Základné znalosti o pipete pri manipulácii s kvapalinami - Carl Roth
Správne a správne pipetovanie je jednou zo základných schopností vedeckej práce v laboratóriu. Platné výsledky skúšky sú založené na presne dávkovaných tekutinách. Nároky na presnosť sa zvyšujú, koniec koncov sa používa stále menšie množstvo kvapaliny. Preto sú potrebné účinné riešenia pre pipetovanie.
Stále rozsiahlejšie testovacie série kladú pri pipetovaní dôraz na ďalší faktor: Na výsledky pipetovania má značný vplyv ľudský operátor. Toto zohľadňujú moderné pipetovacie systémy. V tomto článku sumarizujeme základné poznatky o pipetách a ich správnom zaobchádzaní. Prinajmenšom rovnako dôležité: Poskytujeme pokyny pre zavedenie príkladnej pipetovacej praxe vo vašom laboratóriu.
Pipeta a pipetovacie systémy v skratke
Pipeta je laboratórne zariadenie na dávkovanie malého množstva kvapaliny. Spolu so všetkými ostatnými procesmi na prenos kvapaliny v laboratóriu je pipetovanie súčasťou základného procesu manipulácie s kvapalinou. Meranie presného množstva kvapaliny pipetou je základom platných výsledkov testov. Preto výrobcovia enzýmových imunotestov, ktoré sa používajú okrem iného ako testy na lieky, poukazujú najmä na správnu techniku pri použití pipety.
Používajú sa rôzne typy pipiet v závislosti od zamerania aplikácie v laboratóriu a od konkrétnej úlohy dávkovania. Okrem mechanickej pipety sa v mnohých oblastiach presadila aj elektronická pipeta.
Typy pipiet pre rôzne objemy kvapalín
Na základe objemu pipetovanej kvapaliny možno pipety rozdeliť do troch kategórií. Pasteurova pipeta a pipeta s odmerným kvapkadlom sa používajú na prenos väčšieho množstva kvapaliny s nízkymi požiadavkami na presnosť. Pasteurova pipeta je sklenená trubica s priemerom asi 7 milimetrov. Ovládanie vyššie pripevnenej gumovej prísavky spôsobuje, že kvapalina je nasávaná a dávkovaná. Pasteurova pipeta, ktorá sa zužuje smerom dole, nemá stupnicu. Pasteurove pipety sú k dispozícii aj ako jednorazový plastový materiál - gumová prísavka je tu už integrovaná.
Pokiaľ ide o presnejšie dávkovanie niekoľkých mililitrov kvapaliny, metódou voľby sú odmerné a odmerné pipety zo skla. Odmerná pipeta má stupnicu objemov, ktorá umožňuje zmerať niekoľko objemov. U objemových pipiet má naopak užívateľ k dispozícii iba jeden pevný objem, ktorý je definovaný pomocou jedného alebo dvoch označení objemu. Väčšia flexibilita odstupňovaných pipiet obvykle prichádza na úkor ich presnosti. Na odsávanie a vyprázdňovanie kvapaliny sú potrebné pipetovacie pomôcky. Od jednoduchých sacích guličiek až po pipetovacie pomôcky napájané z batérie existujú rôzne možnosti, podľa vašich potrieb. Generujú potrebné tlakové podmienky.
Manipulácia s veľmi malým množstvom kvapaliny od niekoľkých mililitrov do menej ako jedného mikrolitru je oblasťou použitia mikrolitrových pipiet, ktoré sa používajú predovšetkým v analytickej chémii a molekulárnej biológii. Tieto pipety fungujú na princípe zdvihu piestu a sú presnejšie ako bežné sklenené pipety. Nie samotná pipeta, ale iba priložený plastový hrot prichádza do styku s kvapalinou. Mechanický pohyb piestu v pipete vytvára požadované tlakové podmienky. Používateľ obvykle ovláda piest pipety palcom. Pipety so zdvihom piestu sú k dispozícii v dvoch typoch: Pipety so vzduchovým vankúšom zadržiavajú množstvo vzduchu medzi piestom a nasávanou kvapalinou. Objemové pipety eliminujú túto vrstvu vzduchu pomocou špeciálnych pipetovacích špičiek. Piestová pipeta s nastaviteľným objemom čoraz viac nahrádza menej flexibilné zariadenia na fixné množstvo kvapaliny. Pipety so zdvihovým piestom je možné kalibrovať podľa požiadaviek normy DIN EN ISO 8655. Vďaka svojej viackanálovej pipetovej aparatúre zariadenie súčasne vydáva niekoľkokrát rovnaké množstvo kvapaliny. Pipety ovládané piestom majú často ďalší ovládací prvok na vysunutie použitej jednorazovej injekčnej striekačky.
Ručné a automatické dávkovacie systémy v laboratóriu
Mechanické pipety sú čoraz menej populárne ako elektronické pipety. Tu dodáva batériu energiu na pohyb piestu. Laboratóriá so zodpovedajúcim profilom aktivity sa tiež spoliehajú na automatické dávkovacie systémy. Rozhodujúce sú vždy aplikácie v laboratóriu. Zameranie na farmaceutický výskum s vysokou výkonnosťou vytvára úplne odlišné rámcové podmienky ako spoločnosť navrhnutá pre flexibilitu.
Automatické systémy dosahujú presné výsledky a vylučujú zamestnancov ako zdroj chýb pri použití pipiet. Zariadenia môžu pokrývať širokú škálu režimov pipetovania a iných dávkovacích techník. Pracujú ako viackanálový systém a majú svoje výhody najmä pri použití veľkých mikrotitračných doštičiek alebo jamkových platní.
Pre používateľov a vedúcich laboratórií: pipetujte správne
Vyšší stupeň automatizácie oslobodzuje ľudí od dôležitého ovplyvňujúceho faktora pri pipetovaní. Pretože dlhé série testov unavujú používateľa. Napríklad pri použití mechanických pipiet sa často vyskytujú chyby, ktoré majú vplyv na výsledky pipetovania.
Štandardizujte pipetovacie techniky
Aj bez faktora únavy a ním vyvolaných chýb sa zamestnanci laboratória líšia svojimi zručnosťami a technikami pipetovania. Správne pipetovanie nie je ľahké - vedie to k odchýlkam vo vydanom objeme. Preto by sa mala venovať osobitná pozornosť správnemu a dôslednému uplatňovaniu pipetovacích techník. Ako príklad slúži pipetovanie dopredu a dozadu (reverzné pipetovanie). Teoreticky by ste mali dávkovať rovnaké objemy, v praxi však reverzné pipetovanie môže viesť k vyššiemu množstvu. Používatelia laboratória však často používajú všetky pipetovacie techniky. Na zabezpečenie optimálnych výsledkov v laboratóriu je dôležitá definícia jednotnej pipetovacej techniky v súvislosti s aplikáciou.
Zavedenie správnej pipetovacej praxe
Tieto pokyny pre správnu pipetovaciu prax slúžia aj na zaistenie dobrých výsledkov pri pipetovaní:
Tieto pokyny však nemôžu nahradiť jednu vec: rutinu používateľa. Pretože je potrebné si nacvičiť aj pipetovanie. Len tak v praxi dosiahneme ideál pokojných aj plynulých pohybov.
Aplikačne orientované riešenia pre manipuláciu s kvapalinami
Racionálna laboratórna prevádzka vyžaduje použitie prispôsobených riešení pre manipuláciu s kvapalinami. Práve preto, že manipulácia s kvapalinami je jedným z hlavných procesov v laboratóriu, musia zariadenia túto aplikáciu optimálne podporovať. Patria sem aj stojany na pipety a špičky. Naše technické poradenstvo ponúka orientáciu pre používateľov, ktorí hľadajú optimum pre svoje použitie medzi mechanickými a elektronickými pipetami, dávkovačmi a automatickými pipetovacími systémami.