46589310-microbiology-exam-usmf - zadarmo na stiahnutie PDF
Stručný opis
Popis
Pojem Pojmy izanizmus mikroorganizmov alebo ganizmu. e) Kategória Kategórie taxonomických myší, e, typy acelulárnych typov acelulárnych a bunkových. re. Obzvlášť diferencované medzi mikroorganizmami sú prokaryotické a eukaryotické izmy. Mi/o = mikroskopické organizmy (mikro-nanometre) + riasy, prvoky, vírusy, subvírusové látky (prióny), mikroskopické huby (huby, huby) Klasifikácie Mi/o: fenotypové (prvý pokus - Carl von Linne) genotypové fylogenetika (na základe štúdia fosílií alebo HLA) Taxonomické skupiny: doména ríša vetva trieda poradie rodina rod druh vnútrodruhové taxóny v rámci druhu, ktoré predstavujú určité rozdiely: biovar (biochemická/fyziologická aktivita) biochemická/fyziologický) sérovar (štruktúra Ag) patovar (stupeň patogenity) lizovar (citlivosť na bakteriofágy) antibiovar (citlivosť na AB) Úloha vnútrodruhových taxónov: epidemiologické markery! Mi/o klasifikácia: acel acelulárne formy (vírusy, viroidy, prióny) bunkové formy: baktérie = prokaryoty, vylučujú sa 1) G2) G + 3) micopl plazmové plazmy (pery (chýbajúce PC stránky) PC) archaea = prokaryoty, PC bez peptidoglykánu, biotop v extrémnych podmienkach eukarya = eukaryoty (huby, prvoky) 1
8. Štruktúra Štruktúra bakteriálnych buniek. bakteriálne. Enumerate Enumerate element the elements they permanent permanent te (obligatory (obligatory) orii) and neperman nonpermanent ente (non-obligatory (non-obligatory) ii) of structure structure. a) Cytoplazmatická membrána a cytoplazma. Štruktúra, chemické zloženie a biologické funkcie. Metódy zvýrazňovania. Trvalé prvky: permanentné: PC, MCt, Ct, nukleoid, ribozómy, mezozómy G + (E, cytochrómy) Nestále prvky: tobolky, spóry, bičíky, fimbrie, plazmidy, inklúzie buniek MCt: mozaiková tekutina Spevákovi chýba cholesterol, obsahujú steroly hopanoidné molekuly bohatšie na prot. než eukaryoty viac funkcií (u eukaryotov splnené organelami) PBP - katalýza transpeptidov a syntéza PC permeát - transport prot. systém. sekrécie receptory dýchací reťazec Úloha MCt: 1. Semipermeabilná bariéra, selektívna jednoduchá difúzia, uľahčená 2. Permeát aktívny transport 3. E metabolická aktivita 4. Meta Metabo choroby lism sm ene energetická energia rget 5. Part Partic icip ipaa la diviz división iune neaa bun cellular araa 6. Sint Sintez ezaa PG si fos fosfo foli lipi pide delo lor r • •
Zložka: PG (trojrozmerný) 40-80% ac. teichoici (stanovená NAG), ac. lipoteichoová (fixovaná pomocou MCt) = polyméry ribitolu, glycerol-fosfátu; o záporný elektrický náboj o iónový prenos o f gácia Ag o aktivácia komplementu komplementu o stimulácia sekrécie cytokínov o medzibunková adhézia prot. združený PC alebo Streptococcus pyogenes = prot. M o Staphylococcus aureus = prot. A (zhlukovací faktor), prot. fixátory fibronektínu Uniform Thickness 80 nm
10. Bakteriálna bunková stena, funkcie. Štrukturálne vlastnosti bunkovej steny gramnegatívnych baktérií. sfarbenie
Gram. Technika a mechanizmus farbenia. Dôležitá prax. Príklady gramnegatívnych baktérií. PC G-:
Zložky: PG (dvojrozmerné) 1 - 10% MEx: existencia miest spojenia medzi MEx a MCt úloha v doprave o Prot. hlavné: poríny, receptory (pili, fágy) alebo Prot. minor: Je to odchyt a preprava subst. LP Braun = spája Mexiko a PG stabilizácia MEx LPZ (najneobvyklejšia zložka) stabilizácia MEx o lipid A - nachádza sa v MEx; endotoxín (stimuluje sekréciu cytokínov) o Miex PZ - transport niektorých substrátov; AgR rodová špecifickosť o Lant O (OZ) - negatívne tehotenstvo, zabraňuje fagocytóze; AgO druhová špecifickosť N.B. Bct majú schopnosť modifikovať štruktúru AgO schopnosť oklamať imunitnú obranu nehomogénna hrúbka 12 nm Periplazmatický priestor: E a prot. fixované pomocou MCt Úloha e: hydrolýza, syntéza PC, detoxikácia (napr. beta-laktamázy) Beta-laktamázy)
1. Fialová horca Ct fialová 2. Umyte vodou, ošetrite zeminou. Lugol (jód) tvorba nerozpustného komplexu fialovo-jód fixácia farbiva v bunkách 3. Ošetrované miesta Liečenie alkoholom 95% 95% 3
odstránenie farbiva z Bct G- väčšie póry v PG, vyšší obsah lipidov (rozpustný v alkohole), nízke kyslé pH a údržba farbiva v Bct G + menšie póry, nízky obsah lipidov alkohol dehydratuje stenu a zmenšuje priemer pórov 4. Prefarbenie vodnou fuchsiou Výsledok: G-: červená, G +: fialová Použitie Gramovho farbenia: diagnóza, citlivosť na AB Konkrétne osmoticky citlivé formy: Protoplast = G +, bez PG Sferoplast = G-, MCt + MEx, čiastočne bez PG Foriem L = bct lipid PC, kvôli AB, (i) reverzibilná mykoplazma - bez PC, osmoticky rezistentná zvýšená rezistencia MCt; pleiomorfná forma o
11. Zvláštnosti štruktúry a chemického zloženia bunkovej steny baktérií odolných voči kyselinám. Ziehl-Neelsenovo sfarbenie.
Zvýraznenie spór: farbenie po AUJESZKY 14. Kapsula pre baktérie. Chemické zložené a biologické funkcie. Pozitívne a negatívne metódy farbenia kapsuly. Príklady
Konjugatívne hromady - kapilárne štruktúry proteínovej povahy, prítomné v počte 1-10 na bunku (kódované konjugatívnymi plazmidmi F). Úloha konjugatívnej pili: 5
1. prenos DNA prenos konjugáciou 2. R pre niektoré bakteriofágy Zvýraznenie buniek: elektrónová mikroskopia 16. Nepriame metódy na štúdium mobility baktérií. Príprava natívnych jedál. Vyšetrovacie metódy. princíp
mikroskopia na čiernom pozadí a počet fázových lúčov. Štúdium natívnych preparátov „kvapka kvapka“ alebo „medzi podložnými sklíčkami“ (mikroskopia s fázovým kontrastom alebo na čiernom pozadí). Výsev bakteriálnej kultúry do polotuhého média (pozoruje sa zákalu). Rast kultúry „v závoji“ na povrchu pevného média. 17. Volutínové granulácie. Chemické zloženie a biologické funkcie. Metódy zvýraznenia. Loefflerovo a Neisserovo farbenie.
19. Morfológia a ultraštruktúra mykoplaziem a chlamýdií. Študijné metódy. Patogénne druhy. Mykoplazmy sú baktérie: ohraničené iba trilaminovanou membránou a bez tuhej bunkovej steny, ako aj s genetickými informáciami potrebnými na syntézu prekurzorov špecifických pre danú stenu. Malé a polymorfné formy Kultivuje sa na acelulárnom médiu a kultúra je inhibovaná špecifickými protilátkami. Rozmnožuje sa v cykle, ktorý striedavo zahŕňa predĺženie a fragmentáciu vláknitých foriem na kokosové formy a ich rozdelenie. Vyšetruje sa v závislosti od lokalizácie infekcie, spúta alebo nazofaryngeálneho exsudátu, moču, odobratého panvovou laparoskopiou. Priama mikroskopia je bezcenná, obvyklé sfarbenie nedokáže zistiť mykoplazmy kvôli svojej malej veľkosti. a imunofluorescenčné farbenie neprinieslo uspokojivé výsledky. Izolácia a identifikácia. Sfarbenie diénov, kolónie mykoplaziem sú sfarbené do fialova a pokryté lamelami je možné skúmať ponorením. •
Konzervanty. Asepsa znamená ukrytie sa pred mikroorganizmom. Antisepsa znamená zničenie mikroorganizmov na manipulačných nástrojoch. Filtrácia je prechod kvapaliny cez pórovité teleso - filter. Filtre s vhodnou pórovitosťou sa môžu zbaviť filtrovaného mikroorganizmu, ktorý sa mechanicky a elektrostaticky zadržiava v póroch filtra. Aplikuje sa na sterilizáciu vzduchom, mikrobiálne kultivačné médiá, lieky, ktoré nevydržia zahriatie. Typy filtrov: Klasický porcelán alebo dno zapekacej misky v tvare dutých sviečok na vnútornej strane a na jednom konci uzavreté (filtračné zátky) azbestové filtračné platne impregnované kaolínom (Seitzov filter alebo porézne sklo (Schottov filter). acetát celulózy s pórovitosťami medzi 8 a 0,025 um Filtrácia sa uskutočňuje aspiráciou alebo pretlakom (prispôsobeným injekčnej striekačke). Aby sa zabránilo upchávaniu pórov, suspenzie s vysokou hustotou častíc sa predfiltrujú vláknitým alebo granulovaným materiálom. chemikálie) Látky používané na skladovanie prípravkov 7
Látka Oblasť použitia Koncentrácia% Fenolové imunitné séra, vakcíny 0,3-0,5% Mertiolát sodný Imunitné séra, injekcie 0,004-0,02 Fenol + Mertiolát Imunitné séra, Očné kvapky 0,2 + 0,005; 0,002 + 0,01 benzoan sodný Masti, emulzie, potraviny 0,2-1 Konzervácia fyzikálnymi prostriedkami: Pasterizácia - Zahriatie na 62 - 85 ° ničí vegetatívne formy a nie spóry. Mikrobicídny účinok završuje okamžité ochladenie na 4 ° C tepelným šokom. Chladenie na 4 ° C je široko používané. Zmrazenie - minimálny antimikrobiálny účinok pri ochladení na eutektický bod (-21,3 ° C) zabraňuje tvorbe ľadových kryštálov. Alebo v tekutom dusíku (196 ° C). Lyofilizácia - V mikrobiológii sa používa desikácia na neurčitú konzerváciu kmeňov niektorých sporulujúcich baktérií. Lyofilizácia sa používa na konzerváciu mikroorganizmov, imunitných sér a biologických reagencií. V podstate ide o kryódiu. 23. Mikrobiálny metabolizmus. Zvláštnosti. Bakteriálne enzýmy. Klasifikácia, úloha v mikrobiálnej fyziológii. Praktické uplatnenie
podľa typu dýchania. Príklady. Klasifikácia baktérií podľa zdroja energie fototrofy - využívajú slnečnú energiu (fotosyntéza) chemotrofy - využívajú energiu uvoľnenú z chemických oxidačno-redukčných reakcií. Vyžadujú substrát donoru vodíka (e- a H +) a substrát prijímajúci vodík. 8
chemolithotrophs - H donor = anorganic substance chemoorganotrophs - H donor = organická látka (glukóza, lipidy.) • Patogénne baktérie sú chemoorganotrofné Mechanizmy získavania energie v chemoorganotrofoch v závislosti od konečného prijímateľa H: Aeróbne dýchanie. Konečným prijímačom je plynný kyslík. Zahŕňa transportný reťazec dýchacích elektrónov spojený s MCt. Konečný produkt - H2O alebo H2O2. Anaeróbne dýchanie. Konečné akceptory - anorganické zlúčeniny (dusičnan, síran, S). Transport elektrónov dýchacím reťazcom. Konečné výrobky - dusitany, amoniak, sulfid (v prítomnosti O - H2O2). Kvasenie. Organický substrát sa metabolizuje bez zásahu externého oxidačného činidla. Skladá sa z procesov červeno-červenej, ktoré vykonávajú iba čiastočnú oxidáciu substrátu, pričom donorom a akceptorom H + sú organické látky. To vedie k menšiemu substrátu k oxidovanejšej molekule (napr. Mliečna fermentácia, alkoholová fermentácia, zmiešaná kyselina, acetoínová atď.). Fermentácia môže prebiehať v prítomnosti O2, ale bez jeho zásahu. Klasifikácia baktérií podľa zdrojov energie a uhlíka: fotoautotrofy (slnečná energia, CO2); fotoheterotrof (en. sol., subst.org); chemoautotrofné; chemoheterotrofné (chemolitoheterotrofné, chemoorganoheterotrofné). •
26. Rast a množenie baktérií. Fázy množenia periodických (diskontinuálnych) kultúr baktérií. Kultúra baktérií
kvapalné a tuhé médiá. MC = tuhé roztoky/substráty, poskytuje živiny a fyzikálno-chemické podmienky pre kultiváciu BCT. Môžu byť použité na: kultiváciu (izoláciu) baktérií; Testovanie citlivosti AB; skladovanie alebo preprava plodín bacreanu. Požiadavky na MC: a. Nutričné a energetické potreby, časť 9
optimálna vlhkosť optimálne pH (7,2-7,4) a konštantný (charakter pufra) optimálny oxidačno-redukčný potenciál (anaeróbny - rH210) izotonický (0,5% NaCl) sterilný a transparentný
28. Bakteriologická metóda v diagnostike infekčných chorôb. Cieľ. Prevzaté od pacientov a životného prostredia. Princípy
Fáza IV - HODNOTENIE VÝSLEDKOV, FORMULÁCIA A UVEDENIE ODPOVEDE
Novobiocín Novobiocín, chinolóny (kyselina nalidixová, ciprofloxacín, ofloxacín) - blokujú aktivitu topo-izomeráz, ktoré zasahujú do konformácie DNA. Baktericídny účinok. Sulfamidy a trimetoprim narušujú syntézu kyseliny listovej a folátov (kofaktory pri syntéze AN). Bakteriostatická aktivita. Výroba AB: AB: Biologická metóda; Syntetická metóda; Semisyntetická metóda Fázy biologickej metódy: 1. Kultivácia produkujúcich kmeňov (napr. Penicillium notatum, Actinomyces griseum atď.) Vo vhodnom kvapalnom prostredí 2. Extrakcia AB 3. Čistenie a koncentrácia AB 4. Kontrola toxicity 5. Stanovenie aktivity AB Činnosť AB sa meria v jednotkách hmotnosti (g, mg, ug) alebo účinku (AU). 1 AU - minimálne množstvo AB, ktoré za štandardných podmienok inhibuje rast referenčného kmeňa. Penicilín - 1UA = 0,6 µg čistej látky Požiadavky na AB: Selektívna toxicita; Terapeutický účinok s minimálnymi dávkami; Dlhodobá činnosť; Úzke spektrum účinku; Byť rozpustný a ľahko vstrebateľný; Nevyvolávajte vedľajšie účinky; Nevyvíjajte odolnosť voči AB; Buďte lacní
34. Pojmy citlivých, medziproduktových a antibioticky rezistentných kmeňov baktérií. Metódy stanovenia citlivosti
mikróby k antibiotikám: difuzimetria (podložky), následné riedenia. Pojem minimálna inhibičná koncentrácia (MIC) a minimálna baktericídna koncentrácia (CMB). Citlivosť mikróbov na AB V závislosti na klinických výsledkoch sa baktérie delia do 3 tried: citlivé na AB (S), rezistentné (R) a stredné (I, stredne citlivé). Kmene S - terapeutický účinok sa dosahuje pri obvyklých terapeutických dávkach Kmene R - terapeutický účinok sa nedá dosiahnuť pri terapeutických dávkach Kmene I - terapeutický úspech je nepredvídateľný. Bolo by to možné pri vysokých dávkach alebo pri lokálnom podaní AB. Každý izolovaný kmeň vykazuje osobitnú citlivosť. Môže sa študovať v laboratóriu na stanovenie profilu citlivosti tohto kmeňa, ktorým je antibiogram. Testovanie citlivosti baktérií na metódu AB Diffusion (podložky). Bežne sa používa pri bežných infekciách. a