Test QuantiFERON TBC; Ústredná vojenská pohotovostná fakultná nemocnica Dr.

Test QuantiFERON TBC

Všeobecné informácie

ústredná

Tuberkulóza (TB) je nákazlivé respiračné infekčné ochorenie spôsobené baktériami obsiahnutými v komplexe Mycobaterium tuberculosis (M. tuberculosis, M. bovis a M. africanum).

Infekcia tuberkulózy zahŕňa aktívne aj latentné formy; Latentná tuberkulóza sa vyskytuje, keď je človek vystavený M. tuberculosis a telo infekciu kontroluje, ale nepodarí sa jej ju zlikvidovať. Odhaduje sa, že približne 10% ľudí s latentnou tuberkulózou prejde počas života do aktívnej formy. Príčiny spojené s reaktiváciou latentnej infekcie zahŕňajú infekciu HIV a liečbu antagonistami TNFa. Z tohto dôvodu je diagnostika latentnej tuberkulózy dôležitým krokom v prevencii opätovnej aktivácie infekcie, najmä u ľudí s vysokým rizikom. Liečba latentnej tuberkulózy môže významne znížiť riziko progresie do aktívnych foriem.

QuantiFERON TB, vyvinutý spoločnosťou Cellestis Limited (Austrália), bol schválený FDA v máji 2005 ako test in vitro užitočný pri diagnostike infekcie Mycobacterium tuberculosis pre latentnú aj aktívnu formu. V Európskom spoločenstve bol test certifikovaný na použitie v rovnakých situáciách, v ktorých je indikovaný tuberkulínový test.

Až donedávna bol tuberkulín IDR jedinou metódou diagnostiky infekcie TBC. Aj keď je tuberkulínový test široko používaný, má množstvo obmedzení. V prípade QuantiFERONU, čo je laboratórny test vykonaný z krvi, stimulácia lymfocytov antigénmi TB prebieha vo flebotomickej trubici, a nie intradermálne. Z tohto dôvodu je vylúčený „posilňujúci“ účinok, ktorý sa môže vyskytnúť v prípade tuberkulínového testu (vykonanie kožného testu na osobe, ktorá nebola vystavená infekcii TBC, stimuluje imunitný systém a spôsobuje, že v jednej fáze reaguje na tuberkulín. po opakovaní kožného testu).

Na rozdiel od IDR v tuberkulíne nie sú výsledky testov ovplyvnené očkovaním BCG; predchádzajúce infekcie netuberkulóznymi mykobaktériami majú tiež menší vplyv. Eliminujú sa tiež nežiaduce reakcie z precitlivenosti, ktoré sa môžu vyskytnúť pri kožnom teste. Tiež výsledky testu QuantiFERON TB sú oveľa objektívnejšie, bez chýb v čítaní a interpretácii.

Indikácie testu:

1. Môže sa použiť vo všetkých situáciách, kde sa bežne používa tuberkulínový test:
-klinické a rádiologické podozrenie na aktívnu tuberkulózu;
-kontakty pacientov s nákazlivými formami TBC;
-skríning osôb s vysokým rizikom: pracovníci zdravotníckych zariadení a ústavov starostlivosti, ľudia z prostredia so zlou hygienou atď.

Štúdia z roku 2008 naznačila, že test možno použiť na diagnostiku latentnej tuberkulózy u detí starších ako 2 roky s rovnakými výkonnostnými vlastnosťami ako dospelí.

Poznámka: QuantiFERON TB nahrádza tuberkulínový test; oba testy by sa nemali používať súčasne.

2. Môže to byť nástroj na sledovanie pacientov s aktívnou tuberkulózou. Existuje niekoľko štúdií, ktoré naznačujú potenciálnu užitočnosť testu pri hodnotení účinnosti tuberkulostatickej liečby sledovaním množstva uvoľneného interferónu gama, ktoré sa časom mení.

Podľa jednej štúdie môže mať hodnotenie vykonané spoločnosťou QuantiFERON 2 mesiace po začiatku liečby významnú prediktívnu hodnotu, pokiaľ ide o pravdepodobnosť, že na konci fázy intenzívnej liečby.

3. Môže sa použiť pred imunosupresívnou liečbou (napr. Protilátkami anti-TNFα) alebo pred transplantáciou orgánu na vylúčenie latentnej infekcie M. tuberculosis.

zbierka

Výcvik pacientov - imunosupresívna liečba (cytostatiká) sa má vysadiť najmenej 14 dní pred zberom.

Odobratý exemplár - príde krv.

Zberová nádoba - vacutainer s heparinátom lítnym.

Skúšobný objem - najmenej 10 ml heparinizovanej krvi.

Vyskúšajte stabilitu - krv musí prísť do 12 hodín (max. 16 hodín) do laboratória, kde sa test vykonáva, a počas tejto doby sa musí uchovávať pri izbovej teplote. Chladenie vzorky je kontraindikované.

Príčiny odmietnutia dôkazov - vzorky, ktoré prekročili rozsah stability, chladené alebo zmrazené vzorky.

Metóda a interpretácia výsledkov

Heparinizovaná krv pacienta sa inkubuje 24 hodín spolu so zmesou syntetických peptidov, ktoré simulujú 3 špecifické proteíny pre M. tuberculosis: ESAT-6, CFP-10 a TB 7,7 (p4). Tieto proteíny sú produkované všetkými kmeňmi Mycobacterium tuberculosis a patogénnymi kmeňmi Mycobacterium bovis, ale nie kmeňmi zahrnutými do BCG vakcíny. Pri detekcii infekcie M. tuberculosis je teda QuantiFERON špecifickejší ako tuberkulínový test. Ak sú vo vzorke krvi pre tieto proteíny pamäťové lymfocyty (čo sa stane v prípade infekcie pred mnohými rokmi), budú tieto bunky produkovať γ-interferón v kontakte so špecifickým antigénom. Kvantitatívne stanovenie γ-interferónu uvoľňujúceho plazmu sa vykonáva vysoko citlivým enzýmovým imunosorbentným testom (ELISA). Na zabezpečenie platnosti testu sa musia použiť pozitívne a negatívne kontroly. Pozitívnu kontrolu predstavuje fytohemaglutinín (mitogénna látka) a negatívnu kontrolu soľný roztok (používa sa ako slepá skúška na meranie bazálnej hladiny y-interferónu). Množstvo uvoľneného y-interferónu je vyjadrené v IU/ml.

Interpretácia výsledkov

Výsledok negatívny (množstvo uvoľneného y-interferónu
Za týchto podmienok je možné vylúčiť infekciu Mycobacterium tuberculosis. U pacientov s chronickou infekciou HIV alebo s inými príčinami závažnej imunodeficiencie (imunosupresívna liečba, určité hematologické stavy: leukémie, lymfómy, určité solídne nádory: oblasť pľúc alebo krku, cukrovka, silikóza, chronické zlyhanie obličiek) sa majú užívať. zváženie súčasného imunitného stavu a použitie iných metód na diagnostikovanie infekcie.

Nedávna štúdia v Japonsku naznačuje, že test QuantiFERON TB je užitočnejší na diagnostiku infekcie tuberkulózy u pacientov so zníženou imunitou ako tuberkulínový test. Avšak vzhľadom na to, že u pacientov s lymfopéniou liečených imunosupresívnou liečbou sa dosiahla vyššia miera nepresvedčivých výsledkov, je potrebné v tejto kategórii pacientov interpretovať výsledky opatrne.

V prípade negatívneho výsledku u ľudí, ktorí nedávno prišli do styku s pacientmi s diagnostikovanými formami nákazlivej TBC, to potvrdí nový test vykonaný po 6 - 8 týždňoch od konca expozičného obdobia (ako v prípade tuberkulínového testu). ).

Výsledok pozitívne (množstvo uvoľneného y-interferónu ≥ 0,35 IU/ml)

Pozitívny výsledok naznačuje infekciu M. tuberculosis. U tohto testu nie je vo väčšine prípadov možné rozlíšiť latentnú a aktívnu infekciu.

V prípade klinického podozrenia na aktívnu tuberkulózu zostávajú v platnosti všetky metódy mikrobiologickej diagnostiky (mikroskopia, kultivácia) a molekulárnej biológie.

Výsledok nepresvedčivé

Vyskytuje sa v situácii, keď sa nezískali validačné kritériá ani pre mitogénnu pozitívnu kontrolu (neadekvátna odpoveď

Limity a interferencie

Prediktívna hodnota testu závisí od prevalencie infekcie M. tuberculosis v testovanej populácii. Každý výsledok musí byť interpretovaný v klinickom a epidemiologickom kontexte pacienta.