Vplyv stravy s obsahom rafinózy a varených strukovín na niektoré procesy v hrubom čreve
Dokumenty
Prepis vplyvu rafinózovej stravy a varených strukovinových semien na niektoré procesy v hrubom čreve.
Food 31 (1987) 10 971-980
Inštitút pre výživu a výživu (riaditeľ: prof. Dr. med. W. B. sZOSTAK), warSZaWa, VR Poľsko
Vplyv rafióznej stravy a varených strukovín na niektoré procesy v krysom hrubom čreve B. JAC
Skúmali sa zmeny hodnoty pH, aktivity enzýmov a mikroflóry v obsahu hrubého čreva potkanov po kŕmení rafinózovým dilt a varených strukovinových semien (sója, hrach, fazuľa). Kŕmenie stravou obsahujúcou 12% rafinózy a kŕmenie semenami legurózy viedlo k zníženiu pH; Ak sa však podali niektoré ďalšie diéty (napr. Sušené mlieko alebo surový perličkový jačmeň), bolo pozorované zníženie hodnoty pH. Pozoruhodná aktivita a-galaktozidázy po leguminóze bola zistená v hrubom čreve potkanov, ale nie v tenkom čreve. Zdrojom aktivity galaktozidázy sú pravdepodobne baktérie s obsahom hrubého čreva (Lactobacillus sp., Enterococncr, Escherichia colq. Medzi typom diéty a izolovanou mikroflórou nie je možné nadviazať žiadny vzťah.
Predpokladá sa, že sacharidy z rodiny rafinózy (rafinóza, stachyóza, verbaskóza) patria medzi faktory, ktoré znižujú výživovú hodnotu semien strukovín. Pretože v tráviacom systéme je nedostatok enzýmov, ktoré štiepia a-galaktosacharidy, nemôžu byť ľuďmi alebo mnohými zvieratami asimilovaní [l -31.
Keď potkany jedia niekoľko dní varené semená sóje, hrachu a fazule, výkaly zvierat obsahujú také množstvo galaktosacharidov, ktoré sotva tvorí 2 až 5% množstva, ktoré sa podáva v potrave [4]. K štiepeniu týchto sacharidov môže dochádzať v hrubom čreve pod vplyvom enzýmov v črevnej flóre. Takto vzniká veľa plynov, najmä vodík a oxid uhličitý [napr. B. 5-71. Množstvo vodíka vylúčeného počas „procesu tvorby plynu“, ktorý sa vytvorí po požití strukovín, vykazuje pozitívnu koreláciu s množstvom galaktosacharidov podávaných v potrave [8,9].
CRISTOFARO a kol. [lo] upriamil pozornosť na zmenu pH v hrubom čreve potkana počas trávenia sójovej múčky. Tento jav videli v súvislosti s tvorbou plynov po konzumácii múky. Diéta s kazeínom alebo mäsom neviedla k tvorbe plynov ani k zníženiu pH v hrubom čreve. Autori zistili pokles pH v hrubom čreve potkanov, aj keď sa 1-3% verbaskóza podávala spolu s potravou, ale neskúmali vplyv iných galaktosacharidov.
Cieľ diplomovej práce: Prehĺbenie poznatkov z biochemických a mikrobiologických hľadísk
972 The Food 31 (1987) 10
Procesy, ktoré sa vyskytujú v organizme po konzumácii semien strukovín. Tento problém nadväzuje na predchádzajúce štúdie [4] a súvisí so zvýšeným záujmom, ktorý sa v posledných rokoch v Poľsku prejavil o zvýšenie podielu semien strukovín vo výžive ľudí a zvierat.
Pokusné zvieratá sú plné biologických výskumov
Na vyšetrovanie sa použili asi 6 mesiacov starí bieli samci potkanov Wistar (odchovaní) s hmotnosťou (350 - 10) g z nášho vlastného plemena. V období medzi evakuáciou potkanov a začiatkom experimentov boli zvieratá kŕmené priemyselne vyrábanou chovnou diltou „Murigran“. Počas štúdií boli potkany chované jednotlivo v metabolických klietkach; každé zviera dostávalo svoju experimentálnu dilt a vodu (ad libitum). ), kde sa kontrolovalo množstvo skonzumovaného jedla a stanovil sa prírastok hmotnosti. Trvanie vyšetrení: 96 h. Plán vyšetrení je uvedený v tab.
Tabuľka 1 Zoznam biologických vyšetrení (počet potkanov vyšetrených v zátvorkách)
Typ stravy Trvanie vyšetrenia [h]
Absolvent chovu Murigran (absolvent kontroly I) PH (12) E (5) B (5)
Absolvent chovu Murigran + 4 "/, rafinóza Absolvent chovu Murigran + 8"; Šľachtiteľská diéta pre rafinózu Murigran + 12 ", varená sója s obsahom rafinózy
Jačmenná krupica (surová) Ovsené vločky Chlieb z pšeničnej múky Varené zemiaky Sušené plnotučné mlieko Kazeínový škrob bez stravy RaEnose PH (6) (kontrolná strava 11) E (3)
B (6) Kazeínová škrobová diéta + 4? O Rafinózová kazeínová škrobová diéta + 8 4; Diéta zo škrobu rafinózy + 12 ° C rafinóza
pH - stanovenie hodnoty pH, stanovenie E - enzýmu, B
RZYNSKI: Raffinose Diet 973
Pred uskutočnením chemických, enzymatických a bakteriologických stanovení boli zvieratá medzi 8. a 9. hodinou ráno dekapitované a každej kryse bol odobratý obsah hrubého čreva. Okrem toho sa pH črevného obsahu stanovilo u 21 potkanov po tom, čo sa každému z nich pomocou sondy podalo 300 mg rafinózy (2 ml 15% roztoku). Zmeny pH obsahu hrubého čreva sa testovali na 160 z celkového počtu 200 testovaných zvierat. Ďalšie enzýmové aktivity sa stanovili u asi 30 potkanov, u ktorých sa stanovilo pH obsahu hrubého čreva. Ak sa mala stanoviť aktivita enzýmu v tenkom čreve, sliznica sa odstránila z vnútorného epitelu časti čreva, ktorá sa nachádzala asi 20 cm od hrubého čreva. Okrem stanovenia pH obsahu hrubého čreva sa uskutočnili bakteriologické vyšetrenia asi u 45 potkanov.
Skutočným biologickým experimentom predchádzali predbežné experimenty na približne 40 ďalších potkanoch; Tiež sa určilo, do akej miery zvieratá prijali podanú stravu (vrátane čistej glukózy, galaktózy, sacharózy, laktózy a rafinózy).
Podávali sa nasledujúce diéty: 1. Kazeínová škrobová diéta (bez rafinózy) podľa HEDINA a ďalších. [11 som použil pri predchádzajúcich vyšetrovaniach
bol. [4] Obsahovalo: 18% kazeínu, 8% sójového oleja, 5% zmesi minerálnych solí, 14% celulózy, 1% zmesi vitamínov, 54 7; Pšeničný škrob. Táto diéta bola jednou z dvoch kontrolných diét.
2. Kazeínové škrobové diéty so 4, 8 a 12% rafinózy. Pri týchto diétach bola časť pšeničného škrobu (4, 8 a 12%) nahradená rafinózou. Použila sa D (+) - rafinóza (pentahydrát) od spoločnosti Sigma.
3. Priemyselne pripravený chovný stupeň Murigran (ako kontrolný stupeň) 4. Chovateľský stupeň Murigran so 4, 8 a 12% raftovými nohavicami. 5. Varené semená sóje, hrášku a fazule použité v predchádzajúcich štúdiách-
ren [4]. Sója (odroda Ajma) obsahuje, namočenú, varenú a predsušenú (43,4% bielkovín; 5,9% rozpustného sawharidu). Hrášok, obsiahnutý, namočený, varený a sušený (22,6 bielkovín; 3,4% rozpustných sacharidov). Biele fazule, namočené, varené a predsušené (23,8% bielkovín; 3,3% rozpustných sacharidov).
6. Na stanovenie hodnoty pH obsahu hrubého čreva sa zvieratá kŕmili aj inými komerčne dostupnými výrobkami: jačmennou krupicou, ovsenými vločkami, pšeničným chlebom, varenými zemiakmi a suchým mliekom.
METÓDY I. Hodnota pH črevného obsahu sa merala pomocou pH metra Radiometer (s dvoma sklenenými a
Calomel elektródy) s presnosťou až na 0,05 (priemerné hodnoty z každého 3 stanovenia, ktoré sa uskutočňovali paralelne na rovnakom intestinálnom obsahu toho istého zvieraťa).
2. Pretože štandard α-galaktozidázy nám nebol k dispozícii, skutočným výskumom predchádzali úvodné metodické experimenty: zahŕňali výrobu neočisteného enzýmového prípravku z pivovarských kvasníc, stanovenie optimálnych podmienok pre enzymatickú hydrolýzu in vitro pre rafinózu a porovnanie účinku získaného kvasinkového prípravku s enzymatickým účinkom obsahu hrubého čreva u potkana.
Nakoniec sa za optimálne pre enzymatickú hydrolýzu rafínu (in vitro) považovalo: pH = 6,0 (tlmivá zmes s kyselinou citrónovou: 9,5 ml 0,1 M kyseliny citrónovej (21,0 g/l) + 4,5 ml 0,1 M citrátu sodného C)., H, 0, Na3 x 2H, O (29,41 g/l), doplnené do 100 ml pomocou H, O); koncentrácia enzýmu, ktorá zodpovedá 2 ml prípravku (alebo 40 mg črevného obsahu), koncentrácia sacharidu vo vzorke 0,2 g; testovacia teplota 37 "C počas 2,5 hodiny.
Za uvedených podmienok sa na pijavý papier nanesie 30 ul vzorky. toto poskytlo dobrý chromatografický obraz o sacharidoch získaných hydrolýzou rafinózy, a to tak pri použití kvasinkového prípravku, ako aj pri enzýmoch obsahu hrubého čreva u potkanov.
Sacharidy sa identifikovali papierovou chromatografiou. Podmienky: Chropa vývojový hrebeň, klesajúci; Zmes rozpúšťadiel: etylacetát - kyselina octová - voda 3: 1: 3; Whatman Paper č. 3; Vývoj 48 hodín pri 18 ° C; ponorná technika do reakčného roztoku podľa TREVELYAN [12].
Množstvo galaktózy sa považovalo za hodnotu aktivity or-galaktozidázy, ktorá počas enzymatickej hydrolýzy rafinózy klesla pod 0 a. Podmienky sa stávajú bezplatnými. Množstvo sacharidov (produkty rozpadu rafinózy) bolo stanovené nepriamo (ako plocha škvrny spôsobenej Ex-
914 The Food 31 (1987) 10
Krivka hustoty sa určila priamo na chromatografickom papieri denzitometrickou metódou 1131).
3. Z technických dôvodov sa bakteriologické vyšetrenia obmedzili na stanovenie aeróbnych baktérií v hrubom čreve zvierat. Počas bakteriologických vyšetrení dostali zvieratá rôzne testovacie diéty (príjem