovej únavy (invazívne) Meranie svalovej únavy (neinvazívne) Histologické vyšetrenia Krvné vyšetrenie Meranie zadného zvierača b Výsledky krvi ZÁLOHOVÁ ISÉMIA V RAT VÝVOJ MODELU V DIABETICKÝCH RAT a rýchlosť kontrakcie (df/dt max) relaxačný čas (RZ) a relaxačná rýchlosť (df/dt min) VALIDÁCIA MODELOV ZDF/GMI/CRL- (FA/LEAN) RATY Telesné hmotnosti Výsledky krvných testov Aplikácia Likácia testovanej látky Krvný tlak Meranie perfúzneho tlaku Meranie svalovej únavy (invazívne)

9 Obsah Kontrakčná sila Kontrakčná rýchlosť Relaxačný čas Relaxačná rýchlosť ZDF/GMICRL- (FA/FA) RATTEN Telesné hmotnosti Výsledky vyšetrenia krvi Aplikácia testovanej látky Krvný tlak Meranie perfúzneho tlaku Meranie svalovej únavy (invazívne) Kontrakčná sila Kontrakčná rýchlosť Relaxačná doba Relaxačná rýchlosť Meranie svalovej únavy (neinvazívne) Kontrakčná sila Kontrakčná rýchlosť svalových buniek v µm kapilárach na svalovú bunku BILATERÁLNA HISTÓRIA ISÉMIA V MOZE C57BL/6-MICE Meranie výkonu bežeckého bicykla Celková vzdialenosť ENOS -/- MICE Meranie výkonu bežeckého bicykla Celková vzdialenosť Najvyššia a priemerná rýchlosť Najdlhšia a najdlhšia doba behu Celkový čas na behu na bicykli

10 Obsah Klasifikácia symptómov (1. stupeň - 4. stupeň) Celková vzdialenosť u neoperovaných enos -/- myší Meranie tlaku krvi DISKUSIA O NOVÝCH ZVIERAČNÝCH MODELOCH VALIDÁCIA ZVIERAČNÝCH MODELOV ZHRNUTIE ZHRNUTIE VYHLÁSENIE O PODNIKANÍ

11 Skratky Zoznam skratiek A. Arteria Aa. Arteriae ABI členkový brachiálny index ADP adenozíndifosfát ASS kyselina acetylsalicylová BH 4 tetrahydrobiopterín BSI Bandeiraea simplicifolia I-izolektín C triedy Celcius C57BL/6 inbredná línia laboratórna myš približne približne Ca 2+ tábor cgmp cm CRL CRP df/dt max Mice a kol. F FDA gg/s HbA 1C HDL IGF IgG Kg KHK LDI vápenaté ióny cyklický adenozín monofosfát cyklický guanozín monofosfát centimetre (10 - 2 metre) Charles River Laboratories rýchlosť C-reaktívnych proteínov rýchlosť kontrakcie relaxácie endoteliálna aplikácia NO syntázy enos deficientné myši gram per andii Druhý glykovaný hemoglobín lipoproteín s vysokou hustotou, inzulín podobný rastový faktor, imunoglobulín, gama kilogramy, koronárne ochorenie srdca, laserové dopplerovské zobrazovanie

12 Skratky LDL lipoproteín s nízkou hustotou M. Musculus max. Max. Min. Minúta ml mililitre mm milimetre mmhg milimetre ortuti mmol milimóly ms milisekundy n počet miliampérov MW stredná hodnota NADPH nikotínamid adenín dinukleotid fosfát NO kysličník dusičitý OP operácia p hladina významnosti PAOD periférne okluzívne ochorenie P soľný roztok PDE fosfodiesteráza PDGF doštičkový rastový faktor PGE 1 prostaglandín E 1 PGI 2 prostacyklín I 2 PLC propionyl-L-karnitín Ppm časti na milión PTA perkutánna transluminálna angioplastika ROS reaktívne formy kyslíka RZ relaxačný čas sc subkutánna SEM štandardná chyba strednej sgc rozpustnej guanylátcyklázy V. objem Vena

13 skratiek napr. B. napríklad ZDF Ratte Zucker diabetická tučná krysa

15 Úvod 1 Úvod Periférna arteriálna okluzívna choroba (PAD) je častým prejavom systémovej aterosklerózy u starších ľudí (Ouriel 2001). Zúženie tepien spôsobené aterosklerózou vedie k zníženému prívodu krvi do svalov končatín. Väčšina (2/3) pacientov je asymptomatických (štádium I podľa Fontaineovej), ale dá sa identifikovať podľa zníženého indexu ramennej kosti (ABI) 16 Úvod Predklinické modely, ktoré sú v súčasnosti dostupné pre indikáciu PAOD, však nie sú štandardizované a tiež do značnej miery neoverené klinicky účinnými látkami. Cieľom tejto práce bolo preto vyvinúť nové štandardizované modely in vivo pre indikáciu prerušovaná klaudikácia, ktoré sa čo najviac podobajú klinickej situácii. Tieto modely by mali vychádzať zo súčasného terapeutického štandardu Cilostazol možno validovať a potom ho možno použiť na testovanie nových vývojových látok

18 Prehľad literatúry Bolo by možné preukázať, že čím výraznejšia je oklúzia, tým vyššia je úmrtnosť (Hiatt 2001). Obrázok ročnej úmrtnosti u pacientov s PAD (upravené podľa Diehm et al. 2004) Rizikové faktory PAD často postihuje starších pacientov (Ouriel 2001). Riziko rozvoja PAOD sa zdvojnásobuje každých desať rokov od 40 rokov (Hiatt 2001). Okrem veku je jedným z najväčších rizikových faktorov fajčenie. V porovnaní s nefajčiarmi majú fajčiari 1,7 až 5,6-krát väčšie riziko vzniku PAD a je u nich trikrát vyššia pravdepodobnosť výskytu symptómov (Fowkes et al. 1992, Dormandy a Rutherford 2000). Riziko amputácie je ďalej 11% u fajčiacich pacientov a 0% u nefajčiacich pacientov (Dormandy et al. 1999). Diabetes mellitus je tiež rizikovým faktorom pre vznik PAOD. Nie je však jasné, či ide o samotný diabetes (Dormandy et al. 1999), alebo o tých 16, ktoré sa vyskytujú pri tomto ochorení