ANTI-FXA (faktor zvyškovej aktivity Xa) -
Popis
Analýza proti faktoru Xa je navrhnutá na meranie plazmatických hladín heparínu (UH a LMWH) a na sledovanie antikoagulačnej liečby. Heparín je zmes negatívne nabitých glykozaminoglykánov (sulfátovaných mukopolysacharidov), ktoré majú antikoagulačné vlastnosti vďaka svojej interakcii s prírodnou antikoagulačnou protilátkou.
Táto interakcia vedie ku konformačným zmenám v antitrombíne, čo niekoľkonásobne zvyšuje čas antikoagulačnej aktivity. Antikoagulačný účinok antitrombínu je výsledkom inaktivácie určitých koagulačných faktorov, väčšinou v častiach IIa a Xa, enzymatickým štiepením (serínproteáza). K dispozícii sú dva heparínové prípravky - UH a LMWH. UH obsahuje molekuly heparínu so širokým rozsahom molekulových hmotností (3 000 - 30 000 daltonov [v priemere 15 000 - 18 000 daltonov, čo zodpovedá polymérom 45 - 50 monosacharidov]).
LMWH sa pripravuje z UH enzymatickou alebo chemickou filtráciou a depolymerizáciou. LMWH obsahuje iba polyméry s nižšou molekulovou hmotnosťou (priemerná molekulová hmotnosť 5 000 daltonov, približne rovnaká ako polyméry 17 - 18 monosacharidov, vrátane špecifickej pentasacharidovej sekvencie potrebnej na väzbu antitrombínu). Aj keď špecifická väzba LMWH (špecifický pentasacharid) na antitrombín je dostatočná na inaktiváciu faktora Xa, na inaktiváciu trombínu je potrebná nešpecifická väzba dlhších polysacharidových reťazcov (> 18 monosacharidov). Preto LMWH konkrétnejšie inhibuje koaguláciu inaktiváciou faktora Xa viac ako UH.
LMWH tiež inhibuje trombín (faktor IIa); To však závisí od podielu zložiek s vyššou molekulovou hmotnosťou. Riziko krvácania spojené s liečbou heparínom sa zvyšuje s dávkou a súbežným podávaním fibrinolytických látok. Hemoragické riziko je tiež spojené s nedávnym chirurgickým zákrokom, traumou, invazívnymi zákrokmi a sprievodnými hemostatickými poruchami. Vyšetrovatelia uvádzali vzťah medzi podanou dávkou heparínu a účinnosťou a bezpečnosťou liečby. Pretože antikoagulačná odpoveď sa líši od pacienta k pacientovi, štandardnou praxou je sledovanie liečby heparínom a úprava dávkovania na základe výsledkov koagulačných testov podľa protokolu.
Ak sa používajú terapeutické dávky heparínu, obvyklým testom na sledovanie antikoagulačnej aktivity heparínu je aPTT. Na sledovanie vyšších dávok heparínu používaných pri perkutánnych koronárnych zákrokoch a kardiopulmonálnom bypasse sa používa aktivovaný čas zrážania (ACT), pričom v týchto situáciách je aPTT takmer nekoagulovateľný.
indikácie
Test Faktor Xa je indikovaný na sledovanie antikoagulačných účinkov. Monitorovanie antikoagulačnej liečby je potrebné pri intravenóznom podaní, ale nie je nevyhnutné pri subkutánnej liečbe. Pri monitorovaní LMWH hrá zásadnú úlohu test anti-Xa, pretože je to jediný test ponúkaný na tento účel, pretože LMWH má minimálny vplyv na PTT.
Test anti-Xa je navyše najsprávnejšou metódou sledovania UH, najmä v prítomnosti inhibítora obehu alebo keď je základná PTT už predĺžená (ako v prípade nedostatku faktora XII). Nefrakcionovaný heparín: antikoagulačná odpoveď na heparín je menej predvídateľná ako na LMWH (nešpecifická väzba na plazmatické bielkoviny, endotelové bunky a monocyty). Monitorovanie je indikované, ak je vyššia ako profylaktická dávka. Nízkomolekulárny heparín: antikoagulačná odpoveď s LMWH je predvídateľnejšia ako s heparínom (menej nešpecifická väzba).
Monitorovanie je indikované, ak sa LMWH podáva pacientom s renálnou dysfunkciou, nadváhou, dojčatám, tehotným ženám alebo pacientom s vysokým rizikom trombózy/krvácania a ak sa užívajú dlhší čas. Ak je odobratá vzorka hemolyzovaná, žltačka alebo lipemická, interpretujte výsledky opatrne. Hemolýza, bilirubín a lipidy môžu interferovať s chromogénnou analýzou. Anti-Xa analýza je vhodná na sledovanie fondaparinuxu a danaparoidu, ak sa použije príslušná štandardná krivka. Protamíniumsulfát je neúčinný pri zvrátení antikoagulačného účinku LMWH.
Pri monitorovaní UH nie je test anti-Xa (chromogénna analýza) ovplyvnený reakciou akútnej fázy (zvýšený faktor VIII, fibrinogén), na rozdiel od testu PTT. Anti-Xa test tiež nie je ovplyvnený nedostatkom faktorov, s výnimkou nedostatku antitrombínu (koncentrácia heparínu je podhodnotená), ak činidlo neobsahuje antitrombín.
interpretácie
Najbežnejšie používanou metodológiou je chromogénna analýza, pri ktorej sa používa substrát faktora Xa naviazaný na chromofor. Po štiepení substrátu aktívnym enzýmom (faktor Xa) sa uvoľní farebná zlúčenina. Táto metodika zahŕňa pridanie známych množstiev faktora Xa a antitrombínu do vzorky. LMWH alebo UH tvoria komplex inhibítorov antitrombínu a inaktivujú faktor Xa.
Preto je súčet faktora prebytku Xa, ktorý zostáva vo vzorke, nepriamo úmerný počiatočnému množstvu LMWH alebo UH. V dôsledku toho vedú vyššie hladiny LMWH alebo UH vo vzorke k nižšej chromogénnej intenzite. Výsledky sa potom porovnajú so štandardnou krivkou a poskytujú sa v koncentrácii anti-faktora Xa (jednotky/ml).
Niektoré reagencie na test anti-Xa používajú pacientov vlastný antitrombín a iné reagenty pridávajú exogénny antitrombín za vzniku komplexu heparínu a antitrombínu. Nízku hladinu anti-Xa možno pozorovať, ak sa vzorka neodoberá v pravý čas alebo ak dôjde k oneskoreniu v separácii plazmy od zložky krviniek.
Vysokú hladinu anti-Xa možno pozorovať, ak má pacient poruchu funkcie obličiek (v prípade LMWH) alebo ak je vzorka kontaminovaná heparínom (vzorka extrahovaná z línií obsahujúcich heparín).