Univerzita veterinárskeho lekárstva Hannover
Univerzita veterinárskeho lekárstva Hannover Vyhodnotenie výživových účinkov na kinematiku a dĺžku telomér u starých psov NESPRÁVNE ZATVORENIE získať titul doktora veterinárneho lekárstva - Doctor medicinae veterinariae - (Dr. med.vet.), Prezentuje Malin Lorke Bremen Hannover 2017
Vedecký dozor: 1. Prof. Dr. med. veterinár. Klinika Ingo Nolte pre malé zvieratá, Nadácia pre veterinárnu univerzitu v Hannoveri 2. PD Dr. rer. nat. Klinika Huga Murua Escobara pre malé zvieratá Univerzita veterinárneho lekárstva Hannover a Klinika hematológie, onkológie a paliatívnej medicíny Univerzitná medicína Rostock 1. Recenzent: Prof. Dr. med. veterinár. 2. recenzent Ingo Nolte: Prof. Dr. rer. nat. Hermann Seifert Katedra všeobecnej rádiológie a lekárskej fyziky Deň ústnej skúšky: 11. mája 2017
Za mojich rodičov a za Andreasa
Prvú časť tejto práce prijal nasledujúci časopis: Journal of Veterinary Science: Komparatívna kinematická analýza chôdze u mladých a starých psov Beagle Malin Lorke, Maray Willen, Karin Lucas, Martin Beyerbach, Patrick Wefstaedt, Hugo Murua Escobar, rukopis Ingo Nolte ID: JVS-16-212 predložené 1. júna 2016 prijaté 2. januára 2017 Druhá časť tejto práce bola predložená nasledujúcemu časopisu: BMC Veterinary Research: Vplyv antioxidantov, mitochondriálnych kofaktorov a omega-3 mastných kyselín na dĺžku telomer a kinematický kĺb mobilita u mladých a starých pastierskych psov Malin Lorke, Maray Willen, Karin Lucas, Jan Torben Schille, Martin Beyerbach, Patrick Wefstaedt, Hugo Murua Escobar, Ingo Nolte ID rukopisu: BVET-D-16-00534 predložené 17. septembra 2016
Spoluautorka sa zúčastnila na nasledujúcich rukopisoch predložených pre partnerskú štúdiu: BMC Veterinary Research: Individuálne upravený test odolnosti odhalí rozdiely vo fyzickej zdatnosti medzi mladými a starými psami bíglov Maray Willen, Malin Lorke, Patrick Wefstaedt, Karin Lucas, rukopis ID Ingo Nolte: BVET-D-15-00459 predložené 17. decembra 2015 PLOS ONE: Účinky obohatenej stravy na fyzickú zdatnosť a kinetické údaje starnúcich nemeckých ovčiakov Maray Willen, Malin Lorke, Sebastian Willen, Karin Lucas, Patrick Wefstaedt, Ingo Nolte ID rukopisu: PONE-D-16-36933 odoslané 15. septembra 2016
Časti tejto práce boli predstavené na nasledujúcich odborných konferenciách: Poster: 24. výročné zasadnutie divízie DVG Internal Medicine and Clinical Laboratory Diagnostics Division InnLab (29. januára, 30. januára 2016, Berlín): Vyhodnotenie analýzy Southern Blot terminálnych reštrikčných fragmentov na meranie dĺžky telomér leukocytov u psov M. Lorke, M. Willen, A. Anders, JT Schille, S. Willenbrock, F. Ripoli, K. Lucas, H. Murua Escobar, I. Nolte Prednáška: DVG-Vet-Congress/62. ročník kongresu odbornej skupiny DVG Nemecká spoločnosť pre medicínu malých zvierat DGK-DVG (27. októbra, 30, 2016, Berlín): Štúdia skúmajúca vybrané účinky súvisiace so stravou na fyzickú zdatnosť a dĺžku telomér u starších psov M. Lorke, M. Willen, K. Lucas, H. Murua Escobar, P. Wefstaedt, I. Nolte Prednáška: 24. výročná konferencia odbornej skupiny DVG Internal Medicine and Clinical Laboratory Diagnostics Innlab (29. januára 2016, Berlín) Porovnanie fyzickej zdatnosti medzi mladými a starými Beagles M. Willen, M. Lorke, A. Anders, P. Wefstaedt, K. Lucas, I. Nolte
Obsah Obsah 1. Úvod. 1 2. Prehľad literatúry. 3 2.1 Starnutie u psov. 3 2.2 Proces starnutia buniek. 3 2.2.1 Analýza dĺžky telomer. 5 2.3 Proces starnutia muskuloskeletálneho systému. 7 2.3.1 Kinematická analýza chôdze. 9 2.4 Výživové doplnky pre starého psa. 12 3. Vzor, materiál a metódy. 17 3.1 Dizajn štúdie a zvieratá. 17 3.2 Analýza dĺžky telomer. 18 3.3 Kinematická analýza chôdze. 20 3.3.1 Získavanie údajov. 20 3.3.2 Vyhodnotenie údajov. 21 3.4 Štatistická analýza. 23 4. Výsledky. 24 4.1 Štúdia 1. 24 4.1.1 Abstrakt. 25 4.1.2 Úvod. 26 4.1.3 Materiály a metódy. 27 4.1.3.1 Zvieratá. 27 4.1.3.2 Zhromažďovanie údajov. 28 4.1.3.3 Analýza údajov. 29 4.1.3.4 Štatistická analýza. 30
Obsah 4.1.4 Výsledky. 30 4.1.4.1 Ramenný kĺb. 31 4.1.4.2 Lakťový kĺb. 31 4.1.4.3 Karpálny kĺb. 31 4.1.4.4 Bedrový kĺb. 32 4.1.4.5 Kolenný kĺb. 32 4.1.4.6 Tarzálny kĺb. 32 4.1.5 Diskusia. 33 4.1.5.1 Vekové obmedzenie pohyblivosti kĺbov. 33 4.1.5.2 Kontrastné zmeny. 34 4.1.5.3 Postup analýzy kinematickej chôdze. 35 4.1.5.4 Obmedzenia a budúce vylepšenia. 36 4.1.5.5 Závery. 36 4.1.6 Vyhlásenia. 37 4.1.7 Odkazy. 38 4.1.8 Tabuľky a obrázky. 43 4.2 Štúdia 2. 48 4.2.1 Abstrakt. 49 4.2.2 Pozadie. 50 4.2.3 Metódy. 52 4.2.3.1 Zvieratá a experimentálny dizajn. 52 4.2.3.2 Analýza dĺžky telomer. 53 4.2.3.3 Zber kinematických údajov. 54 4.2.3.4 Analýza kinematických údajov. 55 4.2.3.5 Štatistická analýza. 57 4.2.4 Výsledky. 57 4.2.4.1 Klinické údaje. 57 4.2.4.2 Dĺžka telomerov. 58
Obsah 4.2.4.3 Kinematické uhly kĺbov. 58 4.2.4.3.1 Ramenný kĺb. 59 4.2.4.3.2 Lakťový kĺb. 59 4.2.4.3.3 Karpálny kĺb. 60 4.2.4.3.4 Bedrový kĺb. 60 4.2.4.3.5 Kolenný kĺb. 60 4.2.4.3.6 Tarzálny kĺb. 60 4.2.5 Diskusia. 61 4.2.5.1 Dĺžka telomerov. 61 4.2.5.2 Mobilita kĺbov. 62 4.2.5.3 Dizajn a postupy štúdie. 64 4.2.6 Závery. 65 4.2.7 Skratky. 66 4.2.8 Vyhlásenia. 66 4.2.9 Odkazy. 68 4.2.10 Tabuľky a obrázky. 75 5. Diskusia. 92 6. Zhrnutie. 98 7. Zhrnutie. 101 8. Bibliografia. 104 9. Poďakovanie. 136
Zoznam skratiek Zoznam skratiek BCS = Körperkonditionswert/Skóre stavu tela DNA = Deoxyribonukleová kyselina/Deoxyribonukleová kyselina GRF = Bodenreaktionskraft/Pozemná reakčná sila GRF = Strana s vyššou vertikálnou hodnotou GRF/Strana s vyššou vertikálnou hodnotou GRF GRF = Strana s nižšou vertikálnou hodnotou GRF kbp = Páry Kilobase/Kilo bázové páry MAX = Maximálny uhol kĺbu/Maximálny uhol kĺbu MIN = Minimálny uhol kĺbu/Minimálny uhol kĺbu OC = Alte Gruppe mit Kontrollfutter/Stará skupina s kontrolnou stravou OE = Alte Gruppe mit Aufrichertem Futter/Stará skupina s obohatenou stravou PCR = Polymerasekettereaktion/Polymerázová reťazová reakcia RNA = kyselina ribonukleová/kyselina ribonukleová ROM = rozsah pohybu ROS = druh reaktívneho kyslíka TRF = terminálny reštrikčný fragment/terminálny reštrikčný fragment YC = mladá skupina s kontrolnou stravou YE = mladá skupina s obohateným F. úplná/Mladá skupina s obohatenou stravou
3. Dalo sa očakávať, že materiál, materiál a metódy vyšetrenia budú čakať na ľavú a pravú polovicu tela. Namiesto toho bolo možné zistiť, či existujú rôzne účinky na zdravé alebo kompenzačné a slabšie alebo chromé končatiny. V druhej štúdii sa potom počítala percentuálna zmena medzi začiatkom štúdie a termínmi vyšetrenia po troch a šiestich mesiacoch kŕmenia. Ďalšie podrobnosti o implementácii a vyhodnotení analýzy kinematickej chôdze nájdete v časti s výsledkami v rukopisoch pre štúdiu 1 a 2 (LORKE et al., V tlači; LORKE et al., Predložené). 3.4 Štatistická analýza Vzhľadom na malú veľkosť skupiny 2x n = 5 sa v prvej štúdii tejto práce nepočítalo s normálnym rozdelením. Preto Wilcoxonov neparametrický test poradového súčtu (Mann-Whitneyov test) pre dve nezávislé vzorky (významné pri