ABSTRAKT DOKTORSKEJ PRÁCE - PDF Na stiahnutie zadarmo

1 VZŤAH MEDZI DIFERENCIÁCIOU PRE-ADIPOCYTOV A METABOLICKÝM SYNDRÓMOM U OBÉZNYCH PACIENTOV ADRESOVANÝCH NA BARIATRICKÉ CHIRURGIE ABSTRAKT DOKTORSKEJ PRÁCE Koordinátor prof. Dr. Veronica MOCANU, študentka Ioana SACARĂ 2019

práce

2 Disertačná práca obsahuje všeobecnú časť štruktúrovanú do 7 kapitol v rozsahu 42 strán, osobnú časť 6 kapitol v rozsahu 81 strán, 95 obrázkov a 21 tabuliek, 360 bibliografických odkazov a prílohu. Obsah a skratky sa udržiavajú tak, ako sú uvedené v dizertačnej práci, a číselné údaje a tabuľky vybrané pre abstrakt zachovávajú číslovanie v rámci práce. Kľúčové slová: obezita, metabolický syndróm, tukové tkanivo, mezenchymálne kmeňové bunky, adipogénna diferenciácia, bunkové kultúry in vitro.

3 OBSAH č. pag ZOZNAM SKRATIEK. ÚVOD. 1 iv AKTUÁLNA FÁZA ZNALOSTÍ 2 kap. 1 VŠEOBECNÉ ÚDAJE O obezite a metabolickom syndróme Definícia obezity a epidemiologický dopad Metabolický syndróm spojený s obezitou Diagnostické a patogenetické kritériá Stratifikácia kardio-metabolického rizika u obéznych pacientov Dlhodobý vývoj metabolického syndrómu u obéznej populácie Kap. 2 LIEČBA obezity. ÚLOHA BARIATRICKEJ CHIRURGIE Indikácie pre bariatrickú chirurgiu Kontraindikácie pre bariatrickú chirurgiu Výberové konanie pre bariatrickú chirurgiu Kap. 3 TUK V TUKE: METABOLICKÁ A ENDOKRINNÁ SUBJEKT ČINNÁ V OBEZITE Všeobecné aspekty Druhy tukového tkaniva Umiestnenie ložísk tukového tkaniva. Vzťah s metabolickým stavom Štruktúra bieleho tukového tkaniva-endokrinné funkcie tukového tkaniva Kap. 4 FYZIOPATOLOGICKÉ MECHANIZMY METABOLICKÉHO SYNDRÓMU SPOJENÉHO S obezitou 4.1. Dyslipidémia i

6 ZOZNAM SKRATIEK WHO Svetová zdravotnícka organizácia Index telesnej hmotnosti BMI MetS Metabolický syndróm HOMA-IR Homeostatický model Hodnotenie pre inzulínové rezistencie ASC Adipo-odvodené kmeňové bunky - kmeňové bunky odvodené z tukového tkaniva RYGB Žalúdočný bypass Roux-en-Y LGS Lapar DMEM médium pre žalúdočné rukávy Dulbecco's ModifiedEagle DMEM/F12 médium Dulbecco's ModifiedEagle + Ham's F- 12 Medium FBS Fetálne hovädzie sérum IDF Medzinárodná diabetická federácia - Medzinárodná diabetická federácia MHO Metabolický Zdravý Obézny - Obézne Metabolický Zdravý SVF Stromálny vaskulárny trakt V Biely Tuková biela tkanivá Tkanivo CRP C reaktívny proteín C-reaktívny proteín AMPK adenozínmonofosfát-aktivovaná proteínkináza DAPI-4,6 diamidino-2-fenylindol PPAR-y peroxizómový proliferátor aktivovaný gama receptor iv

10 Izolácia a proliferácia mezenchymálnych kmeňových buniek derivovaných z tukového tkaniva Kmeňové bunky derivované z tukového tkaniva (ASC) budú izolované podľa špecifického protokolu opísaného v literatúre (Karen M. Lyons-UCLA, 2008). Obr Izolovaná mezenchymálna kmeňová bunka (3. deň) zo subkutánneho tukového tkaniva obéznych pacientov. Malý počet buniek inkubovaných a dispergovaných v kultivačnej jamke viedol k pomalému rastu a proliferácii v porovnaní s údajmi v literatúre (Mok PL, 2008), do asi 4 týždne, kým sa nedosiahne 80-90% sútok. (A) (B) Obr. Protokol pre proliferáciu ASCS izolovaného z podkožného tukového tkaniva. A. Sledovanie šírenia ASC 6. deň - Mikroskopia v režime jasného poľa (svetelné pole) - -20x B. ASCs Sledovanie proliferácie, deň 9 - Mikroskopia v režime jasného poľa (svetelné pole) - -20x 4

13 Citlivosť Glukóza v krvi, mg/dl Insulinemia, µui/ml 2) Štatistické hodnotenie - komparatívna analýza. Kritérium metabolického syndrómu pre metabolizmus uhľohydrátov MS nonsm 0 (A) (B) Obr Priemerné hodnoty parametrov metabolizmu uhľohydrátov v porovnaní so študijnými skupinami. Existuje teda významne vyššia priemerná úroveň pre inzulinémiu (30,01 vs 16,8; p = 0,001), HOMA -IR (9,39 proti 4,48; p 14 citlivosť ROC krivka 1,0 0,8 0,6 0,4 0,2 0,0 0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 1 - Špecificita Obr Pomer citlivosti/špecifickosti pomeru leptín/adiponektín v determinizme metabolického syndrómu Štúdia č. 2 Histologické hodnotenie rezov podkožného tukového tkaniva - korelácie oblasti adipocytov Priemerná plocha podkožných adipocytov bola signifikantne vyššia u obéznych pacientov s metabolickým syndrómom vs 1289 µm 2; p = 0,001) v porovnaní s tými, ktorí nespĺňajú tieto kritériá 5000, 000 MeanArea-adipocytes-SC um2 3000, 000 Nie Áno Kritériá-Syndróm-metabolický Obr Priemerná úroveň priemernej plochy adipocytov vo funkcii prítomnosť metabolického syndrómu 8

15 MeanArea-adipo-SC um2 MeanArea-adipo-SC um2 Priemerná plocha adipocytov U 57,5% pacientov korelovala vyššia priemerná plocha subkutánnych adipocytov s vyššou hladinou BMI (r = + 0,575; R2 = 0,3308; p = 0,004), ako je znázornené na obrázku R² = BMI, kg/m2. Obr. Korelácia priemerných subkutánnych adipocytov s obezitou. Korelácia medzi strednou plochou adipocytov a HOMA-IR bola priama, strednej intenzity (r = +0,493; p = 0,017), podobne ako u peptidu C (r = +0,622; p = 0,002), ako je znázornené na obrázku r = +0,493; p = 0, HOMA-IR Obr. Korelácia strednej plochy adipocytov s HOMA-IR a peptidom C. Viac ako 60% pacientov spájalo vyššie hodnoty pomeru leptín/adiponektín s vyššími hodnotami priemernej plochy adipocytov (r = +0,602; p = 0,002) (obr.) r = +0,622; p = 0, peptid C

16 MeanArea-adipo-SC um r = +0,602; p = 0, Leptín/Adiponektín Obr. Korelácia medzi strednou plochou adipocytov a pomerom Leptín/Adiponektín Štúdia č. 3 - Výsledky experimentálneho hodnotenia schopnosti adipogénnej diferenciácie subkutánnych AUCs AB Obr. Porovnávacie hodnotenie akumulácie špecifického lipidového pigmentu (olejová červená O) A adipogénne diferencované jamky pre kontrolnú skupinu ASCS s normálnou hmotnosťou pacientov mikroskopické svetlé pole (svetelné pole) 20x; B. Diferenciácia adipogénu pre skupinu ASCS obéznych pacientov mikroskopia svetelného poľa (svetelné pole) 20 x 10