Prevencia leptínovej rezistencie blokovaním receptorov angiotenzínu II (AT 1) v ráme

Z Inštitútu experimentálnej a klinickej farmakológie a toxikológie na univerzite v Lübecku riaditeľ: Prof. Dr. med. Markus Schwaninger Prevencia leptínovej rezistencie blokovaním receptorov angiotenzínu II (AT 1) v súvislosti s obezitou vyvolanou stravou u potkanov Úvodná dizertačná práca na získanie doktorátu na univerzite v Lübecku - v sekcii medicína - prezentovaná Margot Lau, rodenou Thermannovou z Lübeck Lübeck 2012

leptínovej

1. Spravodajca: prof. Dr. rer. nat. Walter Raasch 2. reportér: Prof. Dr. med. D. Ludwig 3. Spravodajca: prof. Dr. med. P. Gohlke Deň ústnej skúšky: 12. decembra 2012 Schválené pre tlač: Lübeck, 12. decembra 2012 Doktorský výbor sekcie medicíny

Obsah Obsah Obsah. 1 1 Úvod. 4 1.1 Inzulínová rezistencia. 4 1.2 Obezita. 6 1.3 Systém renín-angiotenzín-aldosterón (RAAS). 10 2 Materiál a metódy. 17 2.1 Testovacie protokoly. 17 2.1.1 Pokusné zvieratá. 17 2.1.2 Skúmanie citlivosti na leptín pri telmisartane. 2.1.3 Skúmanie glukózovej tolerancie pri dlhodobom kŕmení jedálňou v bufete. 21 2.2 Príprava roztokov. 22 2.2.1 Inzulínový roztok. 22 2.2.2 Roztok leptínu. 2.2.3 Roztok telmisartanu. 22 2.3 Aplikácia drog alebo látok. 23 2.3.1 Intraperitoneálna aplikácia. 23 2.3.2 Ústne podanie. 23 2.3.3 Subkutánna aplikácia. 23 2.4 Ťažba materiálu. 23 2.4.1 Antikoagulanciá a stabilizátory. 23 2.4.2 Odber krvi z chvosta. 24 2.4.3 Zabitie a odstránenie orgánu. 24 2.5 Funkčné testy. 25 2.5.1 Pletysmografické meranie krvného tlaku. 25 2.5.2 Meranie aktivity. 26 2.5.3 Skúška rezistencie na leptín. 26 2.5.4 Test tolerancie na perorálnu glukózu (OGTT). 28-1 -

Obsah 4 Diskusia. 61 4.1 Vplyv blokády AT 1 telmisartanom na citlivosť na leptín. 61 4.2 Spotreba energie a spotreba podľa CD. 72 4.3 Vplyv CD na vývoj inzulínovej rezistencie. 76 4.4 Vplyv CD na úmrtnosť na SHR. 78 4.5 Výhľad. 79 5 Zhrnutie. 83 6 Bibliografia. 84 7 Príloha. 99 7.1 Zoznam obrázkov. 99 7.2 Zoznam tabuliek. 100 7.3 Látky a získané roztoky. 101 7.4 Formulácie roztokov. 103 7.5 Boli zakúpené testovacie súpravy. 104 7.5.1 súpravy RIA. 104 7.5.2 Súpravy na stanovenie génovej expresie. 104 7.6 Spotrebný materiál. 104 7,7 Zariadenia. 105 7.8 Zoznam skratiek. 107 8 Poďakovanie. 113 9 Životopis. 114 10 publikácií. 116 10.1 Plagát. 116 10.2 Publikácie. 116 10.3 Ceny a ocenenia. 117-3 -

Materiál a metódy 2.3 Aplikácia liekov alebo látok 2.3.1 Intraperitoneálna aplikácia Inzulín sa podával v dávke 0,5 IU/kg intraperitoneálnou injekciou (kanyla 0,4 x 13 mm, BD Microlance). 2.3.2 Orálna aplikácia Orálna aplikácia tekutín sa uskutočňovala pomocou faryngálnej trubice, ktorá sa zaviedla do pažeráka po zvyknutí zvierat. 50% glukóza a telmisartan v dávke 8 mg/kg sa podávali perorálne. 2.3.3 Subkutánna aplikácia Leptín bol injikovaný v dávkach 100 a 200 ug/kg do podkožného tukového tkaniva mediálne do lopatky do kožného záhybu nastaveného na tento účel (kanyla 0,4 x 13 mm, BD Microlance). 2.4 Extrakcia materiálu 2.4.1 Antikoagulanciá a stabilizátory Parametre leptín, inzulín, C-peptid, glukagón, adiponektín a kortikosterón sa stanovili z plazmy v mikrovetvách potiahnutých K-EDTA (Sarstedt). Do jatočnej krvi sa pridal roztok Na-EDTA v konečnej koncentrácii 12,1 mm, aby sa stanovil obsah leptínu v plazme. - 23 -