Základy diagnostiky slín CENSA - Centrum pre analýzu slín

Základy

Základné informácie o teste na sliny

Už takmer storočie sa hormóny merajú v rôznych telesných tekutinách, aby sa získali užitočné informácie pre diagnostiku chorôb. Najmä od 60. rokov 20. storočia nastal obrovský rozmach vo vývoji mimoriadne citlivých metód na meranie najmenších koncentrácií hormónov.

Tu sa obmedzíme na predstavenie analytických metód na meranie steroidných hormónov:

Kortizol, dôležitý hormón pre stresovú schopnosť a rytmus deň-noc
DHEA, nevyhnutný hormón pre náš imunitný systém
Estradiol (E2), (alebo estradiol), najsilnejší typ estrogénu (ženský formatívny hormón)
Estriol (E3), hlavný hormón sliznice
progesterón, luteálny hormón, telu vlastný progestín
testosterón, mužský formatívny pohlavný hormón

Koncentrácie týchto hormónov sú v ľudskom organizme veľmi nízke. Preto je potrebné klásť veľmi vysoké požiadavky na kvalitu metód stanovenia. V opačnom prípade možno očakávať zbytočné výsledky, ktoré sú škodlivejšie ako dobré a ktoré nie sú z ekonomického hľadiska ospravedlniteľné.

Rôzne testovacie postupy

Rôzne postupy pri testovaní hormónov

Najskôr je potrebné poznamenať, že hormóny sa dajú určiť zo štyroch rôznych materiálov: krvné sérum, plná krv, sliny a moč. Každý testovaný materiál pokrýva rôzne hladiny hormónov. Preto by sa nikdy nemalo porovnávať výsledky meraní z rôznych materiálov. Príklad: Výsledky testov z krvného séra a celej krvi sa môžu navzájom veľmi líšiť alebo môžu mať dokonca opačné tvrdenia. To platí aj pre porovnanie hodnôt testu v krvnom sére a slinách.

Aby ste to pochopili, musíte vedieť, že máme dve rôzne oblasti každého z našich hormónov, takzvané „voľné hormóny“ a „viazané hormóny“. Napríklad existuje voľný testosterón a viazaný testosterón. To isté platí pre všetky ostatné typy hormónov u ľudí a stavovcov. Zďaleka najväčší počet všetkých hormónov (95 - 98% ľubovoľného typu) sa viaže na rôzne väzbové proteíny (proteín = proteín) v krvi, napríklad na SHBG, DBG a albumín. Jedná sa o takzvané „viazané hormóny“. Takzvané voľné hormóny (iba 2 - 5% celkových hormónov) sú neuveriteľne malé. To sa zmení, akonáhle je hormón „zachytený“ pomerne veľkou molekulou proteínu a naviazaný na seba.

Význam „voľných hormónov“

Iba voľné hormóny sú schopné dostať sa do bunky. Molekula hormónu musí prechádzať cez bunkovú stenu cez veľmi špeciálny receptor. Každý hormón má svoje vlastné receptory vo väčšine buniek tela. Konkrétna správa alebo účinok hormónu je iba „počutá“ a implementovaná vo vnútri bunky. Len čo je hormón „pripútaný“ na porovnateľne obrovský proteínový batoh, hormón už nie je k dispozícii pre prácu v bunke. Kvôli väzbe na bielkoviny už hormónová molekula nepreniká cez malý otvor receptora v bunkovej stene. Preto 95-98% viazaných hormónov nie je za normálnych okolností aktívnych. Iba zvyšných 2 - 5% príslušného typu hormónu má povolenie na smerovanie svojej hormonálnej správy do buniek.

Ak chceme vedieť, koľko aktívnych, voľných hormónov je v súčasnosti k dispozícii, mali by sme ich merať samostatne. Môže sa to robiť iba v slinách alebo v celej krvi. Jednoznačne najbežnejším meraním je meranie zo séra. Hodnoty v sére nerozlišujú medzi týmito dvoma hladinami hormónov.

Dôležitosť 95-98% viazaných hormónov

Pretože hormóny majú veľký vplyv na takmer všetky bunky, musí sa telu ľahko regulovať. Sme preto zvyknutí, že máme v krvi pomerne veľkú rezervu hormónov. Sú to hormóny viazané na bielkoviny. Ak je jedlo nedostatočné alebo úplne chýba, dôležitú úlohu musia hrať viazané hormóny. Telo môže v čase vážnej núdze spadnúť späť na túto rezervu. Je to podobné ako s tukovou rezervou. Telo chápe takúto núdzu ako B. dlhý pôst, obdobie hladu z iných dôvodov, anorexia, kóma alebo dlhá hnačka. Bez rezervy hormónov by sme prežili iba pár dní.

Príklad s hormónom testosterónom

Naša krv obsahuje 95 - 98% viazaného testosterónu a 2 - 5% voľného testosterónu. Ak je niekto postihnutý častými hnačkami alebo anorexiou, možnou variáciou testu by bolo zistenie celkového množstva všetkých prítomných hormónov testosterónu, t. J. Viazaných a voľných hormónov. To by sa dalo urobiť meraním v krvnom sére. Nebolo by prekvapením, ak sú celkové hladiny testosterónu v tomto prípade veľmi nízke. Títo pacienti prijímajú málo bielkovín jedlom a črevami a je tak k dispozícii málo spojovacieho materiálu. Menej bielkovín v krvi zvyčajne znamená menej viazaných hormónov, takže v našom prípade málo testosterónu. To nemusí vždy znamenať, že je k dispozícii aj málo voľného testosterónu. Pretože voľné hormóny tvoria iba nepatrný zlomok celkových hormónov (2 - 5%), je to pri meraní z krvného séra ťažko viditeľné. Hlavnou časťou merania hormónov v sére je až 98% viazaných hormónov.

Testovanie z krvného séra

Krvné sérum je vodnatá časť krvi, ktorá sa po odstredení usadzuje v sklenenej nádobe ako žltkastá priehľadná kvapalina. V tejto čírej tekutine sú zistiteľné všetky hormóny, ktoré poznáme - 95 - 98% neaktívnych viazaných hormónov a 2 - 5% aktívnych voľných hormónov. Táto metóda merania je preferovaná v lekárskej a klinickej praxi, pretože vždy vyžaduje návštevu ordinácie alebo pobyt na klinike. Zaujímavé sú merania z krvného séra

vychudnutí, slabo vyživovaní ľudia všetkých vekových skupín (v katastrofálnych oblastiach, so staršími alebo zanedbávanými deťmi)
prísni vegáni alebo vegetariáni
pacientov s chronickou hnačkou
Ľudia s poruchami stravovania

Jedna nevýhoda hodnôt hormónov v krvnom sére: referenčné hodnoty majú taký veľký rozsah, že sú terapeuticky relevantné iba v extrémnych prípadoch.

Aplikácie externých hormónov (náplasť, krém, gél, čapík) sú v krvnom sére zistiteľné iba v prípade extrémneho predávkovania. Táto metóda merania preto nie je vhodná na aplikáciu hormónov alebo na kontrolu výrobkov starostlivosti o pleť. Ale presne týmto spôsobom sa počas schvaľovacieho procesu pre hormonálne lieky kontroluje účinok a odporúčané dávky - takpovediac nevhodným „meracím prístrojom“! To vysvetľuje informácie o vysokých dávkach takýchto „prírodných“ hormonálnych liekov.

Hormonálne deriváty, t. J. Synteticky modifikované typy hormónov, nie je možné skontrolovať pomocou žiadnej testovacej metódy.

Testovanie z celej krvi

Tento variant testu sa najčastejšie používa pri stanovení cukrovky 1. typu na stanovenie inzulínu. Voľný tyroxín (T4) a voľný trijódtyronín (FT3) sú dnes štandardnými meraniami - ako to odporúča Nemecká lekárska asociácia. Molekuly hormónov štítnej žľazy sú oveľa väčšie (ako molekuly steroidov). To uľahčuje ich meranie v krvi. V slinách zvyčajne nie sú žiadne voľné hormóny štítnej žľazy.

Sú oveľa vzácnejšie Zadarmo steroidné hormóny stanovené v plnej krvi. Metóda na testovanie celej krvi je vhodná na meranie na klinike, pretože v priebehu prvej hodiny po prebudení je k dispozícii lekár, ktorý umožňuje odobrať niekoľko vzoriek krvi kanylou. U väčšiny steroidov je na získanie zmysluplných údajov potrebných viac vzoriek krvi.

V prípade plazmy sa pri odbere krvi pridá antikoagulant a krvné bunky sa potom oddelia. Plazma preto stále obsahuje všetky koagulanty.

Testovanie zo slín (sliny)

V slinnej tekutine sa nachádzajú iba voľné hormóny, pretože viazané hormóny sú príliš veľké na to, aby boli schopné preniknúť do bunkovej steny slinných žliaz. Niekoľko vzoriek sa zhromažďuje v pevne stanovených časových intervaloch, z ktorých možno určiť zmysluplné priemerné meranie. Tento bod je veľmi dôležitý pri meraní hormónov. Jednorazový odber je podľa Dr. Ziemann má rád „čísla domov“, ktoré sú terapeuticky zbytočné. Dávajú zmysel iba pri špeciálnych hormonálnych dotazoch.

Meranie hormónov zo vzoriek slín má výhodu v tom, že nemusíte ísť na praktický test. Je obzvlášť zaujímavé, že hormonálne štúdie sa dajú veľmi dobre uskutočniť pomocou vzoriek slín. Rovnako fascinujúce je aj sledovanie toho, ako rýchlo telo (najmä cez pokožku) absorbuje a spracováva hormóny. To je veľmi užitočné pri kontrole predpísaných hormonálnych liekov. Týmto spôsobom sme objavili veľa hormonálnych účinkov potravín a výrobkov starostlivosti, ktoré by sa dali ľahko zahrnúť do terapie.

Počas mnohých rokov praxe sme zdokonaľovali pokyny pre zmysluplný návrh testu - s cieľom vyvolať terapeuticky najrelevantnejšie vyhlásenie z testu. To je rovnako dôležité pre zákazníkov a ich sprevádzajúcich špecialistov a otvára to veľa dverí k úplne novým poznatkom v oblasti vedy o hormónoch.

Testovanie z ranného moču

Niektoré rozsahy hormónov by sa teoreticky dali určiť aj v rannom moči alebo v 24-hodinovom odbere moču. Táto metóda sa však nepreukázala ako veľmi účinná pri meraní hormónov. Jedným z veľkých problémov je porovnateľnosť (cieľové hodnoty), pretože každý má inú stravu, ktorá je pri odbere moču veľmi dôležitá. Čo robí pečeň s prebytkom hormónov, je tiež ďalšia neznáma premenná. Typickými dôsledkami takýchto metód merania sú veľké komparatívne rozsahy, ktoré poskytujú málo terapeutických pokynov.

Presnosť/porovnateľnosť merania

Presnosť meraní

Aby bolo možné spoľahlivo určiť steroidné hormóny, sú potrebné analytické metódy, pomocou ktorých je možné bezpečne merať v rozmedzí pikogramov a dokonca aj nižšie. Zvyčajné označenia koncentrácie sú stručne vysvetlené nižšie:

1 gram = 1 000 miligramov (mg)
1 miligram = 1000 mikrogramov (µg)
1 mikrogram = 1000 nanogramov (ng)
1 nanogram = 1 000 pikogramov (pg)
1 gram = 1 000 000 000 000 str

alebo inými slovami: 1 str. = 0,000 000 000 001 g

Toto je takmer nepredstaviteľne nízka koncentrácia, ktorú ilustruje nasledujúci príklad:

Predstavte si šálku kávy, v ktorej je rozpustený kúsok cukru. Opitý pohár sa vypláchne v plaveckom bazéne olympijských rozmerov (asi 2 500 metrov kubických vody). Po dôkladnom premiešaní vody v umývadle odoberte kedykoľvek jednu kvapku vody a zmerajte obsah cukru v pikogramoch. Takýto dôkaz je stále možný, ak do bazéna nalejete kilá iných veľmi podobných chemických látok. Použitý test na slinné hormóny má veľmi vysokú špecifickosť a je ťažké si predstaviť jeho citlivosť.

Tento príklad má poskytnúť obraz o analytických schopnostiach moderného lekárskeho laboratória v súčasnosti. Pri odbere vzorky si tieto nízke koncentrácie hormónov vyžadujú určité preventívne opatrenia, bez ktorých nie je možné dosiahnuť spoľahlivý výsledok.

Porovnateľnosť nameraných hodnôt zo vzoriek krvi a slín

Koncentrácia hormónov v slinách je výrazne nižšia ako v celej krvi (asi 10 až 100-krát nižšia). Tento rozdiel závisí od rôznych faktorov. Pretože sa v krvnom sére dosahuje iný dopyt po hormónoch ako v slinách, nie je v zásade rozumné vyvodiť z merania v krvnom sére diagnostický záver o koncentrácii voľných hormónov v slinách alebo v celej krvi. Pretože iba niekoľko odborníkov pozná tieto podrobnosti, opakovane sa vyskytujú pochybnosti o teste na slinné hormóny.

Stratégie pre výsluchy hormónov

Rôzne stratégie pre dopyt po hormónoch

The dynamický hormonálny test (niekoľko jednotlivých meraní v krátkych časových intervaloch) sú vhodné pre:

Postup hormónov po špeciálnych potravinách, starostlivosti o pokožku, liekoch alebo aplikáciách
Domino efekt aplikácií vysokých hormónov v iných hormonálnych oblastiach
Hormonálny vývoj počas a po cvičení
Progresia cyklu s menštruačnými kŕčmi alebo (nenaplnenou) túžbou mať deti
Priebeh tehotenstva
Dopyt denných a nočných rytmov

Vyšetrovanie priemerná koncentrácia hormónov (s niekoľkými vzorkami každých 15-20 minút - napr. v prvých dvoch hodinách po prebudení) je ideálne pre:

Kontrola aplikácie hormonálnych liekov po 12 alebo 24 hodinách
Hormonálny stav primeraný veku za stanovených podmienok
hodnoty špecifické pre cyklus u žien

Hromadné vzorky za celý deň sa v praxi neosvedčili, pretože pre ne neexistujú realistické komparatívne hodnoty.

Skúšobné vplyvy

Vplyvy, ktoré môžu zmeniť výsledok testu:

V zásade treba poznamenať, že koncentrácia steroidného hormónu nie je statická hodnota, ale sleduje charakteristickú časovú dynamiku. To si vyžaduje veľmi dobre premyslenú stratégiu zberu slín. Existuje veľa spojení, ktoré je potrebné zvážiť. Koncentráciu hormónov môžu ovplyvňovať nasledujúce faktory:

Rytmus deň-noc
Ročné obdobia (slnko, teplota)
Vek, genetika
rod
psychické a fyzické nároky (stres, nedostatok pohybu, choroby)
Diéta/prísun živín
Funkcia čriev a pečene
Práca na zmeny (napr. Permanentná nočná hliadka, rotujúca zmena, letecký personál na veľké vzdialenosti)
Vplyvy prostredia atď.

Je teda dôležité, v akom čase sa vzorka odoberá. Malo by sa preto konať vždy v ten istý deň alebo v rovnakom intervale cyklu, ak je požadovaná porovnateľnosť.

Čas použiteľnosti vzorky slín

Z krvných vzoriek vieme, že sú pomerne nestabilné. Musia sa preto vždy uchovávať v chlade a rýchlo sa dopraviť do laboratória. Vzorky slín na stanovenie steroidných hormónov sa však dajú dobre uchovať. Skladovať sa dajú dobré dva týždne pri normálnej izbovej teplote, aj v letných teplotách (bez chladenia) sa dajú bez problémov poslať poštou. Ak posielate vzorky vo veľmi horúcich letných dňoch, odporúčame vám zásielku odovzdať priamo na poštu, aby ste boli na bezpečnej strane, pretože niektoré voľne stojace poštové schránky môžu byť vystavené extrémnym teplotám v dôsledku priameho slnečného žiarenia.