Príprava vzorky na analýzu tuku - LABO ONLINE
Mikrovlnná extrakcia a derivatizácia
Príprava vzorky na analýzu tuku
Pred viac ako 10 rokmi predstavila spoločnosť MLS svoje mikrovlnné technické riešenie na rýchle stanovenie gravimetrického tuku. Medzitým si to našlo cestu do mnohých laboratórií. Je výhodné, že klasická analýza mastných kyselín sa môže uskutočniť aj s tukom získaným bez ďalšej prípravy. Ďalej je tu opísaná priama premena vzorky pomocou mikrovlnnej rúry na metylestery mastných kyselín.
Všetky tri arbitračné metódy na stanovenie tuku sú gravimetrické metódy - gravimetrické hodnotenie umožňuje obzvlášť vysokú presnosť. Tri metódy Weibull-Stoldt, Röse-Gottlieb a Schmid-Bondzynski-Ratzlaff však znamenajú pomerne veľké množstvo práce a času. Žiadna z arbitrážnych metód navyše neplatí pre všetky vzorky potravín a krmív.
Spoločnosť pre článok
Témy v článku
Stanovenie tuku podporované mikrovlnnou rúrou je okrem iného. preto oveľa rýchlejšie, pretože hydrolýza vzoriek prebieha súčasne s extrakciou [1]. Aj tu sa hodnotenie vykonáva gravimetricky s vysokou mierou presnosti. Metóda uskutočňovaná so zariadeniami od MLS dokáže spracovať množstvo vzorky do 15 g, takže je možné získať presné výsledky aj pri nízkom obsahu tuku. Štandardná hmotnosť pre všetky vzorky potravín a krmív s normálnym obsahom tuku je najmenej 3 až 6 g. Ďalej pokračuje technický vývoj: priepustnosť so štandardným kontajnerom sa mohla zvýšiť z 12 na 15 vzoriek na sériu.
Aby bolo možné metódu použiť v rutine, musí sa vždy vykonať validácia. Pozitívne v tejto súvislosti: Stanovenie gravimetrického tuku pomocou mikrovlnnej rúry bolo tento rok publikované v knihe metód VDLUFA, zväzok VI C 15.2.7 [2]. Medzilaboratórne porovnanie, ktoré už bolo vykonané, poskytuje základné potvrdenie.
Stanovenie mastných kyselín po extrakcii
Skúsenosti z rôznych nemeckých laboratórií ukazujú, že tuk získaný pri stanovení tuku je možné bez problémov použiť na ďalšie vyšetrenia. Dôležitou výhodou je, že tuk je už bezvodý, a teda derivatizuje na metylestery mastných kyselín (FAME) z. B. beží s metanolátom Na bez konkurenčnej reakcie. Na stanovenie mastných kyselín nie je potrebná samostatná extrakcia. Pri 25 ml cyklohexánu na vzorku je potreba rozpúšťadla dosť nízka. Tabuľka 1 ukazuje dobrú zhodu s použitím referenčnej vzorky koláčovej zmesi.
Priama derivatizácia pre ďalšiu analýzu
Klasicky sa tuky premieňajú na FAME za alkalických podmienok pomocou metanolátu sodného. Ako je opísané, je to užitočné, keď je tuk už izolovaný, ako napr. B. po stanovení obsahu tuku. Ide o transesterifikáciu. To znamená, že touto metódou sa nezaznamenávajú voľné mastné kyseliny. Bez predchádzajúcej extrakcie je však potrebných niekoľko pracovných krokov, ktoré predstavujú pomerne veľké množstvo práce.
Alternatívne sa FAME môže získať aj kyslou konverziou. Dobre známym príkladom je reakcia s vysoko toxickou Lewisovou kyselinou BF3. Toxicita BF3 bola dostatočnou motiváciou na hľadanie inej možnosti. Nakoniec sa metanolická kyselina sírová osvedčila na použitie v mikrovlnnej rúre. Ďalšia výhoda: kyslé metódy esterifikujú voľné mastné kyseliny a pri dostatočnom prebytku alkoholu vedú k úplnej premene. Už pri slnečnicovom oleji sa preukázalo, že táto metóda s mikrovlnnou podporou je v zásade vhodná (tabuľka 2). Významná zmena vo vzorci mastných kyselín sa nenašla.
Pri takomto jednokrokovom postupe je nevyhnutná suchá vzorka, inak dôjde k konkurenčným reakciám. Cieľom je extrahovať a derivatizovať vhodné práškové vzorky v jednom pracovnom kroku. Nová metóda môže napr. B. paralelne implementujte 24 vzoriek pomocou kroku zahrievania, ktorý trvá iba 30 minút. Potom sa z hornej fázy rozpúšťadla odoberie alikvotná časť a krátko sa pretrepe s vhodnou soľou. Metylestery mastných kyselín sú potom pripravené na GC.
Záver
Metóda opísaná v knihe metód VDLUFA na stanovenie obsahu tuku pomocou mikrovlnnej rúry znižuje pracovné zaťaženie v laboratóriu a je možné ju použiť na všetky vzorky v potravinárskom a krmivovom priemysle. Pre následnú derivatizáciu na metylestery mastných kyselín (FAME) bol teraz na MLS vyvinutý ďalší proces podporovaný mikrovlnami, pomocou ktorého je možné priamo prevádzať vhodné vzorky. To ďalej zvyšuje flexibilitu mikrovlnnej technológie.