Preskúmanie a charakteristika špeciálneho

Technische Universität Dresden Matematicko-prírodná fakulta Ústav zoológie Predseda fyziológie molekulárnych buniek a endokrinológie Vyšetrenie a charakterizácia špeciálneho extraktu z rebarbory ​​na zvieracom modeli pre úvodnú dizertačnú dizertačnú prácu pre získanie titulu Doctor rerum naturalium na Technickej univerzite v Drážďanoch, ktorú predniesol Dipl. Biol. Anja Papke z Drážďan Drážďany 7. augusta. 010

preskúmanie

Recenzent: Prof. Dr. Günter Vollmerov inštitút pre zoológiu TU Drážďany Prof. Dr. Alois Jungbauer Institute for Applied Microbiology University of Natural Resources and Life Sciences, Vienna Defense Day: 4.11.100

Poistenie Týmto prehlasujem, že som pripravil súčasnú prácu s názvom: Testovanie a charakterizácia špeciálneho extraktu z rebarbory ​​na experimentálnom zvieracom modeli pre klimaktérium bez zbytočnej pomoci tretích strán a bez použitia akýchkoľvek iných než uvedených pomôcok. Za také sa považujú myšlienky prevzaté priamo alebo nepriamo z externých zdrojov. Diplomová práca nebola predložená inému skúšobnému orgánu v Nemecku ani v zahraničí v rovnakej alebo podobnej podobe. Drážďany 7. augusta 2010 Anja Papke

Za moju rodinu a priateľov, za ich podporu v priebehu rokov.

OBSAH 5.4 SKÚŠKA RÔZNYCH BUNKOVÝCH RIADOK Z HĽADISKA ICH VHODNOSTI AKO VITRO MODEL NA SKÚŠANIE ÚČINKOV SPÔSOBENÝCH CHYBOU 731. 1 5.5 ZHRNUTIE VÝSLEDKOV VÝRAZU MRNA ZVIERAČNÝCH EXPERIMENTOV V1-V3. 16 6 DISKUSIA. 19 6.1 Vhodnosť génov AHR A AHR REGULOVANÝCH GÉNOV AKO ZNAČKOVACÍCH GÉNOV PRE ESTROGÉNNE ÚČINKY. 130 6. HODNOTENIE POUŽITÝCH KONTROL. 13 6.3 BEZPEČNOSŤ CHYBY 731, POKIAĽ IDE O PROLIFERATÍVNE ZMENY V DERE. 137 6.4 ÚČINKY CHYBY 731 V SKÚŠANÝCH ORGÁNOCH. 140 6.4.1 Účinky na telesnú hmotnosť. 141 6.4. Účinky na maternicu. 141 6.4.3 Účinky na kosť. 145 6.4.4 Účinky na pečeň. 145 6,5 MOŽNÉ MECHANIZMY CHYBY 731. 146 6.6 VYŠETRENIE RÔZNYCH BUNKOVÝCH RIADOK Z HĽADISKA ICH VHODNOSTI AKO VITRO MODEL NA SKÚŠANIE ÚČINKOV VYZÝVANÝCH CHYBOU 731. 154 7 ZÁVER A VÝHĽAD. 156 ZOZNAM LITERATÚRY. 158 PRÍLOHA. 178 ILUSTRÁCIÍ. 178 ZOZNAM OBRÁZKOV. 181 ZOZNAM TABULIEK. 186

ZOZNAM SKRATIEK Zoznam skratiek Skratka Význam 1A Cytochróm C oxidáza podjednotka 1A Obr. Obrázok AF-1 a - Aktivačná funkcia 1 a AhR Arylhydrokarbónový receptor AK Protilátky AP-1 Aktivačný proteín 1 APS Peroxodisíran amónny Aqua bidest dvakrát destilovaná voda AhRKO BSA AlbuminR Knock-out bpR C3 doplnok C3 CaBP9k proteín viažuci vápnik 9 kDa cDNA komplementárna DNA Clu klastrín Cyp1A1 cytochróm P450-1A1 deň dATP desoxyadenosintriphofát DBD väzbová doména DNA DCC na dextránom ošetrené aktívne uhlie filtrované FBS dCTP deoxycytosíntrifosfát diksulfonát deoxydifosínteksodeksulfonát deoxygénsexoteksulfonát deoxygui Diarylpropylnitrily I.

ZOZNAM SKRATIEK Skratka Význam dttp Deoxytymidín trifosfát EE benzoát EDTA ER ERE ERαKO ERβKO EtOH FKS g Gst-Ya h HPLC-H O HRP HT Hsp 17β-estradiol 3-benzoát-etyléndiamintetraoctová kyselina reagujúca s von-estrogénovou Telové sérum etanolu gramy glutatión-S-transferázy ya hodinu pomocou vysokotlakej kvapalinovej chromatografie (HPLC) čistená voda chrenová peroxidáza (chrenová peroxidáza) hormonálna terapia proteín tepelného šoku IGF-1 inzulínový rastový faktor 1 IGF-1R IGF-1 receptor IOD integrálna optická hustota kda kilodalton kg Kg telesná hmotnosť Ki67 proliferačne špecifický antigén Ki67 KO knock-out LBD väzbová doména ligandu M molárny mg miligramov minúta ml mililiter MMLV-RT Moloney vírus myšej leukémie reverzná transkriptáza II

ZOZNAM SKRATIEK Skratka Význam mrna messenger-rna NF-кB Nuclear Factor кb OECD Organisation for Economic Cooperation and Development ovx ovariectomized/ovariectomized PBS fosfátom pufrovaný soľný roztok PBST fosfátom pufrovaný soľný roztok s 0,1% Tween 0 PCNA proliferujúci bunkový jadrový antigén (nukleárne bunky proliferujúce bunkové nukleárne antigény) PCR Reťazová reakcia PMSF fenylmetylsulfonylfluorid PPT propylpyrazoletriol PR progesterónový receptor RNA ribonukleová kyselina otáčky za minútu RT izbová teplota qpcr kvantitatívna PCR v reálnom čase sc subkutánny selektívny modulátor estrogénových receptorov SERM Selektívny modulátor estrogénových receptorov SERM SDS dodecylsulfát sodný fingovaný falošný stimulačný proteín SP-1 1 Tabuľka TEMED tetrametyletyléndiamín VEGF vaskulárny xén endoteliálny rastový faktor reagujúci na rastový faktor VEGFR- VEGF iniciatíva receptorov XIRE Zdravie žien III