Anti-HCV - CSID Čo sa deje, doktore
Všeobecné informácie
Vírus hepatitídy C (HCV) je zodpovedný za asi 20% akútnej hepatitídy, 60-70% chronickej hepatitídy a asi 30% cirhózy a rakoviny pečene.
HCV, detegovaný v roku 1989, je RNA vírus rodu Flavivirus z čeľade Togaviridae s rozmermi medzi 40 - 60 nm a prevažne obsahom lipidov. Existuje 6 hlavných genotypov a 50 sérotypov HCV. Poznanie genotypu alebo sérotypu (protilátky špecifické pre genotyp) HCV je užitočné pri odporúčaní a vedení liečby. HCV sa prenáša kontaktom s krvou alebo infikovanými krvnými produktmi: transfúzie, použitie ihiel a striekačiek od jednej osoby k druhej, bez sterilizácie alebo nedostatočnej sterilizácie, tetovanie tela, očkovanie nesterilizovaným zariadením, zdieľanie zubnej kefky, holenie, pinzeta, súprava na manikúru. Je tiež prítomný v biologickom prostredí (sliny, mlieko, pošvový sekrét, sperma atď.), Ale v nižšej koncentrácii ako vírus B.
Môže sa tiež prenášať z matky na plod2; 5. Vertikálna prenosová rýchlosť u tehotných žien s anti-HCV pozitívnym sa odhadovala na 2,7-4,4%, pričom táto rýchlosť dosahovala hodnoty 5,4-8,6% u tehotných žien, ktoré majú koinfekciu HCV-HIV1.
Je dobré vedieť, že vírus sa neprenáša spoločným používaním riadu, bazénov a toaliet2.
Asi 85% akútnych foriem prechádza do chronickej formy.
Medzi chronickými nosičmi, s abnormálnymi hodnotami ALT v sére alebo bez nich,
•
70% má chronickú hepatitídu (priemerný interval 10 rokov);
•
10 - 20% vyvinie cirhózu (priemerný interval 20 rokov);
•
50% zomiera na infekciu HCV.
Hepatocelulárny karcinóm sa môže vyskytnúť pri cca. 20% pacientov s cirhózou (priemerný interval 30 rokov) a 1-5% pacientov infikovaných HCV5.
Diagnostické testy na infekciu HCV sú rozdelené do dvoch kategórií:
I - sérologické testy na protilátky;
II - molekulárne testy na detekciu vírusových častíc.
Nástup je zákerný, vírus sa tiež nazýva „časovaná bomba“.
„Sérologické okno“ medzi infekciou HCV a detekciou anti-HCV sa líši od pacienta k pacientovi.
Pri súčasných sérologických testoch sa protilátky detegujú priemerne 7-8 týždňov po nástupe infekcie. V prípade spontánnej eradikácie infekcie môže anti-HCV pretrvávať po celý život alebo postupne klesať až do vymiznutia za niekoľko rokov. U pacientov s chronickou infekciou anti-HCV pretrváva neurčito. V nízkorizikovej populácii je percento ľudí, ktorí uniknú diagnóze, 0,5 - 1%.
Pozitívne výsledky by sa mali potvrdiť ďalšou analýzou - RIBA (test rekombinantného imunoblotu) na indikáciu rektifikácie na 2 vírusové antigény.
S vylepšením skríningových testov a molekulárnych techník je potvrdenie prostredníctvom RIBA čoraz menej potrebné (okrem krvných bánk).
Testovanie HCV RNA (pomocou PCR) potvrdzuje diagnózu a kvantifikuje počet vírusových kópií v krvi (virémia). Takmer všetci pacienti s chronickou infekciou majú v krvi detekovateľnú HCV-RNA4; 5.
Odporúčania pre stanovenie anti-HCV
• diagnóza akútnej/chronickej infekcie alebo anamnéza vírusu hepatitídy C;
• skríning krvných produktov a darcov;
• prenatálny skríning, aby sa zabránilo prenosu infekcie na plod1;.
zbierka
Výcvik pacientov - pôst (napr. pôst) 3.
Odobratý exemplár - úžasný venos3.
Zberová nádoba - vacutainer bez antikoagulancia s/bez separačného gélu3.
Po zbere potrebné spracovanie - sérum sa oddelí odstredením. Pracujte okamžite, pokiaľ to nie je možné, udržujte sérum pri teplote 2 - 8 ° C alebo -20 ° C3.
Skúšobný objem - minimálne 0,5 ml ser3
Príčiny odmietnutia dôkazov - hemolyzovaný exemplár; vzorka vystavená vysokým teplotám; vzorka kontaminovaná baktériami; vzorka obsahujúca azid sodný3.
Vyskúšajte stabilitu - sérum je stabilné 5 dní pri 2-8 ° C; dlhá doba pri -20 ° C; zabrániť rozmrazovaniu/zmrazovaniu3.
Metóda
Elektrochemiluminiscenčná imunochémia (ECLIA).
Test používa antigény odvodené od štruktúrneho proteínu (jadro) a 2 neštrukturálnych proteínov (NS3 a NS4) HCV; NS3 - imunodominantný antigén HCV - sa získava genetickou rekombináciou a je „zosilnený“ na získanie zvýšenej imunologickej aktivity; test ukazuje vysokú citlivosť na všetkých 6 genotypov z rôznych geografických oblastí3.
Referenčné hodnoty - anti-HCV negatívny3.
Limity a interferencie
Falošne negatívne výsledky sa môžu vyskytnúť u imunokompromitovaných (HIV pozitívnych) pacientov s poškodením obličiek, esenciálnou zmiešanou kryoglobulinémiou, opakovaným zmrazovaním a rozmrazovaním alebo dlhodobým skladovaním vzoriek krvi.
Falošne pozitívne výsledky, dokonca aj pri testoch 3. generácie, sa môžu vyskytnúť u autoimunitných ochorení (80% prípadov chronickej aktívnej autoimunitnej hepatitídy), polyarteritis nodosa, reumatoidného faktora, hypergamaglobulinémie, paraproteinémie, pasívneho prenosu protilátok, protilátky anti-peroxid dismutázy (ľudský enzým používaný pri klonovaní) 5.
Detekcia anti-HCV protilátok neumožňuje rozlišovať medzi súčasnou infekciou a anamnézou infekcie. Na potvrdenie diagnózy aktívneho vírusu hepatitídy C je potrebná HCV-RNA RNA.
V malom percente prípadov je možné dosiahnuť slabý pozitívny výsledok pre anti-HCV (analyzátor indikuje hodnotu blízku medznej hodnote pozitivity); v týchto prípadoch sa tiež používa alternatívna testovacia metóda (ELISA). Laboratórium bude o takýchto situáciách komunikovať s odporúčaním overiť špecificitu anti-HCV protilátok potvrdzovacím testom Western blot3.